美容方法技术

课题是提供使干细胞及其诱导细胞增殖的方法、以及由此解决皱纹、松弛等美容上的问题。通过对包含皮脂腺的皮肤施与机械刺激，可以使干细胞及其诱导细胞增殖。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】美容方法
本专利技术涉及用于使干细胞及其诱导细胞增加的方法、以及利用了该方法的美容方法。
技术介绍
真皮主要由间质成分和细胞成分构成，进一步配置有血管、神经。真皮经常受温度变化、紫外线照射、物理刺激等外部因素、压力、年龄增长等内部因素的影响。由此，真皮层所包含的真皮成纤维细胞的细胞活性发生变化。真皮成纤维细胞由于产生与皮肤的弹力、弹性有关的间质成分，因此由于细胞活性降低，从而真皮层变薄、丧失弹力，引起皱纹、松弛，成为美容上的大问题。迄今为止，作为改善皱纹、松弛、弹性等的药剂，对抑制分解间质成分的酶例如乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶等的活性的成分进行了研究(专利文献1：日本特开2016-169238号，专利文献2：日本特开2012-144499号)。此外，对于可以使真皮成纤维细胞的细胞活性增加的成分等进行了研究，开发出了各种真皮成纤维细胞活化剂(专利文献3：日本特开2006-262806号公报)。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开2016-169238号公报专利文献2：日本特开2012-144499号公报专利文献3：日本特开2006-262806号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的课题通过本专利技术者们的研究可知，真皮成纤维细胞如果通过老化等而细胞活性降低，则难以恢复细胞活性。因此，可以认为与对于细胞活性已经降低了的真皮成纤维细胞增强细胞活性相比，使新的真皮成纤维细胞分化诱导对于解决皱纹、松弛等美容上的问题是有效的。用于解决课题的方法r>本专利技术者们锐意尝试了诱导从干细胞向真皮成纤维细胞的分化的手段，结果令人惊讶地发现通过对干细胞大量存在的皮脂腺周围施与机械刺激，从而干细胞的分裂被促进，诱导出新的真皮成纤维细胞。因此，本专利技术涉及以下方案：[1]一种使皮脂腺周围的干细胞或其诱导细胞增殖的方法，所述方法包括：在将从皮肤采取的包含皮脂腺的皮肤试样进行器官培养时，对皮肤试样施加机械刺激。[2]根据项目1所述的方法，上述机械刺激为伸展刺激。[3]一种美容方法，包括：对担心松弛、皱纹、弹性的皮肤施与机械刺激，由此使皮脂腺周围的干细胞或其诱导细胞增殖。[4]根据项目3所述的美容方法，在上述皮肤中，皮脂腺密度为占皮肤区域的10～80％的密度。[5]根据项目3或4所述的美容方法，上述机械刺激为对皮肤的伸展、推压、或吸引。[6]一种美容设备，包含：测定皮脂腺密度的测定部、和机械刺激施加部，所述美容设备对皮脂腺密度高的皮肤区域施与机械刺激，由此使皮脂腺周围的干细胞或其诱导细胞增殖。附图说明图1是将年轻对象和年老对象的真皮中的成纤维细胞用3维电子显微镜(SBF-SEM)进行观察并重建而显示的图。图2是对年轻受检者(20多岁)的脸颊的皮肤、和年老受检者(80多岁)的脸颊的皮肤试样进行组织染色并拍摄而得的照片。图3是在年老受检者(80多岁)的脸颊的皮肤试样中，在通常的真皮部(Majordermallayer)、与皮脂腺周围部(Aroundsebaceousgland)中，将干细胞染色并拍摄而得的照片。图4中的图4A显示在对皮肤试样不施加伸展刺激而进行了器官培养的情况(control)、和施加伸展刺激而进行了器官培养的情况下，将CD54阳性的干细胞染色并拍摄而得的照片。图4B显示对皮肤试样不施加伸展刺激而进行了器官培养的情况、和施加伸展刺激而进行了器官培养的情况下，将胶原进行染色并拍摄而得的照片。图5中的图5A显示将向脸颊施与伸展刺激前后的鼻唇沟的照片。图5B是显示通过伸展刺激而鼻唇沟的皱纹改善了的图。图6显示添加以0.25×104细胞/ml、0.5×104细胞/ml、1.0×104细胞/ml、2.0×104细胞/ml、和4.0×104细胞/ml制备的细胞悬浮液2.5ml进行2天培养后的显微镜照片，并显示各浓度下的接触度。图7是将各接触度下的I型胶原的表达量进行了比较的图。图8显示由针对各基因的siRNA产生的基因表达的抑制效果。图9显示通过针对各基因的siRNA而抑制了基因表达的情况下的I型胶原的表达量变化。图10显示在培养真皮成纤维细胞中抑制了钙黏着蛋白2的基因表达的情况下的细胞增殖率(A)、和p21的基因表达(B)的变化。图11显示在培养真皮成纤维细胞中抑制了钙黏着蛋白2的基因表达的情况下的形状变化。通过钙黏着蛋白2的基因表达抑制(Knockout，敲除)，从而观察不到细胞彼此的粘接，在形状带圆形的同时，观察到作为年龄标志物的β-Gal的染色。具体实施方式本专利技术涉及使干细胞或其诱导细胞增殖的方法。该方法包括：在将从皮肤采取的包含皮脂腺的皮肤试样进行器官培养时，对皮肤试样施加机械刺激的工序。在皮脂腺的周围存在能够向真皮成纤维细胞的分化的干细胞。该干细胞以CD54表达作为特征。在将包含皮脂腺的皮肤试样进行器官培养时，通过对皮肤试样施加机械刺激而进行培养，从而皮脂腺周围的干细胞增加。这样增加的细胞可以维持干细胞性，也可以是由干细胞分化成的诱导细胞。作为由干细胞分化成的诱导细胞，可举出真皮前体细胞、真皮成纤维细胞等。这样存在于真皮的干细胞由于能够向真皮成纤维细胞分化，因此也被称为真皮干细胞。对皮肤试样、皮肤施加的机械刺激(mechanicalstress)是指带来力学作用的物理刺激。机械刺激不限于通过探针、执行器等机械而施与的刺激，也可以通过带来力学作用的任意手段施与。作为机械刺激，作为一例，为推压、吸引、压缩、伸展之中的至少1种。可以沿相对于皮肤试样、皮肤的表面平行的方向、即横向施加机械刺激，也可以沿相对于表面垂直的方向、即纵向施加机械刺激。机械刺激的强度可以在皮肤试样、皮肤不被损伤、裂断或破坏的范围任意设定。作为一例，优选以在皮肤试样中产生10％～50％左右的变形的方式向皮肤试样施与压缩或伸展刺激。变形优选为20～40％，更优选发生30％左右的变形。皮脂腺是产生皮脂的器官，跟随于毛囊而存在。皮脂腺分布在除手掌、脚掌以外的几乎全身。因此，本专利技术中的皮肤试样可以由皮肤的任意位置获得，特别也可以由皮脂腺发达的脂溢部位的皮肤获得。作为脂溢部位，可举出前额、鼻翼、鼻唇沟、有头发的头部、胸骨部、腋下、腹部、外阴部。在其它方案中，可以以表皮中所占的皮脂腺区域的比例，来选定应获得试样的位置。作为一例，可以在皮脂腺相对于皮肤区域占10～80％的皮肤中获得试样。皮脂腺区域优选为30～80％，更优选为50～80％。皮肤试样的大小可以任意选择，可以使用例如表面积为100mm2～10000mm2、并具有到达真皮层的深度的切片。从使侵袭性降低的观点考虑，优选为500mm2以下，更优选为300mm2以下。另一方面，从获得充分量的干细胞或其诱导细胞的观点考虑，优选为100mm2以上，进一步优选为500mm2以上。皮肤试样的器官培养只要基于常规方法进行即可，可以通过例如JournalofDermatolo本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种使皮脂腺周围的干细胞或其诱导细胞增殖的方法，所述方法包括：在将从皮肤采取的包含皮脂腺的皮肤试样进行器官培养时，对皮肤试样施加机械刺激。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180831 JP 2018-1640041.一种使皮脂腺周围的干细胞或其诱导细胞增殖的方法，所述方法包括：在将从皮肤采取的包含皮脂腺的皮肤试样进行器官培养时，对皮肤试样施加机械刺激。


2.根据权利要求1所述的方法，所述机械刺激为伸展刺激。


3.一种美容方法，包括：对担心松弛、皱纹、弹性的皮肤施与机械刺激，由此使皮脂腺周围的干细...

【专利技术属性】
技术研发人员：江连智畅，
申请(专利权)人：株式会社资生堂，
类型：发明
国别省市：日本;JP