纳米复合聚(I:C)制剂及其用途制造技术

本文使用新型的标记纳米复合聚(I:C)制剂在体外和体内表征免疫细胞和癌细胞，所述免疫细胞和癌细胞可以更有效地内化纳米复合聚(I:C)制剂，并因此被这些制剂更有效地改变。细胞对所公开的制剂的内化，除了可鉴定用于有益地(单独或与其他药物组合)施用纳米复合聚(I:C)制剂的优选途径和方案外，还允许定义特定的医学适应症和/或受试患者群体(特别是在患有癌症的受试者中)，以对这些患者实现期望的治疗效果。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】纳米复合聚(I:C)制剂及其用途
本专利技术涉及药物制剂的改进的检测、评估和临床用途，所述药物制剂包含通过多核糖核苷酸和聚合物的组合所形成的粒子。
技术介绍
近年来已经研究了能够模拟病毒dsRNA的双链RNA(dsRNA)合成类似物的用途，特别是它们在特异性地激活针对肿瘤的免疫系统中的作用，目的是抑制癌细胞生长并且诱导癌细胞的细胞凋亡。特别地，已将双链聚肌苷酸-聚胞苷酸(称为聚(I:C)或pIC)表征为一种针对多种癌症类型及其转移提供各种治疗作用的dsRNA类型，这些作用的实现依赖于或非依赖于免疫系统激活、自然杀伤细胞和/或树突细胞介导的活性、和/或肿瘤基因表达与细胞微环境的改变。在近几年中，在配制具有免疫调节和/或治疗特性的聚(I:C)分子方面已报道有显著进展。针对各种剂量、施用方案和医学适应症，已公开将聚(I:C)分子制备和配制在具有或不具有靶向部分、载体聚合物和化学接头的聚合物基微粒子内的方法。与聚(I:C)分子作为药物的临床开发及其满足监管要求的顺应性有关的缺点可通过制造结构上复杂的抗癌复合物来克服，所述抗癌复合物包含聚(I:C)分子与用于癌症疗法的药物递送系统，所述药物递送系统通常基于阳离子聚合物(例如壳聚糖、聚乙烯亚胺(PEI)或聚L-赖氨酸)。这些聚合物系统也称为聚合复合物系统，或更具体地称为纳米复合物系统，纳米复合物系统对应于由药物纳米粒子与带相反电荷的聚合电解质形成的复合物(Kadam,RN等人，2015)。在针对基于聚核糖肌苷酸：聚核糖胞苷酸的产品所描述的聚合复合物选择中(PatelMC等人，2014)，PEI代表尤其有益于作为阳离子聚合物的聚亚烷基亚胺，其可在各种水平上进行改性和调整。涉及制备和施用与PEI联合的聚(I:C)分子(作为TLR3、RIG-I和/或MDA5激动剂)的这种方法已在文献中(TormoD等人，2009；WO2011/003883)例示为称为BO-110的药剂。制造BO-110产品的初始方法已通过一种提供纳米复合粒子的方法得以改进，所述纳米复合粒子的特征在于高度可控的均匀尺寸、高浓度的聚(I:C)分子以及有益的生物活性(例如强力的肿瘤-靶向治疗作用)。PCT/EP2016/078078和PCT/EP2017/079688中描述了这种制造方法和所得的药物组合物(通常称为BO-11X，以一种称为BO-112的制剂为例)，其中在各种基于细胞的系统、动物模型以及临床研究(特别是通过肿瘤内注射)中对BO-112的生物活性和治疗活性进行了测试。在1期研究中，发现BO-112作为单一治疗或与抗PD1阻断组合治疗存在实体瘤的患者时是安全的(MarquezRodasI等人，2018)。然而，迄今为止，BO-11X制剂的临床前和临床特征仍需要进一步表征基本作用机制、施用后细胞定位和生物分布以及与人体细胞的相互作用(主要是通过细胞内化)，这样可确立BO-11X作为药物(例如癌症治疗剂)的可行的医学用途，其不仅是针对特定的病况、当前应用的治疗方案和/或剂量方案，而且还可能针对对特定的患者亚群的治疗用途。实际上，除了改进BO-11X的一般临床评估和用途以及患者依从性外，还重要的是表征细胞类型特异性的BO-11X相互作用、肿瘤和其他组织内部或附近的定位以及与候选患者的分子和生物学谱对应的任何其他生理作用，以便在具有相当的临床状况但对癌症治疗(特别是护理标准方案(例如放射疗法)、靶向癌症抗原的抗体或癌症免疫疗法)有不同反应的癌症患者中使用具有明确安全性界限和治疗作用的BO-11X制剂。
技术实现思路
本专利技术涉及细胞特异性BO-11X相互作用以及在体外和体内，特别是在临床环境中的相应治疗作用的表征。在一个实施方案中，本公开内容涉及一种或多种由PEI和聚(I:C)分子形成的粒子的新型纳米复合制剂，其用作治疗组合物，还用作Toll样受体3(TLR3)和/或细胞质双链RNA(dsRNA)传感器(例如RIG-1或MDA5)的激动剂，所述纳米复合制剂在PEI和/或聚(I:C)分子(称为BO-11XL制剂)内进行标记，优选使用荧光团进行标记。本专利技术涉及包含有效标记的纳米复合粒子的BO-11X制剂的用途，在施用制剂后，特别是通过肿瘤内或通过其他类型的注射施用制剂后，所述BO-11X制剂允许识别组织或器官(例如淋巴结、皮肤或诸如肝或肺的内脏器官)内优选与相似类型的复合物(其以BO-11X制剂为特征)相互作用的细胞。所公开的BO-11XL制剂允许识别和追踪优选与所公开的纳米粒子相互作用的免疫细胞和癌细胞的定位和/或数量和生物学特征的变化。BO-11XL和BO-11X制剂对这些细胞发挥独特的有益生物学治疗作用(例如改变细胞标记物、基因表达或活力)和/或通过替代性生物学机制改变这些细胞在人体中的活性，特别是在肿瘤或淋巴结内的活性，优选地，其中细胞源自哺乳动物受试者，包括人类受试者。当分析并比较用BO-11X制剂治疗(或作为治疗的候选对象)的癌症患者中观察到的临床读数或治疗作用、并由此提出与纳米复合制剂相互作用的细胞时，这些研究结果有利地允许限定BO-11X制剂的新临床用途，所述BO-11X制剂可单独或作为第一治疗组合物与第二治疗剂(包括常规癌症治疗(例如标准护理和/或癌症免疫疗法))组合、在针对特定类型的癌症或患有癌症的患者群体的治疗期间或之前使用，所述患者群体包括可通过更适当的剂量、方案、或施用药物(例如针对癌抗原或免疫检查点的抗体)的方法而特别受益的那些。用于确定治疗癌症的药物方案的这些方法包括在体外或离体(使用细胞系、肿瘤活检或获自癌症患者的血液样本)检测包含纳米复合粒子的药物制剂在生物学样本内的作用。在后一种情况下，可以选择被确定为BO-11X治疗(作为一线或后续治疗)的候选对象的受试者进行这种治疗，或者所述受试者因为表现出特定的参数(例如生物标记物)和/或对常规的标准护理癌症疗法或靶向特定癌抗原、免疫检查点、细胞或生物学通路的癌症疗法无反应并且涉及不同化学性质(例如小分子、肽、抗体、基于细胞的产品、或核酸)的癌症疗法，而可被确定为优选使用BO-11X制剂进行治疗。实际上，BO-11X制剂的上述验证过程还可以使得表征BO-11X制剂，其中使用不同的体外、体内和/或离体模型测试粒子、PEI分子和/或聚(I:C)分子的替代性尺寸范围，以确定出对癌细胞和/或免疫细胞具有最佳治疗和/或药学相关作用的尺寸范围，从而除了BO-112制剂之外，还提供其他有用的BO-11X制剂。本专利技术进一步涉及BO-11X制剂的优化医学用途，例如针对癌症治疗在特定方案和/或组合方面改进的方法和方案，特别是包括针对癌抗原(例如CD20或Her2)和/或免疫检查点(例如PD-1或PD-L1)施用抗体作为第二治疗剂的那些，用于监测对BO-11X治疗的临床反应并调整这种治疗的方法，用于在BO-11X治疗之前评估癌症患者的潜在临床反应的方法，或者用于治疗癌症或用于针对特定适应症和/或特定癌症患者改善包含BO-11X制剂的药物组合物的方法。这些方法还可以包括与用于确定这些患者临床反应的标准化评估标准进行比较，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于确定治疗癌症的一种或多种药物方案的方法，包括：/n(a)获取生物学样本；/n(b)在将第一治疗组合物单独或与第二治疗剂组合施用至受试者后，基于临床反应来检测所述生物学样本中的药物作用，其中所述第一治疗组合物包含具有一种或多种纳米复合粒子的制剂，所述纳米复合粒子由PEI和聚(I:C)分子形成，任选地包含荧光团标记；以及/n(c)基于所述药物作用来确定治疗样本中的癌症的一种或多种药物方案。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181121 EP 18207579.61.一种用于确定治疗癌症的一种或多种药物方案的方法，包括：
(a)获取生物学样本；
(b)在将第一治疗组合物单独或与第二治疗剂组合施用至受试者后，基于临床反应来检测所述生物学样本中的药物作用，其中所述第一治疗组合物包含具有一种或多种纳米复合粒子的制剂，所述纳米复合粒子由PEI和聚(I:C)分子形成，任选地包含荧光团标记；以及
(c)基于所述药物作用来确定治疗样本中的癌症的一种或多种药物方案。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物学样本是源自受试者，优选人类受试者的血液样本或肿瘤活检。


3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物学样本是细胞系。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述第一治疗组合物是BO-11X制剂。


5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述BO-11X制剂是包含粒子的水性组合物，其中：(a)每个粒子包含至少一种双链多核糖核苷酸或其盐或溶剂化物与至少一种聚亚烷基亚胺或其盐和/或溶剂化物的复合物，其中所述双链多核糖核苷酸为聚肌苷酸-聚胞苷酸[聚(I:C)]，其中至少60％的双链多核糖核苷酸具有至少850个碱基对，至少70％的双链多核糖核苷酸具有400至5000个之间的碱基对，并且20％至45％之间的双链多核糖核苷酸具有400至850个之间的碱基对；所述聚亚烷基亚胺包含至少95％的聚乙烯亚胺，其中所述聚亚烷基亚胺的平均分子量为17至23kDa之间，多分散指数等于或小于1.5，并且所述组合物中所述聚亚烷基亚胺的氮摩尔数与所述双链多核糖核苷酸的磷摩尔数之比为2.5至5.5之间；(b)所述粒子具有的根据ISO22412：2008所测量的z平均直径在30nm至150nm之间；以及(c)至少99％的所述粒子具有的直径分布低于600nm。


6.根据权利要求4所述的方法，其中，所述BO-11X制剂是包含粒子的水性组合物，其中：(i)所述粒子中的每一个是通过生成至少一种双链多核糖核苷酸或其盐或溶剂化物与至少一种线性聚亚烷基亚胺或其盐和/或其溶剂化物的复合物而形成的，其中所述双链多核糖核苷酸为聚(I:C)分子，所述线性聚亚烷基亚胺的平均分子量在17至23kDa之间；(ii)至少90％的所述粒子具有的单峰直径低于300nm；所述粒子具有的z平均直径小于或等于200nm，如根据ISO22412：2017所测量的；以及(iii)根据ISO13099-2:2012，所述组合物具有的ζ电势等于或大于30mV，优选地在35至45mV之间；其中在所述组合物中以所述聚亚烷基亚胺的氮摩尔数与所述双链多核糖核苷酸的磷摩尔数之比等于或大于2.5形成所述粒子。


7.根据任一前述权利要求所述的方法，其中，所述第二治疗剂是抗PD-1或抗PD-L1抗体。


8.根据任一前述权利要求所述的方法，其中，所述一种或多种纳米复合粒子被荧光团标记(BO-11XL)。


9.根据任一前述权利要求所述的方法，其中，根据对生物标记物、癌抗原、免疫细胞或临床标准的分析来定义所述临床反应，所述临床标准包括肿瘤负荷、肿瘤分期、转移量和/或肿瘤复发。


10.根据任一前述权利要求所述的方法，其中，基于针对所述受试者的临床反应的相应标准化评估标准来确定在步骤(b)中检测到的药物作用。


11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述标准化评估标准是根据RECIST、irRC和/或PERCIST标准化标准所定义。


12.根据任一前述权利要求所述的方法，其中，在步骤(b)中检...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·O·昆泰尔诺，D·泰尔哥，J·M·里奥斯德勒罗萨，P·P·洛佩斯卡萨斯，
申请(专利权)人：亮点医疗有限责任公司，
类型：发明
国别省市：西班牙;ES