PLK1靶磷酸化状态以及用PLK1抑制剂治疗癌症制造技术

提供了一种方法，所述方法包括通过在以下时间测量PLK1靶的磷酸化来确定患者癌症中的PLK1活性：(a)在用polo样激酶1(PLK1)抑制剂处理(i)患者或(ii)来自该患者的癌症样品之前，以及(b)处理之后。还提供了一种方法，所述方法包括通过测量没有用polo样激酶1(PLK1)抑制剂处理的情况下PLK1靶的磷酸化来确定患者癌症中的PLK1活性。中的PLK1活性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PLK1靶磷酸化状态以及用PLK1抑制剂治疗癌症
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2018年8月26日提交并且通过引用整体并入本文的美国临时申请第62/722,934号的权益。
[0003]专利技术背景
(1)专利

[0004]本申请总体上涉及癌症治疗。更具体地，本申请提供了用于通过确定polo样激酶1(PLK1)抑制剂抑制患有癌症的患者中PLK1靶磷酸化的能力来评估癌症对PLK1抑制剂的响应性的方法。
[0005](2)相关领域的描述
[0006]Polo样激酶1
[0007]Polo样激酶1(PLK1)是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族5个成员中被最充分表征的成员，并且强烈促进通过有丝分裂的细胞进程。PLK1在细胞周期的有丝分裂(M)期发挥若干重要功能，包括调节中心体成熟和纺锤体组装，从染色体臂上去除黏连蛋白，灭活后期促进复合物/细胞周期体(APC/C)抑制剂，以及调节有丝分裂退出和胞质分裂(Stebhardt,2010)。PLK1在中心体功能和双极纺锤体的组装中起着关键作用。PLK1还充当p53家族成员的负调节物，导致p53/TP53的泛素化和随后的降解，抑制p73/TP73介导的促凋亡功能和极光激酶A的辅因子bora的磷酸化/降解。在有丝分裂的不同时期期间，PLK1定位于中心体、动粒(kinetochores)和中央纺锤体。PLK1在各种人类癌症中异常过表达，所述人类癌症包括急性髓系白血病(AML)、乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、结肠癌、头颈癌、子宫内膜癌和食管癌，并且PLK1与细胞增殖和不良预后相关(Degenhardt,2010；Liu等人,2017；Cancer Genome Atlas)。
[0008]Onvansertib
[0009][0010]ONVANSERTIB
[0011]Onvansertib(在美国专利8,927,530中还被称为PCM
‑
075,NMS
‑
1286937,NMS
‑
937,“式(I)的化合物”；IUPAC名称1
‑
(2
‑
羟乙基)
‑8‑
{[5
‑
(4
‑
甲基哌嗪
‑1‑
基)
‑2‑
(三氟甲氧基)苯基]氨基}
‑
4,5
‑
二氢
‑
1H
‑
吡唑[4,3
‑
h]喹唑啉
‑3‑
甲酰胺)是第一种通过口服途径施用进入临床试验的PLK1特异性ATP竞争性抑制剂，在不同的临床前模型中被证明具有抗肿瘤活性(Beria等人，2011；Hartsink
‑
Segers等人，2013；Sero等人，2014；Valsasina等人，2012；
Casolaro等人，2013)。该化合物在增殖测定中显示出高效力，对大量细胞系(包括实体瘤以及血液肿瘤二者)具有低纳摩尔活性。在小鼠中，Onvansertib在口服施用之后以良好耐受剂量有效引起癌细胞系中有丝分裂细胞周期停滞，随后凋亡，并且抑制异种移植肿瘤的生长，具有明确的PLK1相关作用机制。此外，onvansertib显示出在与批准的细胞毒性药物(诸如伊立替康)的组合疗法中的活性，其中在HT29人类结肠腺癌异种移植物中,与单独的每种剂相比肿瘤消退增强(Valsasina等人，2012；还参见美国专利8,927,530)，并且显示了在与阿糖胞苷的组合疗法中在播散性AML模型中动物的延长存活期(Valsasina等人，2012；Casolaro等人，2013)。Onvansertib在啮齿动物和非啮齿动物物种中具有有利的药理学参数和良好的口服生物可利用度，以及在使用各种给药方案的不同非临床模型中证明的抗肿瘤活性，这可能在给药方案中潜在提供高度的灵活性，值得在临床环境中进行研究。Onvansertib与先前的PLK抑制剂相比有若干优点，包括仅对PLK1的高选择性、口服可用性和～24小时的半衰期。
[0012]在美国的一个单独研究中心，已经在患有晚期/转移性实体瘤的成年受试者中进行了onvansertib的1期剂量递增研究。该研究的主要目的是确定患有晚期/转移性实体瘤的成人受试者中onvansertib的最大耐受剂量(MTD)。该研究的次要目的是定义抗肿瘤活性。在该研究中，确定了推荐的2期24mg/m2剂量，并且16名可评估患者中的5名具有稳定的病情。
[0013]基于以上所述，对于富集对onvansertib或其他PLK1抑制剂具有更大响应可能性的受试者子集的方法存在需求。本专利技术通过提供通过确定PLK1抑制剂对PLK1靶磷酸化的抑制程度来预测PLK1抑制剂对癌症的功效的方法满足了该需求。
[0014]专利技术概述
[0015]提供了一种方法，所述方法包括通过在以下时间测量PLK1靶的磷酸化来确定患者癌症中的PLK1活性：(a)在用polo样激酶1(PLK1)抑制剂处理(i)患者或(ii)来自该患者的癌症样品之前，以及(b)处理之后。
[0016]附图的几个视图的简要描述
[0017]图1A是显示用onvansertib(PCM
‑
075)和阿糖胞苷或地西他滨处理的三名患者的血液中的白血病细胞的图。
[0018]图1B是显示用onvansertib处理的三名患者的骨髓中的白血病细胞的图。
[0019]图2A是TCTP的PLK1磷酸化被onvansertib(PCM
‑
075)抑制的图示。
[0020]图2B示出了TCTP的PLK1磷酸化被onvansertib(PCM
‑
075)抑制的蛋白印迹。
[0021]图2C示出了onvansertib(PCM
‑
075)抑制AML细胞系中TCTP的PLK1磷酸化的蛋白印迹试验。
[0022]图3A是显示用onvansertib(PCM
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075)和LDAC(阿糖胞苷)处理的三名患者的血液中的白血病细胞的图。
[0023]图3B示出了图3A中鉴定的患者onvansertib(PCM
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075)在处理之前以及之后的TCTP的PLK1磷酸化的蛋白印迹。
[0024]图4A是显示用onvansertib(PCM
‑
075)和地西他滨处理的三名患者的血液中的白血病细胞的图。
[0025]图4B示出了图4A中鉴定的患者在onvansertib(PCM
‑
075)处理之前以及之后的
TCTP的PLK1磷酸化的蛋白印迹。
[0026]图5示出了对图3和图4中鉴定的患者在onvansertib(PCM
‑
075)处理之前以及之后的TCTP的PLK1磷酸化进行定量的蛋白印迹和图。
[0027]图6示出本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种方法，所述方法包括：通过在以下时间测量PLK1靶的磷酸化来确定患者癌症中的PLK1活性：(a)在用polo样激酶1(PLK1)抑制剂处理(i)患者或(ii)来自所述患者的癌症样品之前，以及(b)处理之后。2.根据权利要求1所述的方法，其中PLK1活性通过翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)的磷酸化来测量。3.根据权利要求1所述的方法，其中用所述PLK1抑制剂处理患者。4.根据权利要求1所述的方法，其中用所述PLK1抑制剂处理从患者中取出的癌症样品。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述癌症样品是血液样品。6.根据权利要求4所述的方法，其中所述癌症样品是组织样品。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述PLK1靶在患者的淋巴、骨髓或血液样品中。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述PLK1靶在所述癌症的细胞中。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述PLK1靶在所述患者的血液中是无细胞的。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、皮肤癌、鳞状细胞癌、淋巴谱系造血肿瘤、髓系造血肿瘤、中枢或外周神经系统肿瘤、急性髓系白血病、B细胞淋巴瘤、肾上腺皮质癌、食管癌、胃癌或头颈癌。11.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症是急性髓系白血病(AML)、B细胞淋巴瘤或来自转移性肿瘤。12.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症是AML。13.根据权利要求1所述的方法，其中所述患者具有骨髓增生异常综合征。14.根据权利要求1所述的方法，其中除非所述癌症中的PLK1活性升高，否则所述患者或癌症样品不用所述PLK1抑制剂处理。15.根据权利要求1所述的方法，其中如果PLK1活性低于正常，则所述患者或癌症样品不用所述PLK1抑制剂处理。16.根据权利要求1所述的方法，其中所述PLK1抑制剂是onvansertib、BI2536、volasertib(BI 6727)、GSK461364、HMN
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176、HMN
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214、AZD1775、CYC140、rigosertib(ON
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01910)、MLN0905、TKM
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080301、TAK
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960或Ro3280。17.根据任何权利要求1所述的方法，其中所述PLK1抑制剂是onvansertib。18.根据权利要求1所述的方法，其中所述PLK1靶的磷酸化通过免疫化学测量。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述免疫化学测量是通过蛋白印迹。20.根据权利要求18所述的方法，其中所述免疫化学测量是通过固相免疫测定。21.根据权利要求2所述的方法，其中TCTP的磷酸化通过免疫PCR测量。22.根据权利要求2所述的方法，其中测量TCTP丝氨酸46的磷酸化。23.根据权利要求2所述的方法，其中测量TCTP苏氨酸65的磷酸化。24.根据权利要求1所述的方法，其中处理之后所述PLK1靶的磷酸化降低至少35％表明所述处理是有效的。25.根据权利要求24所述的方法，其中处理之后所述PLK1靶的磷酸化降低至少50％表明所述处理是有效的。
26.根据权利要求1所述的方法，其中所述PLK1靶的磷酸化在处理之后至少两小时确定。27.根据权利要求1所述的方法，其中所述PLK1靶的磷酸化在处理之后至少约三小时确定。28.根据权利要求1
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27中任一项所述的方法，其中所述患者是参与所述PLK1抑制剂针对所述癌症的功效试验的候选人，其中如果处理之后所述PLK1靶的磷酸化相对于处理之前TCTP的磷酸化没有被降低至少35％，则所述患者没有资格参与所述试验。29.根据权利要求1
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27中任一项所述的方法，其中所述患者是参与所述PLK1抑制剂针对所述癌症的功效的试验的候选人，其中如果处理之后TCTP的磷酸化相对于处理之前TCTP的磷酸化没有被降低至少50％，则所述患者没有资格参与所述试验。30.根据权利要求1
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27中任一项所述的方法，其中仅在处理之后TCTP的磷酸化相对于处理之前TCTP的磷酸化被降低至少35％时，所述患者才用所述PLK1抑制剂进行治疗性处理。31.根据权利要求1
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27中任一项所述的方法，其中仅在处理之后TCTP的磷酸化相对于处理之前TCTP的磷酸化被降低至少50％时，所述患者才用所述PLK1抑制剂进行治疗性处理。32.根据权利要求30所述的方法，其中用所述P...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛雅，
申请(专利权)人：凯帝夫肿瘤科技有限公司，
类型：发明
国别省市：