一种高效表达碱性蛋白酶的启动子及其应用制造技术

本发明专利技术为提高碱性蛋白酶的活性提供了一种新的启动子P64，该启动子来源于解淀粉芽孢杆菌，通过对基因组转录组数据分析和酶活检测方法获得。在新型启动子P64的调控下，碱性蛋白酶基因在重组工程菌株解淀粉芽孢杆菌P64‑pLF/11018中得到了高效表达，酶活达到12751U/mL，是野生型解淀粉芽孢杆菌(938U/mL)的13.6倍，极具工业应用潜力。本发明专利技术除了应用于工业生产外，还为解淀粉芽孢杆菌中外源基因高效表达研究奠定了基础，对促进其基因技术和微生物代谢工程的进一步发展具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种高效表达碱性蛋白酶的启动子及其应用
：本专利技术属于生物
，具体涉及一种高效表达碱性蛋白酶基因的启动子及其应用。
技术介绍
：解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)是一种与枯草芽孢杆菌亲缘性很高的细菌,可抑制多种植物病原菌的生长。在其自身的生长过程中可以产生一系列的代谢产物，这些代谢产物使得解淀粉芽孢杆菌能够具有广泛地抑制真菌和细菌的活性。同时具有促进植物生长的功能，还可通过诱导植株增强自身免疫系统以提高抗病能力。有研究表明，解淀粉芽孢杆菌具有较强的蛋白分泌能力，在异源基因表达宿主方面有突出表现。作为工业酶制剂的蛋白酶能催化蛋白质和多肽水解，在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中均具重要的应用价值。微生物来源的蛋白酶，相对于动植物来源蛋白酶，具有下游技术处理相对简单、价格低廉、菌体易于培养、产量高的特性。近年来，国内外研究者对碱性蛋白酶基因工程做了大量的工作，取得了较大进展。Tang等利用芽孢杆菌穿梭表达载体构建了碱性蛋白酶基因重组表达质粒，在枯草芽孢杆菌中进行了高表达研究。何少明等从短小芽孢杆菌中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种碱性蛋白酶基因的启动子P64，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种碱性蛋白酶基因的启动子P64，其核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。


2.含有权利要求1所述的启动子P64的重组载体。


3.含有权利要求2所述的重组载体的宿主细胞。


4.如权利要求1所述的启动子P64在碱性蛋白酶基因表达中的应用。


5.扩增权利要求1所述的启动子P64的引物P64-F和P64-R，其特征在于：所述引物P64-F和P64-R的核苷酸序列分别如SEQIDNO:2和SEQIDNO:3所示。


6.根据权利要求2所述重组载体，其特征在于：...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛淑红，王珊，路福平，张会图，李玉，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津;12