融合剂脂质体组合物和其用途制造技术

本公开至少部分地提供了用于体内递送融合剂脂质体的方法和组合物。在一些实施例中，所述融合剂脂质体包含促进对靶细胞具有特异性的元件组合，例如融合剂、正向靶细胞特异性调节元件以及非靶细胞特异性调节元件中的一种或多种。在一些实施例中，所述融合剂脂质体包含减少针对所述融合剂脂质体的免疫应答的一种或多种修饰。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】融合剂脂质体组合物和其用途相关申请的交叉引用本申请要求2018年7月9日提交的标题为“融合剂脂质体组合物和其用途(FUSOSOMECOMPOSITIONSANDUSESTHEREOF)”的美国临时申请第62/695,537号、2018年11月14日提交的标题为“融合剂脂质体组合物和其用途”的第62/767,241号、2019年5月15日提交的标题为“融合剂脂质体组合物和其用途”的第62/848,284号、2018年7月9日提交的标题为“融合剂脂质体组合物和其用途”的第62/695,650号、2018年11月14日提交的标题为“融合剂脂质体组合物和其用途”的第62/767,261号和2019年5月15日提交的标题为“融合剂脂质体组合物和其用途”的第62/848,305号，所述申请的内容以全文引用的方式并入。通过引用合并序列表本申请正与电子格式的序列表一起提交。序列表以文件标题V2050-7024WO_SeqList.TXT提供，所述文件在2019年7月9日创建，大小为2,549,164字节。电子格式的序列表的信息以全文引用的方式并入。<br>
技术介绍
...

【技术保护点】
1.一种融合剂脂质体，其包含：/na)包含融合剂的脂质双层；以及/nb)核酸，其包含：/n(i)编码外源药剂的有效负载基因；以及/n(ii)可操作地连接到所述有效负载基因的正向肝细胞特异性调节元件，其中相对于缺乏所述正向肝细胞特异性调节元件的其它方面类似的融合剂脂质体，所述正向肝细胞特异性调节元件增加所述有效负载基因在肝细胞中的表达。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180709 US 62/695,537;20180709 US 62/695,650;20181.一种融合剂脂质体，其包含：
a)包含融合剂的脂质双层；以及
b)核酸，其包含：
(i)编码外源药剂的有效负载基因；以及
(ii)可操作地连接到所述有效负载基因的正向肝细胞特异性调节元件，其中相对于缺乏所述正向肝细胞特异性调节元件的其它方面类似的融合剂脂质体，所述正向肝细胞特异性调节元件增加所述有效负载基因在肝细胞中的表达。


2.根据权利要求1所述的融合剂脂质体，其中所述核酸还包含可操作地连接到所述有效负载基因的非靶细胞特异性调节元件(NTCSRE)，其中相对于缺乏所述NTCSRE的其它方面类似的融合剂脂质体，所述NTCSRE减小所述有效负载基因在非肝细胞中的表达。


3.一种融合剂脂质体，其包含：
a)包含融合剂的脂质双层；以及
b)核酸，其包含：
(i)编码外源药剂的有效负载基因；以及
(ii)可操作地连接到所述有效负载基因的启动子，其中所述启动子是选自Apoa2、Cyp3a4、LP1B、MIR122、血红素结合蛋白、SERPINA1或HLP启动子。


4.一种融合剂脂质体，其包含：
a)包含融合剂的脂质双层；以及
b)核酸，其包含：
(i)编码外源药剂的有效负载基因；以及
(ii)可操作地连接到所述有效负载基因的非靶细胞特异性调节元件(NTCSRE)，其中：
所述NTCSRE是非肝细胞特异性miRNA识别序列、非肝细胞特异性蛋白酶识别位点、非肝细胞特异性泛素连接酶位点、非肝细胞特异性转录抑制位点或非肝细胞特异性表观遗传抑制位点，并且相对于缺乏所述NTCSRE的其它方面类似的融合剂脂质体，所述NTCSRE减小所述有效负载基因在非肝细胞或组织中的表达。


5.根据权利要求4所述的融合剂脂质体，其中所述核酸还包含可操作地连接到所述有效负载基因的正向肝细胞特异性调节元件，其中相对于缺乏所述正向肝细胞特异性调节元件的其它方面类似的融合剂脂质体，所述正向肝细胞特异性调节元件增加所述有效负载基因在肝细胞中的表达。


6.根据权利要求1到5中任一项所述的融合剂脂质体，其中所述融合剂脂质体还包含以下中的一种或两种：
(i)所述脂质双层上的第一外源性或过度表达的免疫抑制蛋白；或
(ii)第一免疫刺激性蛋白质，其不存在或与由其它方面类似的未经修饰的源细胞产生的融合剂脂质体相比，以降低的水平存在，任选地其中所述降低的水平为降低至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。


7.根据权利要求1到6中任一项所述的融合剂脂质体，其中所述有效负载基因为治疗基因缺陷的基因。


8.一种融合剂脂质体，其包含：
a)包含融合剂的脂质双层；
b)核酸，其包含编码外源药剂的有效负载基因，所述有效负载基因用于治疗基因缺陷；以及
c)以下中的一种或两种：
(i)所述脂质双层上的第一外源性或过度表达的免疫抑制蛋白；或
(ii)第一免疫刺激性蛋白质，其不存在或与由其它方面类似的未经修饰的源细胞产生的融合剂脂质体相比，以降低的水平(例如，降低至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％)存在。


9.根据权利要求6到8中任一项所述的融合剂脂质体，其包含(i)和(ii)。


10.根据权利要求6到9中任一项所述的融合剂脂质体，其包含(i)并且还包含所述脂质双层上的第二外源性或过度表达的免疫抑制蛋白。


11.根据权利要求6到10中任一项所述的融合剂脂质体，其包含(ii)并且还包含第二免疫刺激性蛋白质，所述第二免疫刺激性蛋白质不存在或与由其它方面类似的未经修饰的源细胞产生的融合剂脂质体相比，以降低的水平存在，任选地其中所述降低的水平为降低至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。


12.根据权利要求8到11中任一项所述的融合剂脂质体，其中所述核酸还包含可操作地连接到所述有效负载基因的正向肝细胞特异性调节元件，其中相对于缺乏所述正向肝细胞特异性调节元件的其它方面类似的融合剂脂质体，所述正向肝细胞特异性调节元件增加所述有效负载基因在肝细胞中的表达。


13.根据权利要求8到12中任一项所述的融合剂脂质体，其中所述核酸还包含可操作地连接到所述有效负载基因的非靶细胞特异性调节元件(NTCSRE)，其中相对于缺乏所述NTCSRE的其它方面类似的融合剂脂质体，所述NTCSRE减小所述有效负载基因在非肝细胞或组织中的表达。


14.根据权利要求6到13中任一项所述的融合剂脂质体，其中当向个体施用时，以下中的一个或多个：
i)所述融合剂脂质体不产生可检测到的抗体应答，或针对所述融合剂脂质体的抗体以高于背景水平不到10％、5％、4％、3％、2％或1％的水平存在；
ii)所述融合剂脂质体不产生可检测到的细胞免疫应答，或针对所述融合剂脂质体的细胞免疫应答以高于背景水平不到10％、5％、4％、3％、2％或1％的水平存在；
iii)所述融合剂脂质体不产生可检测到的先天性免疫应答，或针对所述融合剂脂质体的先天性免疫应答以高于背景水平不到10％、5％、4％、3％、2％或1％的水平存在；
iv)被血清灭活的融合剂脂质体小于10％、5％、4％、3％、2％或1％；
v)已从所述融合剂脂质体接受所述外源药剂的靶细胞不产生可检测到的抗体应答，(或针对所述靶细胞的抗体以高于背景水平不到10％、5％、4％、3％、2％或1％的水平存在；或
vi)已从所述融合剂脂质体接受所述外源药剂的靶细胞不产生可检测到的细胞免疫应答，或针对所述靶细胞的细胞应答以高于背景水平不到10％、5％、4％、3％、2％或1％的水平存在。


15.根据权利要求14所述的融合剂脂质体，其中所述背景水平是同一个体在施用所述融合剂脂质体之前的对应水平。


16.根据权利要求6到15中任一项所述的融合剂脂质体，其中所述免疫抑制蛋白是补体调节蛋白或CD47。


17.根据权利要求6到16中任一项所述的融合剂脂质体，其中所述免疫刺激性蛋白质为MHCI或MHCII蛋白质。


18.根据权利要求1到17中任一项所述的融合剂脂质体，其中所述有效负载基因是选自OTC、CPS1、NAGS、BCKDHA、BCKDHB、DBT、DLD、MUT、MMAA、MMAB、MMACHC、MMADHC、MCEE、PCCA、PCCB、UGT1A1、ASS1、PAH、PAL、ATP8B1、ABCB11、ABCB4、TJP2、IVD、GCDH、ETFA、ETFB、ETFDH、ASL、D2HGDH、HMGCL、MCCC1、MCCC2、ABCD4、HCFC1、LNBRD1、ARG1、SLC25A15、SLC25A13、ALAD、CPOX、HMBS、PPOX、BTD、HLCS、PC、SLC7A7、CPT2、ACADM、ACADS、ACADVL、AGL、G6PC、GBE1、PHKA1、PHKA2、PHKB、PHKG2、SLC37A4、PMM2、CBS、FAH、TAT、GALT、GALK1、GALE、G6PD、SLC3A1、SLC7A9、MTHFR、MTR、MTRR、ATP7B、HPRT1、HJV、HAMP、JAG1、TTR、AGXT、LIPA、SERPING1、HSD17B4、UROD、HFE、LPL、GRHPR、HOGA1、LDLR、ACAD8、ACADSB、ACAT1、ACSF3、ASPA、AUH、DNAJC19、ETHE1、FBP1、FTCD、GSS、HIBCH、IDH2、L2HGDH、MLYCD、OPA3、OPLAH、OXCT1、POLG、PPM1K、SERAC1、SLC25A1、SUCLA2、SUCLG1、TAZ、AGK、CLPB、TMEM70、ALDH18A1、OAT、CA5A、GLUD1、GLUL、UMPS、SLC22A5、CPT1A、HADHA、HADH、SLC52A1、SLC52A2、SLC52A3、HADHB、GYS2、PYGL、SLC2A2、ALG1、ALG2、ALG3、ALG6、ALG8、ALG9、ALG11、ALG12、ALG13、ATP6V0A2、B3GLCT、CHST14、COG1、COG2、COG4、COG5、COG6、COG7、COG8、DOLK、DHDDS、DPAGT1、DPM1、DPM2、DPM3、G6PC3、GFPT1、GMPPA、GMPPB、MAGT1、MAN1B1、MGAT2、MOGS、MPDU1、MPI、NGLY1、PGM1、PGM3、RFT1、SEC23B、SLC35A1、SLC35A2、SLC35C1、SSR4、SRD5A3、TMEM165、TRIP11、TUSC3、ALG14、B4GALT1、DDOST、NUS1、RPN2、SEC23A、SLC35A3、ST3GAL3、STT3A、STT3B、AGA、ARSA、ARSB、ASAH1、ATP13A2、CLN3、CLN5、CLN6、CLN8、CTNS、CTSA、CTSD、CTSF、CTSK、DNAJC5、FUCA1、GAA、GALC、GALNS、GLA、GLB1、GM2A、GNPTAB、GNPTG、GNS、GRN、GUSB、HEXA、HEXB、HGSNAT、HYAL1、IDS、IDUA、KCTD7、LAMP2、MAN2B1、MANBA、MCOLN1、MFSD8、NAGA、NAGLU、NEU1、NPC1、NPC2、SGSH、PPT1、PSAP、SLC17A5、SMPD1、SUMF1、TPP1、AHCY、GNMT、MAT1A、GCH1、PCBD1、PTS、QDPR、SPR、DNAJC12、ALDH4A1、PRODH、HPD、GBA、HGD、AMN、CD320、CUBN、GIF、TCN1、TCN2、PREPL、PHGDH、PSAT1、PSPH、AMT、GCSH、GLDC、LIAS、NFU1、SLC6A9、SLC2A1、ATP7A、AP1S1、CP、SLC33A1、PEX7、PHYH、AGPS、GNPAT、ABCD1、ACOX1、PEX1、PEX2、PEX3、PEX5、PEX6、PEX10、PEX12、PEX13、PEX14、PEX16、PEX19、PEX26、AMACR、ADA、ADSL、AMPD1、GPHN、MOCOS、MOCS1、PNP、XDH、SUOX、OGDH、SLC25A19、DHTKD1、SLC13A5、FH、DLAT、MPC1、PDHA1、PDHB、PDHX、PDP1、ABCC2、SLCO1B1、SLCO1B3、HFE2、ADAMTS13、PYGM、COL1A2、TNFRSF11B、TSC1、TSC2、DHCR7、PGK1、VLDLR、KYNU、F5、C3、COL4A1、CFH、SLC12A2、GK、SFTPC、CRTAP、P3H1、COL7A1、PKLR、TALDO1、TF、EPC...

【专利技术属性】
技术研发人员：GA冯马尔特扎恩，JR鲁本斯，JM米尔维德，MT米，NF戈登，JV沙，
申请(专利权)人：旗舰先锋创新V股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US