一种PBMC和MSC共培养的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种PBMC和MSC共培养的方法，所述方法包括以下步骤：S1，MSC的接种；S2，MSC的去增值处理；S3，冻存PBMC的复苏；S4，PBMC的染色；S5，PBMC和MSC共培养。本发明专利技术所述的共培养方法，通过精确的控制PBMC与MSC的含量比、以及对刺激剂的特定选择，可以提高检测结果的准确性，该培养方法操作简单、高效，得到的数据重现性好。本发明专利技术中通过检测待测样本中的外周血单个核细胞的增殖能力的变化量来评价间充质干细胞的免疫调节能力。本发明专利技术提供的方法可以对间充质干细胞的免疫调节能力进行评价，如果，外周血单个核细胞增殖的变化量越大，说明该间充质干细胞的免疫调节能力更强，质量更好。

【技术实现步骤摘要】
一种PBMC和MSC共培养的方法及其应用
本专利技术涉及干细胞与再生医学
，尤其涉及一种PBMC和MSC共培养的方法及其应用。
技术介绍
间充质干细胞是一种多功能干细胞，免疫调节是评价间充质干细胞功能的重要指标之一。T淋巴细胞是机体免疫系统的重要组成，T淋巴细胞在经抗原刺激等条件激活后，可分化为多种细胞亚群，探究间充质干细胞对T淋巴细胞分化的影响，有助于更好的理解间充质干细胞对机体免疫系统的调节作用，为未来干细胞临床应用提供更加全面的临床前研究证据。其中，PBMC和MSC共培养步骤对整个检测结果的影响巨大。本专利技术意在提供一种PBMC和MSC共培养的方法，该共培养方法可有效提高检测结果的稳定性，使其具有重现性高、实验数据波动小等特点。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术第一方面提供了一种PBMC和MSC共培养的方法，所述方法包括以下步骤：S1，MSC的接种；S2，MSC的去增值处理；S3，冻存PBMC的复苏；S4，PBMC的染色；S5，PBMC和MSC共培养。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/nS1，MSC的接种；/nS2，MSC的去增值处理；/nS3，冻存PBMC的复苏；/nS4，PBMC的染色；/nS5，PBMC和MSC共培养。/n

【技术特征摘要】
1.一种PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
S1，MSC的接种；
S2，MSC的去增值处理；
S3，冻存PBMC的复苏；
S4，PBMC的染色；
S5，PBMC和MSC共培养。


2.根据权利要求1所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，步骤S1中，在对MSC接种前还包括调整细胞悬液的浓度。


3.根据权利要求2所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述细胞悬液调整后的浓度为1×105/ml～3×105/ml。


4.根据权利要求1所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，步骤S2中，在对MSC去增值处理时包括加入一定量的抑制剂。


5.根据权利要求4所述的PBMC和MSC共培养的方法，其特征在于，所述抑制剂的浓度为8～10μg/ml。

【专利技术属性】
技术研发人员：朱灏，
申请(专利权)人：华夏源细胞工程集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31