治疗高尿酸相关性疾病的药物制造技术

本发明专利技术提出了一种药物，该药物包括尿酸氧化酶，所述尿酸氧化酶中的下列氨基酸位点的至少7个连接有PEG基团，K

【技术实现步骤摘要】
治疗高尿酸相关性疾病的药物
本专利技术涉及生物医药领域，具体地，本专利技术涉及药物、药物组合物及药物用途。
技术介绍
随着人们生活质量的提高以及饮食和生活习惯的改变，高蛋白和高嘌呤食物摄取增加，痛风患者的数量呈逐年增加的趋势。在欧洲，痛风患者的数量在过去的20年中增长了约一倍。我国目前的高尿酸血症及痛风发病率提升至约2～3％。如果高尿酸血症没有出现临床症状，控制饮食即可；当出现了由其引起的临床症状时，则需要进行药物治疗。因此，仍需要科研工作者进一步开发治疗痛风的药物。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术提出了一种具有能够治疗顽固性痛风的尿酸氧化酶药物。在本专利技术的第一方面，本专利技术提出了一种药物。根据本专利技术的实施例，所述药物包括尿酸氧化酶，所述尿酸氧化酶中的下列氨基酸位点的至少7个连接有PEG基团，K4、K17、K30、K35、K97、K112、K116、K152、K179、K190、K222、K266、K272、K285、K291、K298。根据本专利技术实施例的尿酸氧化酶相比于没有PEG修饰的尿酸氧化酶，免疫原性大幅降低，包含该尿酸氧化酶的药物可实现高尿酸相关性疾病的治疗。根据本专利技术的实施例，上述药物还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述尿酸氧化酶中的下列氨基酸位点的至少9个连接有PEG基团，K4、K17、K30、K35、K97、K112、K116、K152、K179、K190、K222、K266、K272、K285、K291、K298。根据本专利技术的实施例，所述尿酸氧化酶中的下列氨基酸位点的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个连接有PEG基团，K4、K17、K97、K179、K190、K222、K266、K272、K285。根据本专利技术的实施例，所述PEG基团的分子量为9～11KD。根据本专利技术的实施例，所述尿酸氧化酶具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。TYKKNDEVEFVRTGYGKDMIKVLHIQRDGKYHSIKEVATTVQLTLSSKKDYLHGDNSDVIPTDTIKNTVNVLAKFKGIKSIETFAVTICEHFLSSFKHVIRAQVYVEEVPWKRFEKNGVKHVHAFIYTPTGTHFCEVEQIRNGPPVIHSGIKDLKVLKTTQSGFEGFIKDQFTTLPEVKDRCFATQVYCKWRYHQGRDVDFEATWDTVRSIVLQKFAGPYDKGEYSPSVQKTLYDIQVLTLGQVPEIEDMEISLPNIHYLNIDMSKMGLINKEEVLLPLDNPYGKITGTVKRKLSSRL(SEQIDNO:1)。根据本专利技术的实施例，所述尿酸氧化酶的肽图与未连接PEG的尿酸氧化酶的肽图相比，具有至少7个预定肽段的峰面积减少的相对比例不低于75％，优选不低于80％，更优选不低于90％。根据本专利技术的实施例的尿酸氧化酶相比于未连接PEG的尿酸氧化酶，免疫原性低，可实现高尿酸相关性疾病的有效治疗。根据本专利技术的实施例，所述尿酸氧化酶的肽图与未连接PEG的尿酸氧化酶的肽图相比，具有至少9个预定肽段的峰面积减少的相对比例不低于75％，优选不低于80％，更优选不低于90％。根据本专利技术的实施例，所述尿酸氧化酶的肽图如图4所示。在本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种药物组合物。根据本专利技术的实施例，所述药物组合物包括前面所述的药物或前面所述的尿酸氧化酶。根据本专利技术实施例的药物组合物可用于高尿酸相关性疾病的治疗或预防。根据本专利技术的实施例，所述药物组合物进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述药物组合物进一步包括其它治疗或预防高尿酸相关性疾病的药物。在本专利技术的第三方面，本专利技术提出了前面所述的药物或前面所述的尿酸氧化酶或前面所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗高尿酸相关性疾病。根据本专利技术的实施例，上述用途还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述高尿酸相关性疾病包括选自慢性高尿酸血症、痛风、肾脏疾病、高尿酸性关节炎、肾结石、痛风结节、高血压、糖尿病、高甘油三酯血症、代谢综合征、冠心病、动脉粥样硬化、癌症化疗引起的高尿酸血症。附图说明图1是根据本专利技术实施例的PHCSDS-PAGE纯度检测图；图2是根据本专利技术实施例的PHCRP-HPLC纯度检测图；图3是根据本专利技术实施例的PHC的Lys-C酶切图；图4是根据本专利技术实施例的PHALys-C酶切图；图5是根据本专利技术实施例的PHC和PHA的Lys-C酶切比对图；图6是根据本专利技术实施例的大鼠单次给药后血清中尿酸(μmol/L)和尿囊素(μmol/L)水平变化水平结果图。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。本申请所述的“尿酸氧化酶”应作广义理解，它是指在实际生产实践中，在同一批次中所产出的尿酸氧化酶的混合物的总称。对尿酸氧化酶的蛋白结构序列进行部分氨基酸的取代、缺失或添加等结构改造，进而实现本实例的包括但不限于降低免疫原性等。尿酸氧化酶没有特别的限制，可以是任何来源的尿酸氧化酶及其尿酸氧化酶类似物，代表的例子包括但并不限于哺乳动物来源、微生物、植物等。本专利技术所述的不同种属来源尿酸氧化酶，可通过多种途径获得，包括但不限于天然提取、化学合成、基因工程重组表达等。在另一优选例中，尿酸氧化酶通过重组技术，将尿酸氧化酶蛋白序列(SEQIDNO:1)的编码序列在宿主细胞进行重组表达。在另一优选例中，以大肠杆菌或酵母作为宿主，构建重组表达菌株的方法制备而得，更优选大肠杆菌作为宿主菌进行重组表达。如本文所用，所述聚乙二醇(PEG)，指环氧乙烷缩聚物和水的混合物，由通式H(OCH2CH2)nOH表示，这是一种pH中性，无毒、水溶性较高的亲水聚合物，呈线性或支化状结构。PEG要和蛋白结合需要对PEG的一端或多端进行活化，可根据所修饰的目标蛋白上如氨基、巯基、羧基或羟基等选择相应的修饰基团进行活化。在另一优选例中，本专利技术用于氧化尿酸酶进行PEG修饰的位点为赖氨酸残基的ε氨基，但也有少量的N末端赖氨酸残基的α氨基的修饰。尿酸氧化酶通过氨脂键、仲氨键或酰胺键与PEG的修饰基团进行共价连接，优选聚乙二醇分子与尿酸氧化酶偶联形成为酰胺键，其聚乙二醇的修饰基团包括但不限于N羟基琥珀酰亚胺类、硝基苯类，包括但不限于N羟基琥珀酰亚胺(NHS)、N羟基琥珀酰亚胺碳酸酯(SC)、N羟基琥珀酰亚胺乙酸酯(SCM)、N羟基琥珀酰亚胺丙酸酯(SPA)、N羟基琥珀酰亚胺丁酸酯(SBA)、N羟基琥珀酰亚胺琥珀酸酯(SS)、硝基苯基碳酸酯(NP本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物，其特征在于，包括尿酸氧化酶，所述尿酸氧化酶中的下列氨基酸位点的至少7个连接有PEG基团，/nK

【技术特征摘要】
1.一种药物，其特征在于，包括尿酸氧化酶，所述尿酸氧化酶中的下列氨基酸位点的至少7个连接有PEG基团，
K4、K17、K30、K35、K97、K112、K116、K152、K179、K190、K222、K266、K272、K285、K291、K298。


2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于，所述尿酸氧化酶中的下列氨基酸位点的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个连接有PEG基团，
K4、K17、K97、K179、K190、K222、K266、K272、K285。


3.根据权利要求1所述的药物，其特征在于，所述PEG基团的分子量为9～11KD。


4.根据权利要求1所述的药物，其特征在于，所述尿酸氧化酶具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。


5.根据权利要求1所述的药物，其特征在于，所述尿酸氧化酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：路伟，
申请(专利权)人：杭州远大生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33