一种用于预防和治疗乙型肝炎的药物组合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种用于预防和治疗乙型肝炎的药物组合物及其用途，其包含：i)HBsAg、该抗原的片段、该抗原的变体，或者其至少两种的混合物，ii)HBcAg、该抗原的片段、该抗原或者该抗原的片段的变体，或者其至少两种的混合物，iii)CpG‑ODN，该寡聚核苷酸为全硫代修饰，其序列中具有一个或多个拷贝的5’‑AACGTT‑3’基序或5’‑GTCGTT‑3’基序。本发明专利技术还涉及所述药物组合物在制备用于治疗乙型肝炎病毒感染和/或乙型肝炎病毒介导的疾病的药物中的用途。

A pharmaceutical composition for preventing and treating hepatitis B and its application

【技术实现步骤摘要】
一种用于预防和治疗乙型肝炎的药物组合物及其用途
本专利技术涉及生物制药领域，具体地涉及一种用于预防和治疗乙型肝炎的药物组合物，其包含乙肝表面抗原、乙肝核心抗原和具有免疫刺激活性的硫代寡聚脱氧核苷酸。
技术介绍
乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界范围的严重公共卫生问题之一。HBV感染是导致慢性乙型肝炎、肝硬化和肝细胞癌的重要原因(FattovichG.J.Hepatol.2008；48：335-352)。临床治疗慢性HBV感染的常用药物主要有核苷类似物和干扰素。核苷类似物无法完全清除肝细胞内的cccDNA，且长期使用易导致耐药突变株的出现以及停药后反弹(KwonH，LokAS.NatRevGastroenterolHepatol.2011；8：275-284)。干扰素不适合用于无症状的HBV携带者，在慢性HBV患者中，使用半年后HBeAg血清学转换发生率仅为33％，而且干扰素副作用较大也限制其应用(TangSX，YuGL.Lancet1990；335(8684)：302)。目前广泛应用的乙肝蛋白疫苗通过诱导体液免疫，产生保护性中和抗体，达到预防的目的。大量的研究发现中和抗体仅能够消除胞外病毒颗粒，而胞内感染的病毒则主要依赖特异性的细胞免疫反应，辅助性T细胞、CD4+T细胞产生的IFN-γ等Th1型细胞因子，尤其是病毒特异性的杀伤性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte，CTL)来清除(ChinR，LacaminiS.RevMedViorl.2003：13(4)：255-72)。细胞免疫反应的强弱直接决定着乙肝的预后。因此，理想的治疗性乙肝疫苗需要同时诱导特异性的体液免疫和细胞免疫，突破乙肝的免疫耐受。例如中国专利CN104043120B提供了一种治疗性乙肝疫苗，其包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝核心抗原(HBcAg)、寡聚脱氧核苷酸(CpG)，可以突破乙肝的免疫耐受，用于病毒性乙型肝炎，尤其是慢性乙型肝炎的治疗。CPG寡聚脱氧核苷酸(CPG-ODN)佐剂具有免疫增强作用，可与细胞中的TLR9(Toll-likereceptor9)结合发挥作用，诱生依赖Thl途径的免疫应答，活化B细胞分化为分泌抗原特异性抗体的浆细胞，并刺激IFN-γ表达，从而促进细胞免疫应答，增加无免疫、低免疫应答及免疫抑制人群的免疫效应。但是，CPG佐剂具有结构多样性，主要分为A型，B型和C型，不同类型的CPG佐剂在实际应用中效果差异大，成药效果不确定性高。CPG1018是由Dynavax公司研发的一种B型CPG佐剂，现已应用于该公司的乙肝预防性疫苗产品HEPLISAVTM(BarryM,CooperC.ExpertOpinBiolTher,2007,7(11):1731-1737)。临床研究显示，该佐剂安全性高，但免疫增强作用尚不能满足乙肝治疗性疫苗的需求。云南沃森的一项研究结果(钱雯、王丽丽、马波,免疫学杂志，2014(10))也显示，将CPG1018佐剂配合HBsAg抗原使用，效果仅略高于铝佐剂+HBsAg抗原，但低于CpG1018佐剂+铝佐剂+HBsAg抗原的双佐剂系统。CPG7909是由Coley公司研发的一种B型CPG佐剂，葛兰素史克的乙肝预防性疫苗Engerix-B即应用该佐剂(CooperCL,DavisHL.JournalofClinicalImmunology,2004,24(6):693-701)。临床研究显示，该佐剂安全性高，但免疫增强作用尚不能满足乙肝治疗性疫苗的需求。云南沃森的一项研究(钱雯、王丽丽、马波，免疫学杂志，2014(10))显示，将CPG7909佐剂与铝佐剂进行联合之后，方可取得较好的治疗效果。但是，接种含铝佐剂的疫苗会导致人体产生一些不良反应，如红斑、皮下结节、接触性超敏、肉芽肿、肌筋膜炎等。
技术实现思路
针对现有技术中存在的上述问题，本专利技术人进行了大量试验和研究，并出乎意料地发现，将上述两种佐剂分别应用于双抗原疫苗组合物，即使不使用铝佐剂，也能够取得显著性治疗和/或预防效果。因此，本专利技术的一个目的是提供一种用于预防和/或治疗乙型肝炎的药物组合物，所述药物组合物仅使用CPG1018佐剂或CPG7909佐剂，不含铝佐剂，可在慢性HBV感染患者中产生强烈的免疫应答，诱导乙肝核心抗体发生亚型转变和/或突破乙型肝炎病毒患者的免疫耐受，其既可以用于制备乙肝预防性疫苗，又可以用于制备乙肝治疗性疫苗。本专利技术的另一目的是提供该药物组合物在制备用于预防和/或治疗乙型肝炎病毒感染和/或乙型肝炎病毒介导的疾病的药物中的用途。为实现上述目的，本专利技术提供了一种药物组合物，其包含：i)乙肝表面抗原(HBsAg)、该抗原的片段、该抗原的变体，或者其中至少两种的混合物；ii)乙肝核心抗原(HBcAg)、该抗原的片段、该抗原的变体，或者其中至少两种的混合物；iii)佐剂，其中所述佐剂包含序列中具有一个或多个拷贝的5’-AACGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)，且不包含皂苷佐剂和/或铝佐剂；或所述佐剂包含序列中具有一个或多个拷贝的5’-GTCGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸，且不包含皂苷佐剂和/或铝佐剂。在本专利技术的一些实施方案中，所述佐剂仅为序列中具有一个或多个拷贝的5’-AACGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸；优选地，所述CpG寡聚脱氧核苷酸的序列为：5’-TGACTGTGAACGTTCGAGATGA-3’(SEQIDNO：3)。在本专利技术的一些实施方案中，所述佐剂仅为序列中具有一个或多个拷贝的5’-GTCGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸；优选地，所述CpG寡聚脱氧核苷酸的序列为：5’-TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3’(SEQIDNO：4)。在本专利技术的又一些实施方案中，所述CpG-ODN包含硫代磷酸酯连接。特别地，所述CpG-ODN为硫代CpG寡聚脱氧核苷酸，优选地为全硫代CpG寡聚脱氧核苷酸。在本专利技术的再一些实施方案中，所述HBsAg具有SEQIDNO：1所示序列。在本专利技术的另一些实施方案中，所述HBcAg具有SEQIDNO：2所示序列。优选地，所述乙肝核心抗原片段由SEQIDNO：2中的第149～183个连续氨基酸组成，进一步优选由第152～183个连续氨基酸组成。在本专利技术的又一些实施方案中，所述药物组合物中的组分i)，ii)和iii)之间的相对重量比范围是2：1：1～40；优选地，组分i)，ii)和iii)之间的相对重量比为2：1：1，2：1：8，2：1：20，2：1：30或2：1：40，进一步优选为2：1：1，2：1：8，2：1：20。在本专利技术的又一些实施方案中，所述药物组合物还含有：iv)可药用载体。在一个方面，本专利技术涉及所述药物组合物在制备用于预防和/或治疗乙型肝炎病毒感染和/或乙型肝炎病毒介导的疾病的药物中的用途；优选地，所述乙型肝炎病毒感染和/或乙型肝炎病毒介导的疾病选自乙型肝炎、肝硬化和肝癌。在又一个方面，本专利技术涉及所述药本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物组合物，其包含：/ni)乙肝表面抗原、该抗原的片段、该抗原的变体，或者其中至少两种的混合物，/nii)乙肝核心抗原、该抗原的片段、该抗原的变体，或者其中至少两种的混合物，/niii)佐剂，所述佐剂包含序列中具有一个或多个拷贝的5’-AACGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸，且不包含皂苷佐剂和/或铝佐剂；或所述佐剂包含序列中具有一个或多个拷贝的5’-GTCGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸，且不包含皂苷佐剂和/或铝佐剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种药物组合物，其包含：
i)乙肝表面抗原、该抗原的片段、该抗原的变体，或者其中至少两种的混合物，
ii)乙肝核心抗原、该抗原的片段、该抗原的变体，或者其中至少两种的混合物，
iii)佐剂，所述佐剂包含序列中具有一个或多个拷贝的5’-AACGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸，且不包含皂苷佐剂和/或铝佐剂；或所述佐剂包含序列中具有一个或多个拷贝的5’-GTCGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸，且不包含皂苷佐剂和/或铝佐剂。


2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述佐剂仅为序列中具有一个或多个拷贝的5’-AACGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸；优选地，所述CpG寡聚脱氧核苷酸的序列为：5’-TGACTGTGAACGTTCGAGATGA-3’。


3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述佐剂仅为序列中具有一个或多个拷贝的5’-GTCGTT-3’基序的CpG寡聚脱氧核苷酸；优选地，所述CpG寡聚脱氧核苷酸的序列为：5’-TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3’。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中，所述CpG寡聚脱氧核苷酸包含硫代磷酸酯连接。


5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中，所述CpG寡聚脱氧核苷酸为硫代CpG寡聚脱氧核苷酸；优选地，所述CpG寡聚脱氧核苷酸是全硫代CpG寡聚脱氧核苷酸。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合物，其中，所述乙肝表面抗原为SEQIDNO：1所示序列。


7.根据权利要求1至5...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛君，李建强，孙娇娇，陈晓雨，
申请(专利权)人：远大赛威信生命科学南京有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32