【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞无血清培养基及其应用
本专利技术涉及细胞培养
，具体涉及一种间充质干细胞无血清培养基及其应用。
技术介绍
目前国内外获得大量间充质干细胞的扩增方法依然是添加胎牛血清(fetalbovineserum，FBS)，胎牛血清中虽然包含多种细胞增殖所需的营养成分，被广泛应用于培养间充质干细胞，然而FBS培养的间充质干细胞往往存在细胞老化过快，杂细胞较多、易发生分化等问题，且FBS中含有多种未知动物来源蛋白，甚至可能携带细菌、病毒、传染性蛋白疾病等。随着血清培养的多种不利因素逐渐出现，血清培养方案也越来越受到业内人士排斥。随着间充质干细胞研究的深入，国内外也逐渐开发出相应的无血清培养方案，这些方案含有多种生长因子、结合转运蛋白、维生素、氨基酸、微量元素、激素等，可在一定程度上去除血清的影响。如CN110564680A中提到了人脐带间充质干细胞培养方法，通过浓缩无血清培养的人脐带间充质干细胞上清，获得细胞分泌蛋白，再通过添加维生素、生长因子、重组蛋白等，从而实现人脐带间充质干细胞的无血清培养，这在完...
【技术保护点】
1.一种间充质干细胞无血清培养基，包括基础培养基和添加成分，其特征在于，/n所述基础培养基为IMDM培养基；/n所述添加成分包括TGF-β3和抗坏血酸，所述TGF-β3的浓度为1-5μg/L，所述抗坏血酸和TGF-β3的用量比为25-200mg：1-5μg。/n
【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞无血清培养基，包括基础培养基和添加成分，其特征在于，
所述基础培养基为IMDM培养基；
所述添加成分包括TGF-β3和抗坏血酸，所述TGF-β3的浓度为1-5μg/L，所述抗坏血酸和TGF-β3的用量比为25-200mg：1-5μg。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞无血清培养基，其特征在于，所述添加成分包括0.1-1v/v％化学脂质；
所述化学脂质包括如下组分：
花生四烯酸，含量为1.8-2.2mg/L，胆固醇，含量为200-240mg/L，维生素E(生育酚)，含量为60-80mg/L，亚油酸，含量为8-12mg/L，亚麻酸，含量为8-12mg/L，肉豆蔻酸，含量为8-12mg/L，油酸，含量为8-12mg/L，棕榈酸，含量为8-12mg/L，棕榈油酸，含量为8-12mg/L，PluronicF-68，含量为80000-100000mg/L，硬脂酸，含量为8-12mg/L；
优选的，所述添加成分还包括20-35mg/L的复合酯类物质，所述复合酯类物质为重量比为1-5：5-30：2-20的乙醇胺、胆固醇、大豆卵磷脂的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的间充质干细胞无血清培养基，其特征在于，所述添加成分还包括0.1-2mg/L的氢化可的松；
优选的，所述添加成分还包括胰岛素、孕酮和地塞米松，所述胰岛素、孕酮、地塞米松和氢化可的松的用量比为8-25mg：1-10μg：4-20μg：0.1-2mg。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的间充质干细胞无血清培养基，其特征在于，所述添加组分还包括1-5g/L白蛋白，所述白蛋白是由植物作为表达宿主得到的重组人白蛋白，所述植物优选为水稻；
优选地，所述添加组分还包括转铁蛋白，所述转铁蛋白与所述重组人白蛋白的用量比为10-30mg：1-5g。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的间充质干细胞无血清培养基，其特征在于，所述添加组分还包括40-60μg/L的复合生长因子，所述复合生长因子包括重量比为5-40：5-50：2-10的b-FGF、EGF和HGF；
优选所述添加组分还包括：2-20μg/L的PDGF-BB；和/或，5-20μg/L的VEGF。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的间充质干细胞无血清培养基，其特征在于，所述添加组分还包括IGF-1，所述IGF-1与胰岛素的用量比为10-40μg：8-25mg。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的间充质干细...
【专利技术属性】
技术研发人员：李天晴，冯春，
申请(专利权)人：云南中科灵长类生物医学重点实验室，
类型：发明
国别省市：云南;53
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