免疫球蛋白结合蛋白质以及使用其的亲和载体制造技术

本发明专利技术提供耐碱性提升的亲和载体。一种亲和载体，其包含：含有变异多肽链的免疫球蛋白结合蛋白质，和键合该免疫球蛋白结合蛋白质的固相载体。该变异多肽链是由与序列号1～6和57～62中的任一个所示的氨基酸序列具有至少85％同源性且具有规定的变异的氨基酸序列构成，具有免疫球蛋白结合活性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫球蛋白结合蛋白质以及使用其的亲和载体
本专利技术涉及免疫球蛋白结合蛋白质、使用其的亲和载体、以及使用该亲和载体的抗体的分离方法。
技术介绍
抗体在近年来已被广泛用于研究用试剂、抗体医药等。这些试剂或医药用的抗体一般是经过亲和色谱的精制而制造。在抗体的亲和精制中，使用了将属于与免疫球蛋白进行特异性结合的物质的配体加以固定化而成的色谱柱，在该配体中，一般使用蛋白A等免疫球蛋白结合蛋白质。蛋白A为来自革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的细胞壁蛋白质。蛋白A具有被称为E结构域、D结构域、A结构域、B结构域以及C结构域的5个免疫球蛋白结合结构域，各结构域可单独键合于免疫球蛋白。连同蛋白A的天然型免疫球蛋白结合结构域，对这些施加蛋白质工程学改造而得的改造免疫球蛋白结合结构域也同样已被用作亲和精制用的配体。抗体的亲和精制用色谱柱通常是以碱性溶液清洗并重复使用。但是，由于蛋白A的天然型免疫球蛋白结合结构域耐碱性较低，因而将该天然型结构域加以固定化而得的亲和精制用色谱柱在重复使用期间，抗体结合性会大幅降低本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫球蛋白结合蛋白质，其包含多肽链，该多肽链是由与序列号1～6和57～62中的任一氨基酸序列具有至少85％同源性且具有选自以下(a)～(f)中的至少1种变异的氨基酸序列构成：/n(a)选自相当于序列号3的氨基酸序列的3位、6位、11位的位置中的至少一个位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基；/n(b)选自相当于序列号3的氨基酸序列的24位和25位的位置中的至少一个位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基；/n(c)相当于序列号3的氨基酸序列的39位的位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180824 JP 2018-157620;20190408 JP 2019-0735291.一种免疫球蛋白结合蛋白质，其包含多肽链，该多肽链是由与序列号1～6和57～62中的任一氨基酸序列具有至少85％同源性且具有选自以下(a)～(f)中的至少1种变异的氨基酸序列构成：
(a)选自相当于序列号3的氨基酸序列的3位、6位、11位的位置中的至少一个位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基；
(b)选自相当于序列号3的氨基酸序列的24位和25位的位置中的至少一个位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基；
(c)相当于序列号3的氨基酸序列的39位的位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基；
(d)相当于序列号3的氨基酸序列的46位的位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基；
(e)选自相当于序列号3的氨基酸序列的4位、49位和58位的位置中的至少一个位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基；以及
(f)相当于序列号3的氨基酸序列的23位的位置的氨基酸残基替换为其它氨基酸残基或缺失、或在该位置之前或之后的位置插入其它氨基酸残基。


2.如权利要求1所述的免疫球蛋白结合蛋白质，其中，所述多肽链是由与序列号3的氨基酸序列具有至少85％同源性且具有选自所述(a)～(f)中的至少1种变异的氨基酸序列构成的多肽链。


3.如权利要求1或2所述的免疫球蛋白结合蛋白质，其中，选自所述(a)～(f)中的至少1种变异是选自下列变异中的至少1种变异：
(a1)在相当于序列号3的氨基酸序列的3位的位置由Asn替换为Gln；
(a2)在相当于序列号3的氨基酸序列的3位的位置由Asn替换为Ala；
(a3)在相当于序列号3的氨基酸序列的3位的位置由Asn替换为Asp；
(a4)在相当于序列号3的氨基酸序列的6位的位置由Asn替换为Gln；
(a5)在相当于序列号3的氨基酸序列的6位的位置由Asn替换为Ala；
(a6)在相当于序列号3的氨基酸序列的6位的位置由Asn替换为Asp；
(a7)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Gln；
(a8)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Ala；
(a9)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Arg；
(a10)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Asp；
(a11)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Cys；
(a12)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Glu；
(a13)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为His；
(a14)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Ile；
(a15)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Leu；
(a16)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Lys；
(a17)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Met；
(a18)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Phe；
(a19)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Thr；
(a20)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Trp；
(a21)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Tyr；
(a22)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Val；
(b1)在相当于序列号3的氨基酸序列的24位的位置由Glu替换为Asp；
(b2)在相当于序列号3的氨基酸序列的25位的位置由Glu替换为Asp；
(c1)在相当于序列号3的氨基酸序列的39位的位置由Ser替换为Lys；
(c2)在相当于序列号3的氨基酸序列的39位的位置由Ser替换为Arg；
(d1)在相当于序列号3的氨基酸序列的46位的位置由Ala替换为Asp；
(d2)在相当于序列号3的氨基酸序列的46位的位置由Ala替换为Glu；
(d3)在相当于序列号3的氨基酸序列的46位的位置由Ala替换为Lys；
(d4)在相当于序列号3的氨基酸序列的46位的位置由Ala替换为Arg；
(e1)在相当于序列号3的氨基酸序列的4位的位置Lys缺失；
(e2)在相当于序列号3的氨基酸序列的49位的位置由Lys替换为Arg；
(e3)在相当于序列号3的氨基酸序列的58位的位置Lys缺失；
(e4)在相当于序列号3的氨基酸序列的58位的位置由Lys替换为Arg；
(f1)在相当于序列号3的氨基酸序列的23位的位置由Thr替换为Arg；
(f2)在相当于序列号3的氨基酸序列的23位的位置由Thr替换为Leu；以及
(f3)在相当于序列号3的氨基酸序列的23位的位置由Thr替换为Ser。


4.如权利要求3所述的免疫球蛋白结合蛋白质，其中，选自所述(a)～(f)中的至少1种变异是下列变异中的任1种：
(a1)在相当于序列号3的氨基酸序列的3位的位置由Asn替换为Gln；
(a2)在相当于序列号3的氨基酸序列的3位的位置由Asn替换为Ala；
(a3)在相当于序列号3的氨基酸序列的3位的位置由Asn替换为Asp；
(a4)在相当于序列号3的氨基酸序列的6位的位置由Asn替换为Gln；
(a5)在相当于序列号3的氨基酸序列的6位的位置由Asn替换为Ala；
(a6)在相当于序列号3的氨基酸序列的6位的位置由Asn替换为Asp；
(a7)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Gln；
(a8)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Ala；
(a9)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Arg；
(a10)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Asp；
(a11)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Cys；
(a12)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Glu；
(a13)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为His；
(a14)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Ile；
(a15)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的位置由Asn替换为Leu；
(a16)在相当于序列号3的氨基酸序列的11位的...

【专利技术属性】
技术研发人员：芳贺智亮，市居敬，小野木俊介，中村聪，本田俊成，上出伦敬，
申请(专利权)人：JSR株式会社，JSR微有限公司，JSR微公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP