一株环形灵菌红素产生菌及其色素的纯化制备与应用制造技术

一株环形灵菌红素产生菌及其色素的纯化制备与应用，涉及微生物发酵技术和活性产物分离鉴定领域。所述一株环形灵菌红素产生菌为Zooshikella sp.SZ‑14，保藏中心登记入册编号：GDMCC No.61474。将菌株SZ‑14平板涂布、划线分离，挑取单菌落培养后再转接，培养48h获得菌株培养液。离心取沉淀，经乙醇、乙酸乙酯分步萃取后得到色素粗提物。粗提物经硅胶柱200～300目恒定洗脱，再经高效液相色谱制备后，即可得到较纯的环形灵菌红素。提取制备的环形灵菌红素能够高效灭杀多种有害藻类，具有开发杀藻菌剂的巨大潜能，在生物法治理藻华方面具有广阔应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一株环形灵菌红素产生菌及其色素的纯化制备与应用
本专利技术涉及微生物发酵技术和活性产物分离鉴定领域，尤其是涉及一株环形灵菌红素产生菌及其色素的纯化制备与应用。
技术介绍
灵菌红素类物质(Prodiginine)是一类含有三个吡咯环结构的天然红色色素，其结构内通常含有甲氧基吡咯环骨架，包括灵菌红素(Prodigiosin)及其同系物与类似物。灵菌红素又名灵杆菌素，学名2-methyl-3-pentyl-6-methoxyprodiginine，是Prodiginine里最为常见的一种色素。其分子式为C20H25N3O(M＝323)，较难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿等有机溶剂。酸性条件下，灵菌红素呈红色或紫红色，在530～540nm处具有特殊吸收峰；碱性或中性条件下，灵菌红素呈黄色或橙黄色，在460～480nm处具有特殊吸收峰。目前研究表明，灵菌红素具有抗菌、抗肿瘤、免疫抑制等多种生物学活性，有着极大的医药研发潜力。同时，其在印染、藻华防治等方面也受到广泛关注，是一类极具应用前景的天然化合物。根据吡咯环侧链烷基碳原子数目的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株环形灵菌红素产生菌，其特征在于该菌为Zooshikella sp.SZ-14，已于2021年02月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏中心登记入册编号：GDMCC No.61474。/n

【技术特征摘要】
1.一株环形灵菌红素产生菌，其特征在于该菌为Zooshikellasp.SZ-14，已于2021年02月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏中心登记入册编号：GDMCCNo.61474。


2.如权利要求1所述环形灵菌红素产生菌纯化制备环形灵菌红素的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将菌株Zooshikellasp.SZ-14接种于Zobell2216E液体培养基中，摇床避光培养，得种子液；
2)将种子液转接至Zobell2216E液体培养基中，摇床避光培养，得菌株培养物；
3)将菌株培养物离心取沉淀，加入无水乙醇，振荡避光萃取；将混合物离心取上清萃取液，旋转蒸干，得乙醇粗提物；
4)在乙醇粗提物中加入乙酸乙酯，振荡避光萃取；将混合物离心取上清萃取液，旋转蒸干，得色素粗提物；
5)将色素粗提物溶解于乙酸乙酯中，加入硅胶粉吸附混匀，旋转蒸干，倒出干粉备用；
6)硅胶粉用正己烷浸泡、超声除气泡后，引流倒入层析柱；
7)硅胶柱层析：采用干法上样，将步骤5)中的干粉样品加入层析柱，洗脱至红色物质全部流出，合并收集深红色及棕红色组份A，旋转蒸干；
8)将组份A溶解于甲醇中，利用制备型高效液相色谱仪分离纯化环形灵菌红素；
9)收集液相色谱保留时间为12～15min处的物质，旋转蒸干溶液中的甲醇；剩余水相中加入等体积乙酸乙酯，振荡避光萃取；将混合液离心取上层乙酸乙酯相，再旋转蒸干，用甲醇溶解即得环形灵菌红素。


3.如权利要求2所述环形灵菌红素产生菌纯化制备环形灵菌红素的方法，其特征在于在步骤1)中，所述摇床避光培养的条件为28～37℃，100～200rpm，16～24h。


4.如权利要求2所述环形灵菌红素产生菌纯化制备环形灵菌红素的方法，其特征在于在步骤2)中，所述种子液的接种量为1％～5％；摇床避光培养的条件可为28～37℃，100～200rpm，24～48h。


5.如权利要求2所述环形灵菌红素产生菌纯化制备环形灵菌红素的方法，其特征在于在步骤3)中，所述离心的条件为6000～10,000g...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐虹，张丹阳，陈莹婕，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建;35