一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备制造技术

本实用新型专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备，其包括萃取单元、亲和柱层析单元、旋转蒸发单元、硅胶柱层析单元、中性氧化铝柱层析单元和试液供应单元；所述的萃取单元与亲和柱层析单元连接，所述的亲和柱层析单元与旋转蒸发单元连接，所述的旋转蒸发单元与硅胶柱层析单元连接，所述的硅胶柱层析单元与中性氧化铝柱层析单元连接。本实用新型专利技术提供的一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备采用亲和色谱和固相色谱结合，有效去除了有毒藻色素、有效的将腹泻性贝类毒素三种产物有效分离，具有生产工艺流程简单、收益好、效益高、成本低、提取率高等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备
本技术属于生物
，具体涉及一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备。
技术介绍
腹泻性贝类毒素(DiarrheticShellfishPoisoning，DSP)是由有毒赤潮藻类鳍藻属和原甲藻属的一些种类产生的脂溶性多环醚类生物活性物质，其化学结构特征是聚醚或大环内酯化合物。腹泻性贝毒可在贝等滤食性动物体内富集，危害食用者健康。腹泻性贝毒在全球沿岸海域均有分布，是世界范围内具有最严重威胁的赤潮藻毒素之一。腹泻性贝毒中毒症状主要有腹泻、呕吐、恶心、腹痛和头疼。DSP不是一种可致命的毒素，通常只引起轻微的胃肠疾病，而症状也会很快消灭，没有强烈的急性毒性，但大田软海绵酸(Okadaicacid，OA)是强烈的致癌因子。1989年，Norte等人从利玛原甲藻(Prorocentrumlima)中分离出2种大田软海绵酸的二醇酯衍生物(OA-1、OA-2)，之后又从利玛原甲藻和P.maculosum藻株中分离到4种新的二醇酯化合物(OA-3、OA-4、OA-5、OA-6)。2010年，冯振洲等以室内培养的利玛原甲藻(Prorocentrumlima(Ehrenberg)Dodge)细胞作为DSP毒素来源，应用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)作为DSP毒素的分析方法，通过氯仿萃取、C18固相萃取柱和C18制备色谱柱对利玛原甲藻产生的大田软海绵酸和鳍藻毒素-1(Dinophysistoxin-1，DTX-1)进行了分离纯化，建立了OA与DTX-1的制备方法，并制备得到高纯度的OA0.6mg、DTX-11.3mg，为国内首次制备得到mg级DSP毒素。2019年，金薇等采用大孔吸附树脂HP20对利玛原甲藻藻细胞进行初步纯化，经制备型高效液相色谱分离法分离制备了OA和DTX-1。近年来，免疫亲和层析技术迅速发展，免疫亲和层析也是色谱技术的一种，可称为免疫色谱技术，是一种利用抗原抗体特异性可逆结合特性的SPE技术，根据抗原抗体的高选择性，从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将抗体与惰性微珠共价结合，然后装柱，将抗原溶液过免疫亲和柱，而非目标化合物则沿柱流下，最后用洗脱缓冲液洗脱抗原，从而得到纯化的抗原，用适当的缓冲液和合适的保存方法，柱可以再生备用。其提纯效率很高，通常只需一次就可达到1000～10000倍的纯化效果。商业化的免疫亲和柱在真菌毒素的净化、富集、检测方面体现出巨大的优势，而在贝类毒素净化、检测中几乎没有应用。尽管国内的研究人员从利玛原甲藻中通过制备型高效液相色谱法提取出纯度较高的腹泻性贝类毒素，但种类较少，仅为OA和DTX-1，其他毒素未提取出来，因纯化设备昂贵，不利于降低商品化腹泻性贝类毒素标准品成本，进而无法解决我国对贝类产品的卫生质量监控和DSP毒素的科学研究工作普遍展开。因此，本技术为了解决上述问题进行了一系列改进。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备，以克服现有技术所存在的上述缺点和不足。本技术的技术方案为：一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备，其包括萃取单元1、亲和柱层析单元2、旋转蒸发单元3、硅胶柱层析单元4、中性氧化铝柱层析单元5和试液供应单元6；所述的萃取单元1与亲和柱层析单元2连接，所述的亲和柱层析单元2与旋转蒸发单元3连接，所述的旋转蒸发单元3与硅胶柱层析单元4连接，所述的硅胶柱层析单元4与中性氧化铝柱层析单元5连接。所述的试液供应单元6包括试剂柜43、多通道蠕动泵44和导管，所述的多通道蠕动泵44具独立加压的7通道，所述的导管包括单独供液的7条导管，各导管一端与试液供应单元6的试剂柜43中的不同试剂瓶相连接，各导管另外一端分别与萃取单元1、亲和柱层析单元2、旋转蒸发单元3、硅胶柱层析单元4、中性氧化铝柱层析单元5相连接。所述的萃取单元1包括高速均质器9，所述的高速均质器9顶部设有进液口7，所述的高速均质器9内部设置有过滤器出口8，过滤器出口8通过亲和柱层析单元连接管11与亲和柱层析单元2的滤液进口14相连接。所述的亲和柱层析单元2包括亲和柱、亲和柱层析单元加压泵10、亲和柱层析单元连接管11、洗涤液进口12、亲和柱层析单元洗脱液进口13、滤液进口14、样本液出口15、废液出口16、亲和柱层析单元收集瓶17和亲和柱层析单元废液瓶18；所述的亲和柱顶部设置洗涤液进口12、亲和柱层析单元洗脱液进口13和滤液进口14，所述的滤液进口14通过亲和柱层析单元连接管11与萃取单元1的过滤器出口8相连接，所述的亲和柱层析单元连接管11上设有亲和柱层析单元加压泵10；所述的洗涤液进口12与试液供应单元6的多通道蠕动泵44通过第二导管46相连接；所述的亲和柱层析单元洗脱液进口13与试液供应单元6的多通道蠕动泵44通过第一导管45相连接；所述的亲和柱底部设有样本液出口15、废液出口16，所述的样本液出口15下方设置有亲和柱层析单元收集瓶17，所述的废液出口16下方设置有亲和柱层析单元废液瓶18。所述的旋转蒸发单元3包括旋转蒸发仪19、截流阀20、加压泵21和旋转蒸发单元连接管22，所述的旋转蒸发单元连接管22的一端与亲和柱层析单元收集瓶17相连接，另一端与旋转蒸发仪19相连接，旋转蒸发单元连接管22上设有旋转蒸发单元加压泵21和截流阀20，所述的转蒸发仪19通过第三导管47与试液供应单元6的多通道蠕动泵44连接。所述的硅胶柱层析单元4包括硅胶柱23、硅胶柱层析单元洗脱液进口24、溶剂进口25、加液进口26、第一溶液出口27、第二溶液出口28、第一硅胶柱层析单元收集瓶31和第二硅胶柱层析单元收集瓶32。所述的硅胶柱23顶部设置硅胶柱层析单元洗脱液进口24、溶剂进口25和加液进口26，所述的加液进口26通过硅胶柱层析单元连接管30与旋转蒸发仪19出液口相连接，所述的硅胶柱层析单元连接管30上设有硅胶柱层析单元加压泵29，所述的溶剂进口25通过第四导管48与试液供应单元6的多通道蠕动泵44相连接，所述的溶液进口24与试液供应单元6的多通道蠕动泵44通过第五导管49相连接，所述的硅胶柱23的底部设有第一溶液出口27和第二溶液出口28，所述的第一溶液出口27下方设置第二硅胶柱层析单元收集瓶32，所述的第二溶液出口28下方设置第一硅胶柱层析单元收集瓶31。所述的中性氧化铝柱单元5包括中性氧化铝柱33、加液口34、溶剂口35、洗脱溶剂口36、第一收集口37、第二收集口38、第一中性氧化铝柱单元收集瓶39、第二中性氧化铝柱单元收集瓶40、中性氧化铝柱单元加压泵41和中性氧化铝柱单元连接管42，所述的中性氧化铝柱33的顶部设有加液口34、溶剂口35、洗脱溶剂口36，所述的加液口34通过中性氧化铝柱单元连接管42与硅胶柱层析单元4的第一硅胶柱层析单元收集瓶31相连接，所述的中性氧化铝柱单元连接管42上设有中性氧化铝柱单元加压泵41，所述的溶剂口35通过第七导管51与试液供应单元6的多通道蠕动泵44相连接，所述的洗脱溶剂口36通过第六导管50与试液供应单元6的多通道蠕动泵44相连接，所述的中性氧化铝柱33底本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备，其特征在于，其包括萃取单元（1）、亲和柱层析单元（2）、旋转蒸发单元（3）、硅胶柱层析单元（4）、中性氧化铝柱层析单元（5）和试液供应单元（6）；所述的萃取单元（1）与亲和柱层析单元（2）连接，所述的亲和柱层析单元（2）与旋转蒸发单元（3）连接，所述的旋转蒸发单元（3）与硅胶柱层析单元（4）连接，所述的硅胶柱层析单元（4）与中性氧化铝柱层析单元（5）连接；/n所述的试液供应单元（6）包括试剂柜（43）、多通道蠕动泵（44）和导管，所述的多通道蠕动泵（44）具独立加压的7通道，所述的导管包括单独供液的7条导管，各导管一端与试液供应单元（6）的试剂柜（43）中的不同试剂瓶相连接，各导管另外一端分别与萃取单元（1）、亲和柱层析单元（2）、旋转蒸发单元（3）、硅胶柱层析单元（4）、中性氧化铝柱层析单元（5）相连接；/n所述的萃取单元（1）包括高速均质器（9），所述的高速均质器（9）顶部设有进液口（7），所述的高速均质器（9）内部设置有过滤器出口（8），过滤器出口（8）通过亲和柱层析单元连接管（11）与亲和柱层析单元（2）的滤液进口（14）相连接；/n所述的亲和柱层析单元（2）包括亲和柱、亲和柱层析单元加压泵（10）、亲和柱层析单元连接管（11）、洗涤液进口（12）、亲和柱层析单元洗脱液进口（13）、滤液进口（14）、样本液出口（15）、废液出口（16）、亲和柱层析单元收集瓶（17）和亲和柱层析单元废液瓶（18）；所述的亲和柱顶部设置洗涤液进口（12）、亲和柱层析单元洗脱液进口（13）和滤液进口（14），所述的滤液进口（14）通过亲和柱层析单元连接管（11）与萃取单元（1）的过滤器出口（8）相连接，所述的亲和柱层析单元连接管（11）上设有亲和柱层析单元加压泵（10）；所述的洗涤液进口（12）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）通过第二导管（46）相连接；所述的亲和柱层析单元洗脱液进口（13）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）通过第一导管（45）相连接；所述的亲和柱底部设有样本液出口（15）、废液出口（16），所述的样本液出口（15）下方设置有亲和柱层析单元收集瓶（17），所述的废液出口（16）下方设置有亲和柱层析单元废液瓶（18）；/n所述的旋转蒸发单元（3）包括旋转蒸发仪（19）、截流阀（20）、加压泵（21）和旋转蒸发单元连接管（22），所述的旋转蒸发单元连接管（22）的一端与亲和柱层析单元收集瓶（17）相连接，另一端与旋转蒸发仪（19）相连接，旋转蒸发单元连接管（22）上设有旋转蒸发单元加压泵（21）和截流阀（20），所述的转蒸发仪（19）通过第三导管（47）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）连接；/n所述的硅胶柱层析单元（4）包括硅胶柱（23）、硅胶柱层析单元洗脱液进口（24）、溶剂进口（25）、加液进口（26）、第一溶液出口（27）、第二溶液出口（28）、第一硅胶柱层析单元收集瓶（31）和第二硅胶柱层析单元收集瓶（32）；所述的硅胶柱（23）顶部设置硅胶柱层析单元洗脱液进口（24）、溶剂进口（25）和加液进口（26），所述的加液进口（26）通过硅胶柱层析单元连接管（30）与旋转蒸发仪（19）出液口相连接，所述的硅胶柱层析单元连接管（30）上设有硅胶柱层析单元加压泵（29），所述的溶剂进口（25）通过第四导管（48）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）相连接，所述硅胶柱层析单元洗脱液进口（24）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）通过第五导管（49）相连接，所述的硅胶柱（23）的底部设有第一溶液出口（27）和第二溶液出口（28），所述的第一溶液出口（27）下方设置第二硅胶柱层析单元收集瓶（32），所述的第二溶液出口（28）下方设置第一硅胶柱层析单元收集瓶（31）；/n所述的中性氧化铝柱层析单元（5）包括中性氧化铝柱（33）、加液口（34）、溶剂口（35）、洗脱溶剂口（36）、第一收集口（37）、第二收集口（38）、第一中性氧化铝柱单元收集瓶（39）、第二中性氧化铝柱单元收集瓶（40）、中性氧化铝柱单元加压泵（41）和中性氧化铝柱单元连接管（42），所述的中性氧化铝柱（33）的顶部设有加液口（34）、溶剂口（35）、洗脱溶剂口（36），所述的加液口（34）通过中性氧化铝柱单元连接管（42）与硅胶柱层析单元（4）的第一硅胶柱层析单元收集瓶（31）相连接，所述的中性氧化铝柱单元连接管（42）上设有中性氧化铝柱单元加压泵（41），所述的溶剂口（35）通过第七导管（51）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）相连接，所述的洗脱溶剂口（36）通过第六导管（50）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）相连接，所述的中性氧化铝柱（33）底部设有第一收集口（37）和第二...

【技术特征摘要】
1.一种腹泻性贝类毒素分离纯化设备，其特征在于，其包括萃取单元（1）、亲和柱层析单元（2）、旋转蒸发单元（3）、硅胶柱层析单元（4）、中性氧化铝柱层析单元（5）和试液供应单元（6）；所述的萃取单元（1）与亲和柱层析单元（2）连接，所述的亲和柱层析单元（2）与旋转蒸发单元（3）连接，所述的旋转蒸发单元（3）与硅胶柱层析单元（4）连接，所述的硅胶柱层析单元（4）与中性氧化铝柱层析单元（5）连接；
所述的试液供应单元（6）包括试剂柜（43）、多通道蠕动泵（44）和导管，所述的多通道蠕动泵（44）具独立加压的7通道，所述的导管包括单独供液的7条导管，各导管一端与试液供应单元（6）的试剂柜（43）中的不同试剂瓶相连接，各导管另外一端分别与萃取单元（1）、亲和柱层析单元（2）、旋转蒸发单元（3）、硅胶柱层析单元（4）、中性氧化铝柱层析单元（5）相连接；
所述的萃取单元（1）包括高速均质器（9），所述的高速均质器（9）顶部设有进液口（7），所述的高速均质器（9）内部设置有过滤器出口（8），过滤器出口（8）通过亲和柱层析单元连接管（11）与亲和柱层析单元（2）的滤液进口（14）相连接；
所述的亲和柱层析单元（2）包括亲和柱、亲和柱层析单元加压泵（10）、亲和柱层析单元连接管（11）、洗涤液进口（12）、亲和柱层析单元洗脱液进口（13）、滤液进口（14）、样本液出口（15）、废液出口（16）、亲和柱层析单元收集瓶（17）和亲和柱层析单元废液瓶（18）；所述的亲和柱顶部设置洗涤液进口（12）、亲和柱层析单元洗脱液进口（13）和滤液进口（14），所述的滤液进口（14）通过亲和柱层析单元连接管（11）与萃取单元（1）的过滤器出口（8）相连接，所述的亲和柱层析单元连接管（11）上设有亲和柱层析单元加压泵（10）；所述的洗涤液进口（12）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）通过第二导管（46）相连接；所述的亲和柱层析单元洗脱液进口（13）与试液供应单元（6）的多通道蠕动泵（44）通过第一导管（45）相连接；所述的亲和柱底部设有样本液出口（15）、废液出口（16），所述的样本液出口（15）下方设置有亲和柱层析单元收集瓶（17），所述的废液出口（16）下方设置有亲和柱层析单元废液瓶（18）；
所述的旋转蒸发单元（3）包括旋转蒸发仪（19）、截流阀（20）、加压泵（21）和旋转蒸发单元连接管（22），所述的旋转蒸发单元连接管（22）的一端与亲和柱层析单元收...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈冰君，王睿睿，赵莹莹，齐红莉，张健新，王莲，
申请(专利权)人：大连精检生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：辽宁;21