【技术实现步骤摘要】
调控强度弱化的酵母菌启动子及其在代谢通量调控中的应用
本专利技术涉及基因工程和代谢工程领域中调控强度弱化的酵母菌启动子及其在代谢通量调控中的应用。
技术介绍
酵母菌是现代生物
非常重要的细胞工厂，在生物能源、大宗化学品、精细化学品及生物医药等领域有着非常广泛的应用。以酵母菌为底盘细胞，通过不同策略重构、改造和优化代谢通路，是实现目标代谢产物高效合成的重要手段。转录调控是控制基因表达水平和相关蛋白质活性的关键调控环节，利用强效启动子增强目标代谢产物合成相关基因的表达是代谢工程改造中最通用和有效的技术手段，因此对不同来源的启动子进行筛选和改造获得调控强度更高的启动子一直是本领域的研究热点。但生物体内的代谢并不是独立的直线型途径，而是存在多个分支、相互依存的复杂网络模式，一味地提高关键基因的表达水平并不一定能实现目标产物产量的持续提高，其合成途径中需要各个基因的相互协调和配合，需要实现各个基因表达水平的平衡。因此除利用强效启动子增强目标产物合成代谢相关基因的表达外，还需要利用合适的启动子降低分支、分解或衍生途径相关基...
【技术保护点】
1.一种DNA分子，其特征在于，所述DNA分子是在酵母内源启动子上整合具有阻遏作用的异源顺式调控元件，获得的调控强度降低或减弱的重组启动子。/n
【技术特征摘要】
1.一种DNA分子，其特征在于，所述DNA分子是在酵母内源启动子上整合具有阻遏作用的异源顺式调控元件，获得的调控强度降低或减弱的重组启动子。
2.根据权利要求1所述的DNA分子，其特征在于，所述整合选自下述至少一种：
A1)在所述酵母内源启动子中插入所述异源顺式调控元件，
A2)用所述异源顺式调控元件替换所述酵母内源启动子中的DNA片段。
3.根据权利要求2所述的DNA分子，其特征在于，所述异源顺式调控元件是大肠杆菌阻遏蛋白MarR的DNA结合序列marO，所述marO的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。
4.根据权利要求1-3中任一所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子为下述任一种：
P1)所述DNA分子中，所述酵母内源启动子为酿酒酵母角鲨烯单加氧酶基因ERG1启动子ERG1p，其核苷酸序列如SEQIDNo.6所示；
P2)所述DNA分子为ERG1p(M5)、ERG1p(M4)、ERG1p(M1)、ERG1p(M6)、ERG1p(M3)、或ERG1p(M2)；
所述ERG1p(M5)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.11或SEQIDNo.11的第9-506位的双链DNA分子，
所述ERG1p(M4)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.10或SEQIDNo.10的第9-506位的双链DNA分子，
所述ERG1p(M1)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.7或SEQIDNo.7的第9-494位的双链DNA分子，
所述ERG1p(M6)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.12或SEQIDNo.12的第9-532位的双链DNA分子，
所述ERG1p(M3)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.9或SEQIDNo.9的第9-520位的双链DNA分子，
所述ERG1p(M2)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.8或SEQIDNo.8的第9-520位的双链DNA分子，
P3)所述DNA分子中，所述酵母内源启动子为酿酒酵母乙醇脱氢酶基因ADH1启动子ADH1p，其核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；
P4)所述DNA分子为ADH1p(M3)、ADH1p(M2)或ADH1p(M1)；
所述ADH1p(M3)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.5或SEQIDNo.5的第11-742位的双链DNA分子，
所述ADH1p(M2)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.4或SEQIDNo.4的第11-730位的双链DNA分子，
所述ADH1p(M1)是一条链的核苷酸序列是SEQIDNo.3或SEQIDNo.3的第11-730位的双链DNA分子，
P5)与以S...
【专利技术属性】
技术研发人员：何秀萍，周晨瑶，李明杰，鲁素蕊，郭雪娜，程艳飞，王肇悦，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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