流感病毒血凝素突变体制造技术

本发明专利技术涉及在植物中产生经过修饰的流感病毒蛋白。更具体地说，本发明专利技术涉及在植物中产生流感病毒样微粒(VLP)和增加其产量，其中VLP包括经过修饰的流感病毒蛋白，例如经过修饰的流感病毒血凝素(HA)。该HA蛋白可包括与相应的野生型氨基酸序列相比包含至少一个取代的氨基酸序列。还提供了一种对经过修饰的HA蛋白进行编码的核酸。此外，还提供了在植物、植物部分或植物细胞中产生流感病毒样微粒(VLP)的方法和增加植物、植物部分或植物细胞中的流感病毒样微粒(VLP)的产量的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】流感病毒血凝素突变体
本专利技术涉及在植物中产生突变型病毒蛋白。更具体地说，本专利技术涉及在植物中产生流感病毒样微粒和增加流感病毒样微粒的产量。
技术介绍
流感病毒是正粘病毒科的包膜单链核糖核酸病毒。流感病毒具有高度传染性，可能在所有年龄群体中引起轻度至重度的疾病。接种疫苗仍然是预防流感传染的最有效方法。传统上，疫苗接种是使用减毒活病毒或完全灭活的病毒完成的，这在向患者给药时会引发免疫应答。为了消除减毒活病毒和完全灭活的病毒重新获得复制和感染能力的潜在风险，还使用包括重组病毒蛋白的疫苗来引发对流感传染的保护性免疫。但是，使用重组病毒蛋白作为疫苗的免疫原性成分受到许多限制。首先，在没有最佳表达和适当蛋白折叠所需的一整套病毒蛋白和遗传成分的情况下，标准体外表达系统中的重组病毒蛋白的产量可能不足以用于疫苗生产的目的。其次，由于折叠不当、抗原呈递不良和/或在赋予持久的保护性免疫方面无效的主要体液免疫应答的产生，重组病毒蛋白疫苗可能表现出较差的免疫原性。有四种类型的流感病毒：甲型、乙型、丙型和丁型，其中甲型和乙型流感病毒是人群中的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸，包括对经过修饰的流感病毒H3血凝素(HA)蛋白进行编码的核苷酸序列，所述血凝素蛋白包括氨基酸序列，所述氨基酸序列与相应的野生型氨基酸序列相比包括至少一个取代，所述至少一个取代位于与A/Hong Kong/4801/14血凝素的位置382、384、392、431、524、525、526或528处的氨基酸对应的一个或多个氨基酸处。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180627 US 62/690,7801.一种核酸，包括对经过修饰的流感病毒H3血凝素(HA)蛋白进行编码的核苷酸序列，所述血凝素蛋白包括氨基酸序列，所述氨基酸序列与相应的野生型氨基酸序列相比包括至少一个取代，所述至少一个取代位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置382、384、392、431、524、525、526或528处的氨基酸对应的一个或多个氨基酸处。


2.根据权利要求1所述的核酸，包括：
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置382处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第一个取代，所述取代为非天冬酰胺取代，
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置524处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第二个取代，所述取代为非半胱氨酸取代，以及
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置528处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第三个取代，所述取代为非半胱氨酸取代。


3.根据权利要求2所述的核酸，其中：
所述第一个取代为丙氨酸取代，或者是保守的丙氨酸取代，
所述第二个取代为丝氨酸取代，或者是保守的丝氨酸取代，并且
所述第三个取代为亮氨酸取代，或者是保守的亮氨酸取代。


4.根据权利要求1所述的核酸，包括：
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置384处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第一个取代，所述取代为非亮氨酸取代，
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置524处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第二个取代，所述取代为非半胱氨酸取代，以及
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置528处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第三个取代，所述取代为非半胱氨酸取代。


5.根据权利要求4所述的核酸，其中：
所述第一个取代为缬氨酸取代，或者是保守的缬氨酸取代，
所述第二个取代为丝氨酸取代，或者是保守的丝氨酸取代，并且
所述第三个取代为亮氨酸取代，或者是保守的亮氨酸取代。


6.根据权利要求1所述的核酸，包括：
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置392处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第一个取代，所述取代为非苯丙氨酸取代，
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置524处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第二个取代，所述取代为非半胱氨酸取代，以及
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位点528处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第三个取代，所述取代为非半胱氨酸取代。


7.根据权利要求6所述的核酸，其中：
所述第一个取代为天冬氨酸取代，或者是保守的天冬氨酸取代，
所述第二个取代为丝氨酸取代，或者是保守的丝氨酸取代，并且
所述第三个取代为亮氨酸取代，或者是保守的亮氨酸取代。


8.根据权利要求1所述的核酸，包括：
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置431处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第一个取代，所述取代为非亮氨酸取代，
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置524处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第二个取代，所述取代为非半胱氨酸取代，以及
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置528处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第三个取代，所述取代为非半胱氨酸取代。


9.根据权利要求8所述的核酸，其中：
所述第一个取代为蛋氨酸取代，或者是保守的蛋氨酸取代，
所述第二个取代为丝氨酸取代，或者是保守的丝氨酸取代，并且
所述第三个取代为亮氨酸取代，或者是保守的亮氨酸取代。


10.根据权利要求1所述的核酸，包括：
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置382处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第一个取代，所述取代为非天冬酰胺取代，
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置384处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第二个取代，所述取代为非亮氨酸取代，
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置524处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第三个取代，所述取代为非半胱氨酸取代，以及
位于与A/HongKong/4801/14血凝素的位置528处的氨基酸对应的所述氨基酸处的第四个取代，所述取代为非半胱氨酸取代。


11.根据权利要求10所述的核酸，其中：
所述第一个取代为丙氨酸取代，或者是保守的丙氨酸取代，
所述第二个取代为缬氨酸取代，或者是保守的缬氨酸取代，
所述第三个取代为丝氨酸取代，或者是保守的丝氨酸取代，并且
所述第四个取代为亮氨酸取代，或者是保守的亮氨酸取代。


12.根据权利要求1至11中任一项所述的核酸，所述血凝素蛋白还包括位于与A/HongKong/4801/14HA的位置525或526或位置525及526处的氨基酸对应的氨基酸处的取代，其中位置525处的氨基酸的所述取代为非苯丙氨酸取代，并且位置526处的氨基酸的所述取代为非亮氨酸取代。


13.根据权利要求12所述的核酸，其中位置525处的氨基酸的所述取代为亮氨酸取代，或者是保守的亮氨酸取代，并且位置526处的氨基酸的所述取代为缬氨酸取代，或者是保守的缬...

【专利技术属性】
技术研发人员：皮尔奥利弗·拉沃伊，奥雷连·洛瑞，阿兰·道赛特，马克安德鲁·德奥斯特，玛南·科沃托，
申请(专利权)人：麦迪卡格公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA