【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于亲和毛细管电泳的系统和方法
[0001]相关专利申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2018年9月10日提交的美国临时专利申请系列第62/729,384号的优先权，该美国临时专利申请的内容全文以引用方式合并于本文。
[0003]当前公开的主题涉及在多肽的复杂混合物中筛选一种或多种多肽的组合物、系统和方法。特别地，本文公开的主题涉及与亲和毛细管电泳结合使用的配体，以及用于检测包括多特异性抗体(例如双特异性抗体)的多聚体混合物中的多肽的方法和系统。
技术介绍
[0004]由于双特异性抗体(BsAb)识别两个不同抗原靶的独特能力，近年来引起了广泛的治疗兴趣。尽管关注BsAb的治疗用途，但是其商业生产一直颇具挑战性，因为常规的生产方法会导致不良的副产物并需要复杂的纯化过程。例如，已通过杵臼结构(knob
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into
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hole)技术生成某些BsAb，从而在重链的CH3结构域中产生互补突变，以形成“突起”(knob)和“孔”(hole)结构。与常规抗体的生产可以依靠相同的重链...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于在样品中分离多亚基蛋白的系统，其包括：a)配体，b)背景电解质缓冲液，c)所述样品，d)毛细管，e)在所述毛细管的一端处或所述毛细管的一端附近的阳极，和f)在所述毛细管的另一端处或所述毛细管的另一端附近的阴极，其中所述样品与所述配体混合以形成至少一种配体
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蛋白复合物并在所述毛细管的阳极端装载至所述毛细管中，并且其中所述毛细管填充有与所述配体混合的所述背景电解质缓冲液。2.根据权利要求1所述的系统，其进一步包括位于所述毛细管的阴极端附近的检测器，其中所述检测器检测210nm至220nm光吸收度或激光诱导荧光。3.根据权利要求1至2中任一项所述的系统，其中所述样品包含至少一种同源二聚体、至少一种异源二聚体或其组合。4.根据权利要求1至3中任一项所述的系统，其中在所述配体与所述至少一种异源二聚体的第一亚基结合且不与所述至少一种异源二聚体的第二亚基结合时，形成第一配体
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蛋白复合物。5.根据权利要求1至4中任一项所述的系统，其中在所述配体与所述同源二聚体的至少两个相同的第一亚基或第二亚基结合时，形成第二配体
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蛋白复合物。6.根据权利要求1至5中任一项所述的系统，其中所述至少一种配体
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蛋白复合物配置成在所述配体与所述多亚基蛋白的亚基结合时，具有改变的电荷、质量、流体动力学大小、电泳迁移率或其组合。7.根据权利要求1至6中任一项所述的系统，其中所述第二配体
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蛋白复合物与所述第一配体
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蛋白复合物相比具有更低的电泳迁移率。8.根据权利要求1至7中任一项所述的系统，其中所述配体为肽或肽片段。9.根据权利要求1至8中任一项所述的系统，其中所述配体为荧光标记的肽或荧光标记的肽片段。10.根据权利要求1至9中任一项所述的系统，其中所述配体选自由以下项组成的组：人CD3肽、小鼠CD3肽、大鼠CD3肽、兔CD3肽和食蟹猴CD3肽。11.根据权利要求1至10中任一项所述的系统，其中通过向所述配体的非结合区添加一个或多个氨基酸来修饰所述配体。12.根据权利要求11所述的系统，其中所述一个或多个氨基酸选自由以下项组成的组：谷氨酸、天冬氨酸及其组合。13.根据权利要求11至12中任一项所述的系统，其中添加的一个或多个氨基酸配置成改变所述配体的电荷和质量。14.根据权利要求11至13中任一项所述的系统，其中所述样品在以下物质中进一步与所述配体混合：(A)低pH值尿素缓冲液；或(B)高pH值HEPES缓冲液与0.1％聚山梨酯20的组合。15.根据权利要求11至14中任一项所述的系统，其中所述背景电解质缓冲液包含氨基
正己酸(EACA)、三亚乙基四胺(TETA)和羟丙基甲基纤维素(HPMC)。16.一种用于在样品中分离多亚基蛋白的方法，其包括以下步骤：(a)产生所述样品和配体的混合物以形成至少一种配体
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蛋白复合物，(b)将所述混合物施加至毛细管，其中所述毛细管填充有与所述配体混合的背景电解质缓冲液，(c)跨所述毛细管施加电压，以及(d)使所述多亚基蛋白和所述至少一种配体
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蛋白复合物移动通过所述毛细管，其中所述配体
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蛋白复合物配置成在所述配体与所述多亚基蛋白的亚基结合时具有改变的电荷、质量、流体动力学大小、电泳迁移率或其组合，从而在所述样品中分离所述多亚基蛋白。17.一种用于在样品混合物中分离靶蛋白的方法，其包括以下步骤：(a)产生所述样品和配体的混合物以形成至少一种配体
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蛋白复合物，(b)将所述混合物施加至毛细管，其中所述毛细管填充有与所述配体混合...
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