一株高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌诱变菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌菌株及其应用，属于微生物技术领域。所述枯草芽孢杆菌，于2020年8月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCC No.20479。该菌株具有遗传稳定性好，营养条件简单，易培养等特点。用于发酵生产纳豆激酶时，其产纳豆激酶水平显著提高，所得纳豆激酶的酶活为13000IU/mL。应用到大豆和小米混合发酵豆乳中，在保留纳豆激酶的活性下同时挥发性盐基氮明显减少，气味较好。

【技术实现步骤摘要】
一株高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌诱变菌株及其应用
本专利技术涉及一株高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌菌株及其应用，属于微生物

技术介绍
在我国血栓性疾病对人们的生命健康的威胁极为严重，尤其是人们生活水平和生活方式的改变，导致了膳食中高脂肪、高蛋白的过量摄取，以及老龄化社会的到来，血栓性疾病已超过癌症和糖尿病成为第一大健康杀手，每年有多万人因此死亡。纳豆激酶(nattokinase，NK)是一种丝氨酸蛋白酶，由275个氨基酸残基组成，经大量文献证实纳豆激酶具有多种功能，其溶栓及抑制血栓形成效果较为突出。综观纳豆激酶的研究、生产现状可知，纳豆激酶的生产普遍采用的是液体发酵工艺，且发酵液酶活一般在600～900IU/mL之间，利用基因工程技术对纳豆激酶的生产菌进行改造虽然能够提高纳豆激酶的产量，但由于利用转基因技术生产蛋白质还有一些有待解决的问题，因此进一步提高NK酶活的研究依然集中在优良生产菌种的分离、筛选和发酵条件的优化这两个方面。如何通过菌株选育和发酵条件的优化最大限度地提高纳豆激酶的活力是众多科技工作者研究的焦点。为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，其特征在于，于2020年8月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCC No.20479。/n

【技术特征摘要】
1.枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，其特征在于，于2020年8月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCCNo.20479。


2.利用权利要求1所述枯草芽孢杆菌发酵生产纳豆激酶的方法，其特征在于，包括先培养得到种子液，再将种子液转接到发酵培养基中进行发酵。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基按重量百分比计，配方为：大豆蛋白胨0.8-1.5％，葡萄糖1.5-3％，CaCl20.01-0.03％，MgSO40.03-0.06％，Na2HPO40.1-0.3％，NaH2PO40.05-0.2％，以水补余，pH在6.5-7.0。


4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，发酵条件是150-250rpm、37-41℃，发酵60-72小时。


5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，培养得到种子液时，采用的种子培养基的配方按重量百分比计，为大豆蛋白胨0.5％，葡萄糖1％，NaCl0.5％，其余为水，pH在6.5-7.0。
<...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨瑞金，仝艳军，王玉雪，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32