一种具有热稳定性的γ-谷酰胺甲胺合成酶的突变体，其编码基因、氨基酸序列及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有热稳定性的γ‑谷酰胺甲胺合成酶的突变体、其编码基因、氨基酸及在生产茶氨酸中的应用，具体是通过基因工程方法获得了γ‑谷氨酰甲胺合成酶突变体；改突变体半衰期长，在提高了γ‑谷氨酰甲胺合成酶突变体的热稳定性同时，使酶的最适温度提高了10～15℃，并且该突变体不需要在缓冲盐溶液中就能发挥很好的催化效果，同时利用该突变体通过耦合多聚磷酸盐激酶的方法高效合成茶氨酸，该方法催化茶氨酸合成的同时可实现ATP再生，为酶法工业化生产茶氨酸提供有效途径。

【技术实现步骤摘要】
一种具有热稳定性的γ-谷酰胺甲胺合成酶的突变体，其编码基因、氨基酸序列及其应用
本专利技术涉及一种酶突变体，特别涉及一种具有热稳定性的γ-谷酰胺甲胺合成酶的突变体、其编码基因、氨基酸及在生产茶氨酸中的应用。
技术介绍
L-茶氨酸(L-theanine)属于酰胺类化合物，是茶叶中含量最丰富的游离氨基酸，占总游离氨基酸的50％以上。茶氨酸为是茶叶香味和口感的主要成分，其含量对茶叶的风味和品质起到关键性的作用。茶氨酸的性质较稳定，将茶氨酸溶液煮沸5min，或将茶氨酸溶于pH3.0的溶液中并在25℃下储放12个月，茶氨酸含量不变。因此在通常的食品加工、杀菌过程中，茶氨酸的性质不会发生变化，且毒性试验中未发现其有毒性。L-茶氨酸作为一种安全、集多种生理功能于一体的功能性活性因子，被广泛应用于食品、保健品和医药行业。日本于1964年将以茶氨酸列为食品添加剂，作为调味剂和强化剂使用，使用过程中不作限制用量的规定。美国食品和药物管理局于1985年确认茶氨酸是一般公认为安全的物质(GRAS)，在食品中使用没有特定用量限制。2014我国卫生部批准茶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有热稳定性的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体，其特征在于：编码所述突变体的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种具有热稳定性的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体，其特征在于：编码所述突变体的蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。


2.根据权利要求1所述的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体，其特征在于：编码所述突变体的基因序列如SEQIDNO.2所示，或编码所述突变体的基因序列为编码权利要求1所述的氨基酸序列的核苷酸序列。


3.如权利要求1所述的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体在生产茶氨酸中的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述应用包括将权利要求1所述的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体细胞用于茶氨酸生产的催化体系中进行反应；所述茶氨酸生产的催化体系包括300～600mM谷氨酸钠和/或谷氨酸；350～600mM乙胺和/或乙胺盐酸盐；120～180mM含镁离子的盐,1～5mMATP和/或ADP，100～200mM多聚磷酸盐。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述茶氨酸生产的催化体系温度40～55℃，反应pH6～9。


6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述茶氨酸生产的催化体系中，权利要求1所述的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体的浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐佳琨，范超，刘军，洪皓，刘明，吴文忠，
申请(专利权)人：大连医诺生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21