一种界面增敏型检测试剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种界面增敏型检测试剂及其制备方法和应用，该界面增敏型检测试剂包括载有第二抗体的荧光传感器、乙酰胆碱酯酶标抗原、酶的底物和第一抗体，所述荧光传感器以UCNPs作为能量供体、FITC(Fluorescein isothiocyanate isomer，异硫氰酸荧光素)作为能量受体，能量供体和能量受体之间通过共价键结合。本发明专利技术克服了现有的增敏策略存在的增敏效果不佳、检测目标单一、稳定性差、检测效果不佳等缺陷，将荧光传感器和酶联反应相结合，不仅实现多种目标物的高灵敏检测，而且稳定性好。

【技术实现步骤摘要】
一种界面增敏型检测试剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及荧光传感器领域，更具体地，涉及一种界面增敏型检测试剂及其制备方法和应用。
技术介绍
作为一种新兴的传感技术，荧光共振能量转移(FRET)被广泛应用于医学成像、生物传感、生物分析等领域，但是能量转移效率低是FRET普遍存在的现象，导致基于FRET的荧光传感器的灵敏度不高。因此，需要采取一系列措施来提高FRET的能量转移效率，增强基于FRET的荧光传感器的灵敏度。目前，现有的荧光传感器增敏策略主要包括：重金属靶调增敏、染料靶调增敏、纳米材料增敏和DNA增敏四种策略。但是上述的四种荧光传感器增敏策略都存在缺陷，如：重金属靶调增敏策略的荧光传感器检测的目标物单一，只能用于检测重金属离子和生物硫醇；染料增敏策略中染料分子与上转换纳米粒子(UCNPs)的结合不稳定、有机染料的光稳定性差、有机染料的自我淬灭会影响染料增敏后UCNPs的光吸收；常见的纳米材料增敏使用金纳米粒子(AuNPs)和氧化石墨烯(GO)，AuNPs由于其紫外吸收峰范围有限、荧光淬灭效率低导致基于AuNPs的传感器无法被用于检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种界面增敏型检测试剂，其特征在于，包括载有第二抗体的荧光传感器、酶标抗原、酶的底物和第一抗体，所述荧光传感器以UCNPs作为能量供体、异硫氰酸荧光素作为能量受体，能量供体和能量受体之间通过共价键结合；所述酶和酶的底物分别为乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱。/n

【技术特征摘要】
1.一种界面增敏型检测试剂，其特征在于，包括载有第二抗体的荧光传感器、酶标抗原、酶的底物和第一抗体，所述荧光传感器以UCNPs作为能量供体、异硫氰酸荧光素作为能量受体，能量供体和能量受体之间通过共价键结合；所述酶和酶的底物分别为乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱。


2.根据权利要求1所述的界面增敏型检测试剂，其特征在于，所述UCNPs为NaYF4:Yb3+,Tm3+。


3.权利要求1或2所述的界面增敏型检测试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、制备载有第二抗体的荧光传感器；
S2、制备酶标抗原；
S3、将载有第二抗体的荧光传感器与酶的底物溶液混合，然后加入酶标抗原溶液和第一抗体，即制成所述界面增敏型检测试剂。


4.根据权利要求3所述的界面增敏型检测试剂的制备方法，其特征在于，所述载有第二抗体的荧光传感器的制备包括以下步骤：
S11、制备油酸修饰的UCNPs；
S12、通过配体交换法制备水溶性UCNPs；
S13、制备以UCNPs为能量供体、异硫氰酸荧光素为能量受体的荧光传感器；
S14、制备载有第二抗体的荧光传感器。


5.根据权利要求4所述的界面增敏型检测试剂的制备方法，其特征在于，步骤S11中，具体为：将YCl3·6H2O、YbCl3·6H2O、TmCl3·6H2O、OA、1-ODE加入到反应容器中，在氮气保护下升温至150℃，抽真空除去反应溶液中的水分，继续升温至160℃并恒温反应直至溶液澄清透明，降温至室温；将NaOH、NH4F溶解在甲醇溶液中配...

【专利技术属性】
技术研发人员：许宙，程云辉，张林威，李青霞，陈茂龙，丁利，焦叶，文李，李虹辉，
申请(专利权)人：长沙理工大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43