一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法技术

本发明专利技术公开了一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法，包括以下步骤：步骤一：选择合适实验材料；步骤二：对主要试剂进行配制以及配制后试剂的储存；步骤三：使细胞增殖，并对增殖后的细胞进行不同实验测试；步骤四：对细胞进行台盼蓝排染实验，并计算细胞存活率；步骤五：对细胞进行免疫组织化学染色，本发明专利技术通过采用多组实验对比，能够通过分别设置不同浓度的CCL20与CXCL8的贮备液对肠癌细胞进行增殖培养，一方面确定相同趋化因子情况下，趋化因子浓度对于肠癌细胞增殖率的影响，另一方面能够确定相同趋化因子浓度条件下，单一趋化因子和两个趋化因子分别对肠癌细胞增殖率的影响，能够了解趋化因子浓度和趋化因子数量分别对肠癌细胞增殖的影响。

【技术实现步骤摘要】
一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法
本专利技术属于肠癌细胞增殖
，具体涉及一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法。
技术介绍
结直肠癌容易发生肝转移。如何预测及防治结直肠癌肝转移是一大世界性难题。趋化因子作为肿瘤微环境的重要成份之一，在CLM中发挥重要作用。现有的研究表明，巨噬细胞炎性蛋白3α和白介素-8与CLM最为密切。然而，相关分子机制尚未完全明了。上皮间质转化是一个由上皮细胞向间质细胞转变的暂时性和可逆性过程。这个过程被广泛定义为从上皮形态向间质形态转变时不同标志物表达的改变，以及细胞获得迁移及侵袭力增强的功能性改变。本研究旨在明确趋化因子CCL20和CXCL8与EMT之间的关系，深入探讨CCL20与CXCL8联合诱导肠癌细胞发生EMT的分子机制。检测临床CRC组织标本，寻找支持CCL20与CXCL8联合诱发EMT的临床证据，分析CCL20与CXCL8共表达与CRC患者临床病理指标及预后的相关性。现在针对于目前市面上大多数的肠癌细胞增殖技术提出以下问题：1、现有的技术很少有针对趋化因此本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法，其特征在于：包括以下步骤：/n步骤一：选择合适实验材料； 步骤二：对主要试剂进行配制以及配制后试剂的储存；步骤三：使细胞增殖，并对增殖后的细胞进行不同实验测试； 步骤四：对细胞进行台盼蓝排染实验，并计算细胞存活率； 步骤五：对细胞进行免疫组织化学染色； 步骤六：选取合适细胞，对细胞进行MTT实验测试，并计算细胞增殖率；/n步骤七：对实验数据结果进行分析，并使用统计学对数据进行处理。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：选择合适实验材料；步骤二：对主要试剂进行配制以及配制后试剂的储存；步骤三：使细胞增殖，并对增殖后的细胞进行不同实验测试；步骤四：对细胞进行台盼蓝排染实验，并计算细胞存活率；步骤五：对细胞进行免疫组织化学染色；步骤六：选取合适细胞，对细胞进行MTT实验测试，并计算细胞增殖率；
步骤七：对实验数据结果进行分析，并使用统计学对数据进行处理。


2.根据权利要求1所述的一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法，其特征在于：所述步骤一中，从中国科学院上海细胞生物研究所细胞库内选择合适人结肠腺癌细胞系，并将细胞进行复苏。


3.根据权利要求1所述的一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法，其特征在于：所述步骤二中，室温下提前分别配制好DMEM及RPMI1640基础培养基、DMEM完全培养基、PBS溶液、台盼蓝染液，并将CCL20、CXCL8均溶于无菌PBS溶液，并制成100μg/μL浓度的贮备液，并将贮备液分为只加入CCL20、CXCL8以及混合加入CCL20和CXCL8三种不同的贮备液，将不同贮备液采用DMEM或RPMI1640基础培养基稀释至不同实验浓度，将贮备液贮存于-80℃冰箱内。


4.根据权利要求1所述的一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法，其特征在于：所述步骤三中，在基础培养基90mL中加入10mL解冻的灭活胎牛血清，并加入100U/mL青霉素和100U/mL链霉素，配成含10%胎牛血清的完全培养基，使用三种不同贮备液对细胞进行增殖。


5.根据权利要求1所述的一种基于CCL20与CXCL8促进肠癌细胞的增殖方法，其特征在于：所述步骤三中，将细胞移入含有5mLDMEM或者RPMI1640基础培养基的离心管中，低速离心10min，并洗涤一次，离心后弃上清，加入2-4mLDMEM或者RPMI1640完全培养基转移到普通细胞培养6孔板中，置于孵箱内培...

【专利技术属性】
技术研发人员：程先硕，肖尤川，栾利昆，杨之斌，李云峰，董坚，夏翠锋，
申请(专利权)人：云南省肿瘤医院昆明医科大学第三附属医院，
类型：发明
国别省市：云南;53