【技术实现步骤摘要】
一种低硒高油脂植物硒形态测定的前处理方法
[0001]本专利技术涉及一种低硒高油脂植物硒形态测定的前处理方法,属于分析测试领域。
技术介绍
[0002]由于植物中硒形态多样化并且各个硒形态含量较低,大部分硒代氨基酸还具有热不稳定性,因此在分析硒形态的过程中前处理方法既要考虑方法回收率,也要保证方法的重现性及稳定性。当待测目标物为硒蛋白、硒多糖等大分子含硒化合物时,通常利用液相萃取的方式将不同含硒化合物提取之后,再进行总硒检测,例如有现有技术利用适量水、70%乙醇溶液、0.1mol/L NaCl溶液、0.1mol/L HCl溶液和0.1mol/L NaOH溶液分别提取富硒花生中水溶蛋白、醇溶蛋白、盐溶蛋白、酸溶蛋白及碱溶蛋白,进而测得这些蛋白质结合态的硒含量。而这些现有方法的时间成本很大,可能造成样品形态不稳定,也容易受到其余离子干扰。
技术实现思路
[0003]有鉴于此,本专利技术的主要目的在于提供一种低硒高油脂植物硒形态测定的前处理方法。
[0004]为了实现上述目的,本专利技术提供了一种低硒高油脂植物硒形态测定的前处理方法,包括以下步骤:
[0005](1)样品酶解:将待测样品中依次加入蛋白酶XIV与脂肪酶,混合均匀,之后加入超纯水,水浴超声30
‑
60min,振荡5
‑
15h后静置;
[0006](2)样品酶解液提取:向步骤(1)得到的产物中中加入氯仿,密封,振荡1
‑
2min后,2500
‑
3500 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种低硒高油脂植物中硒形态测定的前处理方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)样品酶解:将待测样品中依次加入蛋白酶XIV与脂肪酶,混合均匀,之后加入超纯水,水浴超声30
‑
60min,振荡5
‑
15h后静置;(2)样品酶解液提取:向步骤(1)得到的产物中中加入氯仿,密封,振荡1
‑
2min后,2500
‑
3500rpm/min离心10
‑
12min,吸取20
‑
25%(v/v)的样品上清液,按照湿法消解
‑
氢化物发生
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原子荧光光谱法流程检测总硒;(3)样品浓缩:吸取步骤(2)中的剩余上清液浓缩直至完全干燥,加入2
‑
3mL超纯水使样品复溶;(4)样品除杂:将步骤(2)复溶后的样品取2
‑
3mL分三至四次进行洗脱,并将洗脱液混合,之后将该洗脱液浓缩至0.4
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0.6mL;之后将其复溶、离心,进行后续的HPLC进样。2.如权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,在步骤(1)的样品酶解之前还包括样品干燥处理的步骤及样品称取的步骤。3.如权利要求2所述的前处理方法,其特征在于,所述样品干燥处理步骤包括:将样品洗净,样品经过冷冻干燥,液氮保护环境中研磨,过100
‑
200目筛。由于硒形态热稳定性较差,为了保证待测样品中各个形态不发生转变,采用冷冻干燥。为防止干燥后的样品在研磨中吸水变成粘稠装,采用液氮保护。4.如权利要求2所述的前处理方法,其特征在于,所述样品称取步骤包括:称取待测样品于40...
【专利技术属性】
技术研发人员:张泽洲,陈晓凡,王张民,刘志奎,孙辰璐,王莉莉,王晓丽,宋佳平,林锦钰,罗琴,
申请(专利权)人:南京恒宝田功能农业产业研究院有限公司,
类型:发明
国别省市:
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