一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法技术

本申请涉及外泌体分离领域，更具体地说，它涉及一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法，具体包括如下步骤：S1、对人体皮肤成纤维细胞进行扩增培养；S2、换用无血清培养基，对扩增后的人体皮肤成纤维细胞进行饥饿培养，饥饿培养过程中切换至无氧状态，并通入少量一氧化氮对人体皮肤成纤维细胞进行刺激；S3、取上清液，并通过滤膜过滤除去细胞和细胞碎片；S4、通过超速离心法，分离上清液中的外泌体。在本申请中，通过一氧化氮刺激人体皮肤成纤维细胞，使之可以更好地分泌外泌体，进而提高了外泌体的产量。

【技术实现步骤摘要】
一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法
本申请涉及外泌体分离领域，更具体地说，它涉及一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法。
技术介绍
成纤维细胞是细胞外基质沉积和重塑的主要间充质细胞类型。人体皮肤成纤维细胞产生的外泌体，对皮肤皱纹或皮肤缺损的治疗，有着重要的作用。人体皮肤成纤维细胞的外泌体一般通过对人体皮肤成纤维细胞进行培养至一定密度后，换用无血清培养基进行饥饿培养，随后取出上清液，通过超速离心法或其他方法，分离得到其中的外泌体。在实际使用过程中，外泌体的用量较大，而采用上述方式制得的外泌体产量仍然较低。
技术实现思路
为了提高人体皮肤成纤维细胞的外泌体产量，本申请提供一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法本申请提供的一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法采用如下的技术方案：一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法，具体包括如下步骤：S1、对人体皮肤成纤维细胞进行扩增培养；S2、换用无血清培养基，对扩增后的人体皮肤成纤维细胞进行饥饿培养，饥饿培养过程中切换至无氧状态，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法，其特征在于，具体包括如下步骤：/nS1、对人体皮肤成纤维细胞进行扩增培养；/nS2、换用无血清培养基，对扩增后的人体皮肤成纤维细胞进行饥饿培养，饥饿培养过程中切换至无氧状态，并通入少量一氧化氮对人体皮肤成纤维细胞进行刺激；/nS3、取上清液，并通过滤膜过滤除去细胞和细胞碎片；/nS4、通过超速离心法，分离上清液中的外泌体。/n

【技术特征摘要】
1.一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
S1、对人体皮肤成纤维细胞进行扩增培养；
S2、换用无血清培养基，对扩增后的人体皮肤成纤维细胞进行饥饿培养，饥饿培养过程中切换至无氧状态，并通入少量一氧化氮对人体皮肤成纤维细胞进行刺激；
S3、取上清液，并通过滤膜过滤除去细胞和细胞碎片；
S4、通过超速离心法，分离上清液中的外泌体。


2.根据权利要求1所述的一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法，其特征在于，在步骤S1中，人体皮肤成纤维细胞采用悬浮培养。


3.根据权利要求2所述的一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法，其特征在于，在步骤S2中，饥饿培养的时间为20～30h。


4.根据权利要求3所述的一种人体皮肤成纤维细胞外泌体制备分离方法，其特征在于，在步骤S2中，饥饿培养至8～15h后，将人体皮肤成纤维细胞转至无氧培养箱中，培养2～3...

【专利技术属性】
技术研发人员：王雪莹，陈继冰，
申请(专利权)人：广州四叶草健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44