磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体，杂交瘤细胞株和应用制造技术

本发明专利技术公开了一株由全基因合成的方法获得GPC3全长蛋白抗原免疫产生，可特异性地与磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)结合的单克隆抗体，产生单克隆抗体的杂交瘤细胞株和应用。本发明专利技术公开的单克隆抗体特异性高，灵敏度高，可检测到微量表达的GPC3蛋白，可以作为肝癌患者临床早期诊断的参考指标，可大量应用于临床检测和治疗。

【技术实现步骤摘要】
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体，杂交瘤细胞株和应用
：本专利技术属于杂交瘤细胞株领域，具体地说涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)单克隆抗体，杂交瘤细胞株制备和单克隆抗体的应用。
技术介绍
：原发性肝癌(HCC)是全球常见恶性肿瘤之一，全世界每年超过78万人死于HCC，每年新发病例84万，我国HCC的发病率和病死率占全球的55％以上，且呈逐年上升趋势。对于早期的HCC患者，主要采用早期肝切除术，这是目前HCC治疗最有效的根治性手段。然而HCC起病隐匿，进展较快，很多患者在发现肿瘤时已经处于中晚期，丧失手术切除机会，而放射治疗、局部消融治疗、肝动脉化疗栓塞等治疗方法疗效有限，因此早期诊断和早期治疗是提高HCC患者生存率的关键。甲胎蛋白(AFP)是目前临床常用的肝癌特异性肿瘤标记物，然而，由于其灵敏度(39-64％)与特异性(76-91％)均有限，在部分慢性肝病和肝硬化患者，血清AFP水平也会升高，肝损伤和肝脏再生也能够增加非HCC患者血清AFP水平；近年来，异常凝血酶原(DCP，也称PIVKA-II)已被国内外指南列为肝癌检测极其重要的指标，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株由核苷酸序列为SEQ SEQ ID NO:1表达的重组GPC3蛋白免疫产生的小鼠杂交瘤细胞株GPC3-T，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C2020109。/n

【技术特征摘要】
1.一株由核苷酸序列为SEQSEQIDNO:1表达的重组GPC3蛋白免疫产生的小鼠杂交瘤细胞株GPC3-T，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO:C2020109。


2.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株是抗GPC3蛋白的杂交瘤细胞株，所述GPC3蛋白为真核生物表达的重组GPC3蛋白，由核苷酸序列为SEQIDNO:1表达产生的。


3.一种抗GPC3的单克隆抗体，其特征在于由权利要求1所述的杂交瘤细胞分泌所得，属于IgG亚型,能特异性地识别GPC3蛋白，并与GPC3阳性肝癌细胞系具有强反应性。


4.权利要求3所述的抗GPC3的单克隆抗体，其特征在于，该抗体是鼠源抗体，重链可变区的CDR1具有SEQIDNO:46所示的氨基酸序列，CDR2具有SEQIDNO:47所示的氨基酸序列，CDR3具有SEQIDNO:48所示的氨基酸序列；轻链可变区CDR1具有SEQIDNO:53所示的氨基酸序列，CDR2具有SEQIDNO:54所示的氨基酸序列，CDR3具有SEQIDNO:55所示的氨基酸序列。


5.权利要求3所述的抗GPC3的单克隆抗体在制备诊断或治疗肿瘤的药物制剂中的应用。
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【专利技术属性】
技术研发人员：孟忠吉，贺昱霖，曾少波，
申请(专利权)人：十堰市太和医院湖北医药学院附属医院，
类型：发明
国别省市：湖北;42