复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用，复方苦参注射液还能在修复肝损伤中得以应用，通过抑制肝脏内胶原蛋白的沉积，使得肝脏组织恢复正常；另外，复方苦参注射液还能抑制肝星状细胞活化，通过抑制肝星状细胞的活化来制备治疗慢性肝纤维化；通过下调肝星状细胞活化物的表达来制备治疗慢性肝纤维化；通过选择性地抑制肝星状细胞活化来制备治疗慢性肝纤维化；通过干预肝星状细胞中TGF‑β/Smad信号轴的激活来制备治疗慢性肝纤维化；相较于目前临床缺乏已获批的治疗肝纤维化的药物，本发明专利技术的应用表明复方苦参注射液在临床应用中可作为预防或治疗肝纤维化和防止肝纤维化进展的一种有前景的候选药物。

【技术实现步骤摘要】
复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用
本专利技术属于药物新功能开发
，具体涉及一种复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用。
技术介绍
复方苦参注射液(Compoundkusheninjection，CKI)作为一种经典的中草药复方制剂，由国家药品监督管理局(NationalMedicalProductsAdministration，NMPA)批准用于临床治疗癌症引起的疼痛。然而，复方苦参注射液治疗慢性肝纤维化并缓解肝纤维化向肝细胞癌进展的具体的机制尚不清楚。肝纤维化是由慢性或反复性肝脏炎症或肝脏损伤引起的肝脏病理结果，一般可定义为发生在肝脏内部的一种连续的损伤修复过程。肝纤维化最主要的特点是细胞外基质的过度沉积和降解的不平衡，从而在肝脏损伤区域产生和聚集大量的结构蛋白，尤其是I型胶原蛋白的产生。肝硬化是肝纤维化发生发展的终末期，全球每年导致约116万人死亡。肝细胞癌是最常见的原发性肝癌的类型，近80％至90％的肝细胞癌患者都有慢性肝病和肝硬化的疾病史，这使得肝硬化被认为是引发肝细胞癌的最主要风险因素之一。肝星状细胞(Hepaticstellatecells，HSCs)是促进慢性肝纤维化发生发展过程中一类重要的细胞。通常HSCs在正常肝脏组织中处于静息状态，发挥储存视黄酯的功能。但是在肝脏发生纤维化的时候，静息状态下的HSCs会被激活并分化为肌成纤维细胞。而发生纤维化的肝脏中由活化的HSCs形成的肌成纤维细胞被认为是分泌细胞外基质的主要来源，细胞外基质主要包括胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin，α-SMA)、纤维连接蛋白和组织型基质金属蛋白酶抑制因子1(tissueinhibitorofmetalloproteinase1，TIMP1)。转化生长因子β(Transforminggrowthfactorbeta，TGF-β)在刺激肝星状细胞活化及其向肌成纤维细胞转化过程中发挥重要的作用，进而促进肝纤维化的发生发展。目前，最有效的治疗肝纤维化的方法是清除导致慢性纤维化的外源或者内源性刺激以及肝脏移植手术。虽然现有较多的化合物或者中草药复方在动物体内及体外细胞实验中呈现出较好的抗肝纤维化的治疗效果，但是并没有一个化合物或中草药复方被完全商业化和被批准用于临床肝纤维化病人的一线治疗方式。同时，在临床前和临床研究中，通过中和体内TGF-β或阻断TGF-β受体来直接靶向TGF-β信号，可能会由于TGF-β具有多种生物环境依赖的功能，导致生物体内发生严重的不良反应。
技术实现思路
针对现有技术中的不足，本专利技术的目的之一是提供一种复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用。同时进一步了解TGF-β在肝纤维化中的作用，并有效地干预TGF-β信号轴的可替代性。本专利技术的目的之二是提供复方苦参注射液在修复肝损伤中的应用。本专利技术的目的之三是提供复方苦参注射液在抑制肝星状细胞活化中的应用。为达到目的之一，本专利技术的解决方案是：复方苦参注射液(CKI)在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用。为达到目的之二，本专利技术的解决方案是：复方苦参注射液在修复肝损伤中的应用。进一步地，通过抑制肝脏内胶原蛋白的沉积，使得肝脏组织恢复正常。为达到目的之三，本专利技术的解决方案是：复方苦参注射液在抑制肝星状细胞活化中的应用。进一步地，通过抑制肝星状细胞的活化来制备治疗慢性肝纤维化。进一步地，通过下调肝星状细胞活化物的表达来制备治疗慢性肝纤维化。进一步地，通过选择性地抑制肝星状细胞活化来制备治疗慢性肝纤维化。进一步地，通过干预肝星状细胞中TGF-β/Smad信号轴的激活来制备治疗慢性肝纤维化。由于采用上述方案，本专利技术的有益效果是：相较于目前临床缺乏已获批的治疗肝纤维化的药物，本专利技术表明CKI在临床应用中可作为预防或治疗肝纤维化和防止肝纤维化进展的一种有前景的候选药物。附图说明图1为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在CCl4诱导的的肝功能示意图。图2为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在MCD诱导的肝功能示意图。图3为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在CCl4诱导的肝脏组织形态的变化示意图。图4为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在MCD诱导的肝脏组织形态的变化示意图。图5为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在CCl4诱导的肝脏中相关纤维化标志物的变化示意图。图6为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在MCD诱导的肝脏中相关纤维化标志物的变化示意图。图7为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在CCl4诱导的肝脏中肝星状细胞活化的情况示意图。图8为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在MCD诱导的肝脏中肝星状细胞活化的情况示意图。图9为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在CCl4诱导的肝脏中TGF-β/Smad信号轴激活的情况示意图。图10为本专利技术的复方苦参注射液治疗后纤维化小鼠在MCD诱导的肝脏中TGF-β/Smad信号轴激活的情况示意图。图11为本专利技术的复方苦参注射液对人肝星状细胞系LX-2纤维化发生的影响示意图。图12为本专利技术的复方苦参注射液对人肝星状细胞系LX-2活化的影响示意图。图13为本专利技术的复方苦参注射液对人肝星状细胞系TGF-β/Smad信号轴激活的情况示意图。具体实施方式本专利技术提供了一种复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用。以下通过实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例：慢性肝纤维化动物模型(1)、为了构建由四氯化碳(CCl4)诱发的慢性肝纤维化模型，C57BL/6小鼠通过腹腔注射生理盐水或5wt％的CCl4溶液(4mL/kg，由橄榄油稀释)，每周注射3次，造模3周或6周。小鼠在5wt％的CCl4造模3周后被随机分为3组，包括对照组、CCl4组和CCl4+CKI组。CKI按照7.5mL/kg剂量通过每天以腹腔注射方式对纤维化小鼠进行治疗，治疗周期为3周或6周。(2)、为了构建由MCD膳食诱导的非酒精性脂肪肝炎模型，C57BL/6小鼠通过喂养正常膳食或MCD膳食，为期4周。小鼠在MCD膳食造模2周后被随机分为3组，包括对照组、MCD组和MCD+CKI组。CKI按照7.5mL/kg剂量通过每天以腹腔注射方式对纤维化小鼠进行治疗，治疗周期为2周。细胞模型首先利用含有10％胎牛血清的DMEM高糖培养基将人肝星状细胞系LX-2细胞复苏，培养温度为37℃，培养气体为含有体积分数5％的CO2。当LX-2细胞生长密度达到80％左右时(大约在复苏后的3-4天)，利用0.25％胰酶消化，按照1：3比例传代至含有2％胎牛血清的DMEM高糖培养基中进行培养。为了进行体外LX-2细胞活化实验，利用含有5ng/mL的TGF-β1的培养基处理LX-2细胞，为期12h。与此本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.复方苦参注射液在制备治疗慢性肝纤维化药物中的应用。


2.复方苦参注射液在修复肝损伤中的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：通过抑制肝脏内胶原蛋白的沉积，使得肝脏组织恢复正常。


4.复方苦参注射液在抑制肝星状细胞活化中的应用。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：通过抑制肝星状细胞的活化来制...

【专利技术属性】
技术研发人员：王慧，巴乾，李晓光，杨阳，游蓉丽，王伟，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院，山西振东制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31