cBIN1抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及免疫技术领域，尤其涉及cBIN1抗体及其应用。本发明专利技术提供的cBIN1抗体的重链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:1、2和3所示的氨基酸序列；轻链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:4、5和6所示的氨基酸序列。该抗体与抗原具有良好的结合能力，以其制备试剂能够实现对目标抗原的准确检测。目标抗原的准确检测。

【技术实现步骤摘要】
cBIN1抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及免疫
，尤其涉及cBIN1抗体及其应用。

技术介绍

[0002]心衰是多种原因导致的心脏结构和/或功能的异常改变，使心室收缩和/或舒张功能发生障碍，从而引起的一组复杂的临床综合征。心衰是各种心脏疾病的严重表现或晚期阶段，死亡率和再住院率居高不下。近几年各地的资料显示，我国心衰的患病率已显著增加至2％～3％，现症患者约1000万。
[0003]心衰心肌的核心病理改变是钙离子传输能力变弱，使心肌的收缩能力受限制。而导致心衰特征性的钙离子传输障碍的原因是兴奋
‑
收缩(excitation
‑
contraction)(E
‑
C)失耦联与非同步的钙释放。生理条件下，膜电位去极化后诱发同步的钙释放，使钙离子穿过细胞膜，在肌浆网内触发更多的钙释放，即钙诱导的钙释放calcium
‑
induced
‑
calcium
‑
release(CICR)过程。健康的和理想状态下的CICR过程依赖于位于心肌细胞之间结合部肌浆网膜上的兰尼碱受体(ryanodine receptors，RyRs)和横管(transverse
‑
tubule，T
‑
tubule)膜上的L型钙离子通道(L
‑
type calcium channels，LTCCs)之间的紧密协作。横管内的LTCCs与结合部肌浆网膜上的RyRs形成了影响细胞浆外钙离子转运的二聚体复合物。心肌受各种原因导致的压力负荷增加而导致的病理性肥厚过程中，大量的横管结构发生错乱和重构，同时也伴随着这些二聚体结构的破坏，并最终导致非同步的CICR过程，并逐渐由肥厚失代偿发展为心衰。心衰时，除了横管的形态学上的一系列重构改变，受损的LTCC转移到横管，与RyRs形成二元复合体的过程也被扰乱，Ga
2+
转移能力下降，进而导致E
‑
C失耦联与心脏功能下降。
[0004]BIN蛋白(Bar蛋白编码基因)可分为AmphiphysinI、AmpII(又称Bin1)、Bin2、Bin3四种蛋白。作为含有BAR域的蛋白质超家族，Bin1包含一个特征由外显子1～9编码的N端条域(N
‑
BAR)。有趣的是，Bin1的带有20个外显子的基因根据不同的拼接方案生成不同的Bin1蛋白而具有不同的细胞功能。心肌横管内心脏桥接整合因子1(cardiac bridging integrator 1，cBIN1)就是带有13，17两个外显子的BIN1蛋白亚型。
[0005]研究表明，cBIN1参与形成的横管微结构域具有促进和维持LTCC
‑
RyR二元复合体形成的功能。现有的研究结果表明，拥有cBin1的微结构域可以通过以下4项机制促进有效的LTCC
‑
RyR二元复合体的形成：1)促进LTCCs通过微结构域向前转运；2)促进已经转移到横管的LTCCs聚集成簇；3)在横管腔内形成保护性的细胞外钙离子的慢速弥散区，以控制LTCCs的转移动力；4)将胞浆内的RyRs重新召集会交界区肌浆网膜上，便于与LTCCs形成新的二元复合体。同时，cBin1微结构域通过续膜翻转和急性应激刺激下快速重组的能力，对维持心肌横管的稳态发挥了作用。与此同时，研究发现，在心衰相关刺激刺激下，cBin1微结构域会因为cBin1的转录减少而丢失，并伴随着二元复合体形成的减少和心肌收缩力的损伤。也就是说，当cBin1表达减少减少时，横管的微结构域结构会发生紊乱，进而降低心脏收缩能力和对β受体的反应。
[0006]因此，cBIN1有望成为一种新型的心衰标记物。如果能够有效的检测心肌或血液内cBIN1的表达水平，可以客观的评价心脏结构完整性和功能状态，为心衰的评估，治疗提供客观可靠的依据，指导心衰的治疗。开发检测cBIN1的敏感抗体将有效促进对该标记物的检测和评估，为临床诊断和治疗心衰提供新的可靠的参考。

技术实现思路

[0007]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供cBIN1抗体及其应用。
[0008]本专利技术提供的cBIN1抗体，其重链包含三个CDR区，其中至少一个CDR区的氨基酸序列具有如SEQ ID NO:1、2或3所示的氨基酸序列，或者与其具有至少80％序列同源性的序列；其轻链包含三个CDR区，其中至少一个CDR区的氨基酸序列具有如SEQ ID NO:4、5或6所示的氨基酸序列，或者与其具有至少80％序列同源性的序列。
[0009]在本专利技术中，所述cBIN1抗体重链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:1、2和3所示的氨基酸序列；轻链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:4、5和6所示的氨基酸序列。
[0010]在本专利技术一些实施例中，所述cBIN1抗体重链的三个CDR区的氨基酸序列依次如SEQ ID NO:1、2和3所示；轻链的三个CDR区的氨基酸序列依次如SEQ ID NO:4、5和6所示。
[0011]其中，SEQ ID NO:1所示的序列为GFNIKDS；
[0012]SEQ ID NO:2所示的序列为DPEDDD；
[0013]SEQ ID NO:3所示的序列为STLVATPWFFDV；
[0014]SEQ ID NO:4所示的序列为SASQDINNYLN；
[0015]SEQ ID NO:5所示的序列为YTSTLHS；
[0016]SEQ ID NO:6所示的序列为QQYTHNLPWT。
[0017]本专利技术提供的cBIN1抗体，其重链包含4个FR区，其中至少一个FR区的氨基酸序列具有如SEQ ID NO:9、10、11或12所示的氨基酸序列，或者与其具有至少80％序列同源性的序列；其轻链包含4个FR区，其中至少一个FR区的氨基酸序列具有如SEQ ID NO:13、14、15或16所示的氨基酸序列，或者与其具有至少80％序列同源性的序列。
[0018]在本专利技术中，所述cBIN1抗体重链的4个FR区分别具有如SEQ ID NO:9、10、11或12所示的氨基酸序列；轻链的4个FR区分别具有如SEQ ID NO:13、14、15、16所示的氨基酸序列。
[0019]在本专利技术一些实施例中，所述cBIN1抗体重链的4个FR区的氨基酸序列依次如SEQ ID NO:9、10、11或12所示；轻链的4个FR区的氨基酸序列如SEQ ID NO:13、14、15、16所示。
[0020]其中，SEQ ID NO:9所示的序列为EVQLQQSGAELVRPGASVKLSCTTS；
[0021]SEQ ID NO:10所示的序列为YMHWVKQRPEQGLEWIGRI；
[0022]SEQ ID NO:11所示的序列为AVYAPKFQDRATMTADTSSNTAYLHLS SLTSDDTAVYYCTT；
[0023]SEQ I本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.cBIN1抗体，其特征在于，其重链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:1、2和3所示的氨基酸序列；其轻链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:4、5和6所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的cBIN1抗体，其特征在于，其重链可变区具有如SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列；其轻链可变区具有如SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。3.编码权利要求1或2所述的抗体的核苷酸。4.一种表达载体，包括权利要求3所述的核苷酸。5.转化或转染权利要求4所述的表达载...

【专利技术属性】
技术研发人员：周杨钊，周康，
申请(专利权)人：中南大学湘雅二医院，
类型：发明
国别省市：