一种细胞苗抗原的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种细胞苗抗原的制备方法，包括健康细胞传代、接毒换液和抗原收获等步骤，本发明专利技术在细胞传代消化时，应用震荡器代替人工甩瓶子，可大大降低劳动强度；换液时，将若干个装有新鲜维持液的玻璃瓶串联在一起，通过蠕动泵将玻璃瓶内的维持液抽入细胞培养瓶内，使得换液过程半自动化，可以减少操作人员数量，降低生产过程的劳动强度，提高生产效率，同时也降低了半成品的污染率；抗原收获时，主要依靠超声波的转化能的方法，破碎细胞培养瓶内的细胞，用此方法刮苗，避免传统方法刮苗的缺点，也节省细胞冻融的步骤，使收获过程一步到位，达到简便、安全、节省人力、缩短抗原生产时间的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞苗抗原的制备方法
本专利技术属于生物制品领域，具体涉及一种细胞苗抗原的制备方法。
技术介绍
一般细胞类病毒转瓶培养包含以下几个步骤：健康细胞传代、接毒换液和收获。1、健康细胞传代：当健康转瓶细胞长满单层时，现有的传代过程一般为：打开转瓶瓶口塞子，倒去原有的营养液，加入少量PBS清洗一遍，加入一定量的胰酶消化，然后弃去胰酶待细胞出现针尖白点的起雾状态时加少量营养液，再由一个人抱起转瓶的两端，用力作上下旋转式甩动，利用甩起的液体急速的转动去冲刷细胞使其脱落并分散。这种方法存在以下不足：(1)甩瓶的过程中劳动强度大，费时费力，且效率低，不利于大批量生产。(2)瓶子在甩动的过程中，容易滑脱，造成事故。2、接毒换液：将已消化分装好的细胞悬液移入接种室加入规定量的毒种，置于转瓶机上37℃培养24h后，弃去营养液，再用人工的方法抱起装满新鲜维持液的10升或15升的转瓶(重量约20kg左右)，将新鲜维持液逐瓶倒入细胞瓶内，再放置于转瓶机上37℃继续培养。由于每次倒液的瓶数多，时间长，操作人员的体力劳动量大，且一般需要多名男性操作人员轮流本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞苗抗原的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：/n1）健康细胞传代/n当健康转瓶细胞长满单层时，打开转瓶瓶口的塞子，弃去转瓶中原有的营养液，将转瓶中的待消化细胞用PBS清洗后，加入胰酶消化细胞，然后弃去胰酶，加入营养液，盖上转瓶塞子，开启振荡器，将转瓶置于振荡器的托盘上，用手按压转瓶，通过震荡将转瓶内的液体甩起，从而使转瓶瓶壁细胞脱落，将消化脱落后的细胞悬液分装到N个细胞培养瓶中；/n2）接毒换液：/n将上述装有细胞悬液的细胞培养瓶移入接种室，加入规定量的毒种，置转瓶机上培养24h后，弃去营养液；/n将若干个装有新鲜维持液的玻璃瓶串联在一起，通过蠕动泵将玻璃瓶内的维持液抽入细胞培养...

【技术特征摘要】
1.一种细胞苗抗原的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：
1）健康细胞传代
当健康转瓶细胞长满单层时，打开转瓶瓶口的塞子，弃去转瓶中原有的营养液，将转瓶中的待消化细胞用PBS清洗后，加入胰酶消化细胞，然后弃去胰酶，加入营养液，盖上转瓶塞子，开启振荡器，将转瓶置于振荡器的托盘上，用手按压转瓶，通过震荡将转瓶内的液体甩起，从而使转瓶瓶壁细胞脱落，将消化脱落后的细胞悬液分装到N个细胞培养瓶中；
2）接毒换液：
将上述装有细胞悬液的细胞培养瓶移入接种室，加入规定量的毒种，置转瓶机上培养24h后，弃去营养液；
将若干个装有新鲜维持液的玻璃瓶串联在一起，通过蠕动泵将玻璃瓶内的维持液抽入细胞培养瓶内，加入足量的维持液后更换细胞培养瓶，直至N个细胞培养瓶内均加入足量的维持液，然后将N个细胞培养瓶置于转瓶机上继续培养；
3）抗原收获
待细胞培养至规定时间时或病变程度达到要求时，将细胞培养瓶移入操作间，采...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴金妃，陈淑亚，蔡艳红，郑敬敏，张小兰，黄世潇，叶志海，
申请(专利权)人：兆丰华生物科技南京有限公司，兆丰华生物科技福州有限公司，北京科牧丰生物制药有限公司，兆丰华生物科技南京有限公司北京生物医药科技中心，
类型：发明
国别省市：江苏;32