【技术实现步骤摘要】
一种氨基酸高通量靶标检测方法及其应用
本专利技术涉及氨基酸检测
,具体涉及一种氨基酸高通量靶标检测方法及其应用。
技术介绍
人类为了生存必须摄取食物,维持机体的正常代谢活动。蛋白质是生物功能的主要载体,也是人体所需要的营养物质。氨基酸是蛋白的构件分子,因此氨基酸参与生物多条代谢途径并起着关键作用。通过分析氨基酸的含量来判断氨基酸的代谢情况,可以帮助预防和确诊众多病症,不仅能保护人体健康,还对调节各种生物生产代谢有序进行有着重要意义。但由于氨基酸的种类众多,含量也各有不同,因此氨基酸的代谢产物分析存在众多难点,其中如何在增加通量的同时高效准确的测定氨基酸的代谢产物是目前需要解决的问题之一,本专利技术提供一种氨基酸高通量靶标检测方法在保证覆盖多种氨基酸的情况下准确的高效灵敏的检测氨基酸代谢产物。
技术实现思路
为了解决上述技术问题,本专利技术的第一个方面提供了一种氨基酸高通量靶标检测方法,包括以下步骤:S1:代谢物的提取;S2:标准溶液的配置;S3:上机检测及分析。作为一种优选的技术方案
【技术保护点】
1.一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:代谢物的提取;S2:标准溶液的配置;S3:上机检测及分析。/n
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:代谢物的提取;S2:标准溶液的配置;S3:上机检测及分析。
2.根据权利要求1所述的一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,所述步骤S1:
1)将待测样置于EP管中,加入提取液,涡旋混合均匀;
2)进行匀浆和冰水浴超声,重复匀浆超声步骤得到样本液;
3)将样本液静置;
4)将静置后的样本液进行离心;
5)取上清液至LC进样瓶中,用于UHPLC-MS/MS分析。
3.根据权利要求2所述的一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,所述提取液按体积比为乙腈:甲醇:水=(1-3):(1-3):1配置。
4.根据权利要求2所述的一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,所述匀浆频率为30-50Hz,所述匀浆时间为200-280s;冰水浴超声时间为3-8min。
5.根据权利要求2所述的一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,所述静置温度为-50--30℃,所述静置时间为0.5-1.5h。
6.根据权利要求1所述的一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,所述步骤S2:将标准品于容量瓶中,分别配制成的标准品储备液;取标准品储备液于容量瓶中,配制成混合标准溶液;依次稀释该标准溶液得一系列校准溶液。
7.根据权利要求1所述的一种氨基酸高通量靶标检测方法,其特征在于,,所述步骤S3中流动相条件:
液相色谱柱:ACQUITYUPLCBEHAmide,规格:100×2.1mm,粒径:1.7μm;
技术研发人员:楼格尔,周敏,张昆,黄明旺,王雪,凌加焱,周晓青,王洪光,
申请(专利权)人:上海阿趣生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:上海;31
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