经修饰的PEDV刺突蛋白制造技术

本发明专利技术是关于经修饰的猪流行性腹泻病毒刺突蛋白。此外，本发明专利技术是关于包含该经修饰的PEDV刺突蛋白的免疫原性组合物及对个体实施免疫的方法，该方法包含向个体施用该免疫原性组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】经修饰的PEDV刺突蛋白序列表本申请案含有符合37C.F.R.1.821-1.825的序列表。本申请案随附的序列表特此以全文引用的方式并入。
本专利技术是关于经修饰的PEDV(猪流行性腹泻病毒)刺突(S)蛋白。该等修饰会产生经改良的PEDV疫苗生产方法。此外，包含该等经修饰的刺突蛋白的疫苗作为疫苗是有效的，且提供抵抗PEDV感染或攻击的保护。由于不到10日龄仔猪的死亡率较高(高达100％)，因此该疾病影响经济，例如对于美国养猪业而言。
技术介绍
猪流行性腹泻病毒是包膜正义单链RNA病毒，会造成猪只急性腹泻、呕吐及脱水。在三周龄及更小的猪只中，经PEDV感染后24小时即可观察到临床征象(包括急性水泻、腹泻、呕吐及脱水)，此导致高达100％的死亡率。此外，感染PEDV的动物肠中的严重变化及组织学变化会引起小肠中严重的病理性病灶。PEDV最初是在欧洲发现，但在包括韩国、中国、日本、菲律宾及泰国在内的许多亚洲国家已变得越来越成问题。自2013年以来，PEDV在美国出现且PEDV感染的经济影响已然显著。因此，业内持续需要开发能够保本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸分子，其编码选自由以下(a)及(b)组成的组的猪流行性腹泻病毒(PEDV)刺突(S)蛋白：/n(a)具有至少一个突变的基因型2a(G2a)PEDV S蛋白，其中/n氨基酸位置900处的亮氨酸残基被亮氨酸残基以外的氨基酸残基取代，和/或/n氨基酸位置901处的亮氨酸残基被亮氨酸残基以外的氨基酸残基取代，/n其中氨基酸位置的编号参考SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:39的野生型G2a PEDV S蛋白的氨基酸序列；/n(b)具有至少一个突变的基因型2b(G2b)PEDV S蛋白，其中/n氨基酸位置897处的亮氨酸残基被亮氨酸残基以外的氨基酸残基取代，和/或/n氨基酸位置898...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180920 EP 18195774.7;20190328 EP 19165973.91.一种核酸分子，其编码选自由以下(a)及(b)组成的组的猪流行性腹泻病毒(PEDV)刺突(S)蛋白：
(a)具有至少一个突变的基因型2a(G2a)PEDVS蛋白，其中
氨基酸位置900处的亮氨酸残基被亮氨酸残基以外的氨基酸残基取代，和/或
氨基酸位置901处的亮氨酸残基被亮氨酸残基以外的氨基酸残基取代，
其中氨基酸位置的编号参考SEQIDNO:2或SEQIDNO:39的野生型G2aPEDVS蛋白的氨基酸序列；
(b)具有至少一个突变的基因型2b(G2b)PEDVS蛋白，其中
氨基酸位置897处的亮氨酸残基被亮氨酸残基以外的氨基酸残基取代，和/或
氨基酸位置898处的亮氨酸残基被亮氨酸残基以外的氨基酸残基取代，
其中氨基酸位置的编号参考SEQIDNO:3的野生型G2bPEDVS蛋白的氨基酸序列。


2.如权利要求1的核酸分子，其中除亮氨酸残基以外的所述氨基酸残基选自以下组成的组：丙氨酸残基、甘氨酸残基、异亮氨酸残基、甲硫氨酸残基及缬氨酸残基。


3.如权利要求1或2的核酸分子，其中氨基酸位置的编号参考野生型GPEDVS蛋白的氨基酸序列RSXIEDLLF(SEQIDNO:4)，其中R是S1/S2裂解位点的保守精氨酸残基，且LL是在基因型2a(G2a)PEDVS蛋白内的氨基酸位置900及901或LL是在基因型2b(G2b)PEDVS蛋白内的氨基酸位置897及898。


4.一种核酸分子，其编码包含氨基酸序列RSX1IEDX2X3(SEQIDNO:1)的猪流行性腹泻病毒(PEDV)刺突(S)蛋白，
其中R是所述PEDVS蛋白的S1/S2裂解位点的保守精氨酸残基，X1可为任一氨基酸残基，且其中
(I)X2是除亮氨酸残基以外的氨基酸残基，且X3是亮氨酸残基，或
(II)X2是亮氨酸残基，且X3是除亮氨酸残基以外的氨基酸残基，或
(III)X2是除亮氨酸残基以外的氨基酸残基，且X3是除亮氨酸残基以外的氨基酸残基。


5.如权利要求1-4中任一项的核酸分子，其中所述PEDVS蛋白包含氨基酸序列RSXIEDAAF(SEQIDNO:5)，其中R是所述PEDVS蛋白的S1/S2裂解位点的保守精氨酸残基，且AA是在基因型2a(G2a)PEDVS蛋白内的氨基酸位置900及901或AA是在基因型2b(G2b)PEDVS蛋白内的氨基酸位置897及898。


6.如权利要求1-5中任一项的核酸分子，其中所述PEDVS蛋白进一步包含氨基酸序列X1X2X3FX4KX5X6X7X8(SEQIDNO:6)，
其中X8是所述PEDVS蛋白的C末端氨基酸残基或是相对于所述PEDVS蛋白的C末端氨基酸位置-2位置处的氨基酸残基，
X2至X5、X7及X8可为任一氨基酸残基，且其中
(i)X1是除酪氨酸残基以外的氨基酸残基，且X6是组氨酸残基，或
(ii)X1是酪氨酸残基，且X6是除组氨酸残基以外的氨基酸残基，或
(iii)X1是除酪氨酸残基以外的氨基酸残基，且X6是除组氨酸残基以外的氨基酸残基。


7.如权利要求1-3、5或6中任一项的核酸分子，其中
(a)在所述G2aPEDVS蛋白中，进一步
氨基酸位置1377处的酪氨酸残基被酪氨酸残基以外的氨基酸残基取代，和/或
氨基酸位置1384处的组氨酸残基被组氨酸残基以外的氨基酸残基取代，
或
(b)在所述G2...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·尼科林，A·加列，
申请(专利权)人：勃林格殷格翰动物保健有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE