一种引物组合物、测序试剂盒及检测方法技术

本方案公开了一种引物组合物，该组合物包括如A)，B)和C)所示的引物组合物中的一组或几组引物组合物：A)第一组引物组合物，包括多个用于检测引起呼吸道感染的病毒病原体的引物对；B)第二组引物组合物，包括多个用于检测引起呼吸道感染的细菌病原体的引物对；C)16S引物对，用于与所述第一组引物组合物和/或第二组引物组合物同时检测引起呼吸道感染的病原体。该试剂盒基于三代高通量测序技术，可以检测30余种呼吸道病原体，可以简化呼吸道感染病原体的筛查过程，提高对病原体的快速精准判断。

【技术实现步骤摘要】
一种引物组合物、测序试剂盒及检测方法
本专利技术涉及生物检测
，特别涉及一种引物组合物、测序试剂盒及检测方法。
技术介绍
呼吸道感染是临床上较为常见的感染性疾病，尤其是在婴幼儿、老人及免疫缺陷病人中，常常导致严重的症状甚至死亡。常见的呼吸道感染病原体包括病毒、细菌、支原体、衣原体等微生物。而这些微生物在自然界中可以寄生在动植物和人身上，对人类的健康造成威胁。病毒性病原体主要包含有甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、偏肺病毒、腺病毒等。细菌性病原体有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等。大多数呼吸道感染具有相似的临床症状，很难通过临床症状快速准确的判断病原体，快速准确鉴定呼吸道感染的病原体对于针对性用药具有重要意义。传统的呼吸道病原体检测技术主要包括细菌和病毒培养、抗原抗体反应、免疫荧光、普通PCR等检测技术手段，这些技术都存在一定缺陷：细菌培养周期较长，要求较高，不能满足短时间快速检测的要求；抗原抗体反应灵敏度和特异度较低，容易出现假阳性；普通凝胶电泳的灵敏度低，有时条带模糊，判断不够准确，极易造成误诊。...

【技术保护点】
1.一种引物组合物，其特征在于，该组合物包括如A)，B)和C)所示的引物组合物中的一组或几组引物组合物：/nA)第一组引物组合物，包括多个用于检测引起呼吸道感染的病毒病原体的引物对；/nB)第二组引物组合物，包括多个用于检测引起呼吸道感染的细菌病原体的引物对；/nC)16S引物对，用于与所述第一组引物组合物和/或第二组引物组合物同时检测引起呼吸道感染的病原体；/n其中，所述第一组引物组合物包括18对引物中的一对或多对，所述18对引物分别具有如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.18所示的上游引物序列和如SEQ ID NO.19至SEQ ID NO.36所示的下游引物序列；/n所述第二组...

【技术特征摘要】
1.一种引物组合物，其特征在于，该组合物包括如A)，B)和C)所示的引物组合物中的一组或几组引物组合物：
A)第一组引物组合物，包括多个用于检测引起呼吸道感染的病毒病原体的引物对；
B)第二组引物组合物，包括多个用于检测引起呼吸道感染的细菌病原体的引物对；
C)16S引物对，用于与所述第一组引物组合物和/或第二组引物组合物同时检测引起呼吸道感染的病原体；
其中，所述第一组引物组合物包括18对引物中的一对或多对，所述18对引物分别具有如SEQIDNO.1至SEQIDNO.18所示的上游引物序列和如SEQIDNO.19至SEQIDNO.36所示的下游引物序列；
所述第二组引物组合物包括14对引物中的一对或多对，所述14对引物分别具有如SEQIDNO.37至SEQIDNO.50所示的上游引物序列和如SEQIDNO.51至SEQIDNO.64所示的下游引物序列；
所述16S引物对包含具有如SEQIDNO.65所示的上游引物序列和如SEQIDNO.66所示的下游引物序列。


2.根据权利要求1所述的引物组合物，其特征在于，所述组合物中第一组引物组合物中各引物含量相同。


3.根据权利要求1所述的引物组合物，其特征在于，所述组合物中第二组引物组合物中各引物含量相同。


4.根据权利要求1所述的引物组合物，其特征在于，当所述组合物包含16S引物对和第一组引物组合物和/或第二组引物组合物时，引物组合物中的全部引物对的含量相同。


5.一种测序试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1至4任一项所述的引物组合物。


6.一种检测引起呼吸道感染的病原体的方法，其特征在于，该方法包括：
对采集样本进行灭活，提取病原体DNA/RNA；
使用包含如A)，B)和C)所示的引物组合物中的一组或几组引物组合物进行片段扩增获得PCR反应产物；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张樱，何昆仑，吴婷婷，潘世让，张思文，韩悦，王洋，梁羽，汪德鹏，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第一医学中心，北京希望组生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11