一种西黄丸溶出度的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种西黄丸溶出度的检测方法。该检测方法，包括溶出介质的配制、对照品溶液的制备、供试品溶液的制备及制备过程参数的确定、制定色谱条件、供试品溶液含量的测定等步骤，因胆红素与临床疗效确切相关，故选择胆红素为评价指标进行西黄丸的溶出度研究，能客观、真实地反应制剂的质量和溶出行为，并为其临床应用提供科学数据。本发明专利技术通过西黄丸的溶解特性，确定适宜的溶出方法、转速、体积比等，并进行了方法学验证，其精密度高、重现性好、稳定性好、回收率高，且本发明专利技术通过体外试验推测西黄丸在体内的溶出部位和时间也可为进一步研究西黄丸的药理试验提供理论依据。

【技术实现步骤摘要】
一种西黄丸溶出度的检测方法
本专利技术涉及医药领域，一种西黄丸溶出度的检测方法。
技术介绍
西黄丸，又名犀黄丸，出自于清•王洪绪所著《外科证治全生集•卷四》，由麝香、牛黄、醋制乳香、醋制没药4味中药粉碎，辅以黏米饭制成的糊丸，具有清热解毒、和营消肿、活血化瘀功效。用于痈疽、疔毒、瘰疠、流注、癌肿等。为治疗“乳岩”、“瘰疠”、“痰核”、“肺痈”之名方。西黄丸目前执行《中国药典》2015版，检测内容主要包括性状、鉴别、溶散时限和含量测定等。为了更好的评价西黄丸质量，体外模拟药物在人体中的溶出情况，亟需建立西黄丸的溶出度测定方法，为西黄丸的质量控制提供数据支持和理论依据。
技术实现思路
本专利技术提供了一种可以体外模拟西黄丸在人体内溶出情况的检测方法，解决的了现有技术存在的问题。本专利技术为解决上述技术问题所采用的技术方案是：一种西黄丸溶出度的检测方法，一种西黄丸溶出度的检测方法，其特征在于包括如下步骤：（1）溶出介质的配制:pH1.2模拟人工胃液，取稀盐酸16.4ml，加水约800ml，搅拌后加水定容至1000ml即可；（2）对照品溶液取胆红素对照品约10mg精密称定，置于50ml量瓶中，加二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀即得；（3）用小杯法或桨法，取西黄丸0.6-6g，置于溶出仪中，转速为75-125r/min，加入100mlPH1.2盐酸溶液，即药物与溶剂体积为0.6-6g/100ml,再加入0.1-1ml吐温-80，即溶剂体积的0.1%-1%，于180min取样5ml，采用0.45um微孔滤膜过滤，同时补充等温同体积的溶出介质；（4）步骤（3）所用的测定装置的为小杯法、桨法，优选为小杯法；（5）步骤（3）药物与溶剂体积为0.6-6g/100ml,优选为3g/100ml；（6）步骤（3）溶出的转速为75-125r/min，优选为100r/min；（7）步骤（3）溶出介质中加入0.1-1%的吐温-80，优选为1%；（8）步骤（3）溶出时间为5、15、30、45、60、90、120、180、240min，优选为180min达到溶出最大量；（9）制定色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1%醋酸水（95:5）为流动相；进样量5-20μL；柱温25-30℃；流速0.8-1.2mL/min；检测波长为450nm。理论板数按胆红素峰计算应不低于3000；（10）步骤（9）所述的进样量为5-20μL，优选为20μL；（11）步骤（9）所述的柱温为25-30℃，优选为25℃；（12）步骤（9）所述的流速为0.8-1.2mL/min，优选为1mL/min。本专利技术采用上述方法，通过体外模拟实验可预测西黄丸在体内的生物利用度，体外溶出度与体内生物利用度呈现正相关性，溶出度高有利于人体对药物的充分吸收。胆红素是西黄丸方中牛黄的主要有效成分，且与其临床疗效确切相关。本研究选择胆红素为评价指标进行西黄丸的溶出度研究，能客观、真实地反应制剂的质量和溶出行为，并为其临床应用提供科学数据。并且通过体外试验推测西黄丸在体内的溶出部位和时间也可为进一步研究西黄丸的药理试验提供理论依据。附图说明图1胆红素线型图；图2西黄丸专属性高效液相色谱图；图3为桨法制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图4为样品0.6g制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图5为样品3g制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图6为样品6g制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图7为转速75r/min制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图8为转速100r/min制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图9为转速125r/min制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图10为0.5ml吐温-80制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图11为1ml吐温-80制得供试品的胆红素HPLC色谱图；图12为西黄丸在模拟人工胃液中各时间点的溶出曲线图（以HPLC测定的胆红素为评价指标）；图13为样品进样量5ul的胆红素HPLC色谱图；图14为样品进样量10ul的胆红素HPLC色谱图；图15为样品进样量20ul的胆红素HPLC色谱图；图16为流速0.8mL/min的胆红素HPLC色谱图；图17为流速1mL/min的胆红素HPLC色谱图；图18为流速1.2mL/min的胆红素HPLC色谱图;图19为表1胆红素的精密度、重复性和稳定性；图20为表2胆红素的加样回收率；图21为表3十批样品溶出度数据。具体实施方式实施案例一为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，并结合其附图，对本专利技术进行详细阐述。仪器与试剂：对照品：胆红素（批号：100077-201808，纯度98.9%），购自中国食品药品检定研究院；试剂：乙腈为色谱纯均购自OMNI，醋酸为分析纯购自天津科密欧化学试剂有限公司，盐酸购自莱阳经济开发区精细化工厂、二氯甲烷和吐温-80购自天津市富宇精细化工有限公司，水为超纯水；供试品：16份西黄丸样品；仪器：Agilent1260高效液相系统。方法与结果：2.1对照品溶液的制备：取胆红素对照品约10mg精密称定，置于50ml量瓶中，加二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀即得。供试品溶液的制备：采用小杯法，取本品3g，置于溶出仪中，转速为100r/min，加入100mlPH1.2盐酸溶液和1ml吐温-80，于180分钟取样5ml，采用0.45um微孔滤膜过滤，即得。制定色谱条件：色谱柱：AgilentZORBAXSBC18(250mm×4.6mm,5μm)；流动相：乙腈-1%醋酸水（95:5）为流动相；进样量20μL，柱温25℃，流速1.0mL/min，检测波长为450nm。对照品的线性范围考察：精密称定胆红素适量，加入二氯甲烷配制成母液，分别精密稀释成每1ml含胆红素0.626、1.252、2.53、5.06、10.12ug/ml的5种溶液，依照2.3色谱条件进行测定，以浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程y=41.994x-2.6275（R2=0.9994）。表明胆红素在0.0626-10.012ug/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系，见图1。专属性考察：阴性样的制备：将人工麝香研细过100目筛，另取黄米适量蒸熟烘干，与醋乳香、醋没药粉碎成细粉过80目筛，再与人工麝香粉末配研，过筛，混匀，起胎，泛丸，阴干，即得，按照2.2制成供试品溶液。取2.2项下的供试品溶液、胆红素对照品溶液、空白溶液和阴性样溶液各适量，按照2.3色谱条件项下方法进行检测，记录色谱图，见图2。结果显示在该色谱条件下，样品只有一个峰与对照品峰保留时间对应，而阴性样在胆红素对照品吸收峰相应的保留时间本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种西黄丸溶出度的检测方法，其特征在于包括如下步骤：/n（1）采用小杯法或桨法，取西黄丸0.6-6g，置于溶出仪中，转速为75-125r/min，加入100ml PH1.2盐酸溶液，即药物与溶剂体积为0.6-6g/100ml,再加入0.1-1ml吐温-80，即溶剂体积的0.1%-1%，于180min取样5ml，采用0.45um微孔滤膜过滤，同时补充等温同体积的溶出介质；/n（2）制定色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1%醋酸水（95:5）为流动相；进样量5-20 μL；柱温25-30 ℃；流速0.8-1.2 mL/min；检测波长为450 nm；理论板数按胆红素峰计算应不低于3000。/n

【技术特征摘要】
1.一种西黄丸溶出度的检测方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）采用小杯法或桨法，取西黄丸0.6-6g，置于溶出仪中，转速为75-125r/min，加入100mlPH1.2盐酸溶液，即药物与溶剂体积为0.6-6g/100ml,再加入0.1-1ml吐温-80，即溶剂体积的0.1%-1%，于180min取样5ml，采用0.45um微孔滤膜过滤，同时补充等温同体积的溶出介质；
（2）制定色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1%醋酸水（95:5）为流动相；进样量5-20μL；柱温25-30℃；流速0.8-1.2mL/min；检测波长为450nm；理论板数按胆红素峰计算应不低于3000。


2.根据权利要求1所述的一种西黄丸溶出度的检测方法，其特征在于：步骤（1）所用的测定装置为为小杯法、桨法，优选为小杯法。


3.根据权利要求1所述的一种西黄丸溶出度的检测方法，其特征在于：步骤（1）药物与溶剂体积为0.6-6g/100ml,优选为3g/100ml。

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【专利技术属性】
技术研发人员：罗毅，刘子夜，曹桂云，秦金淼，孟兆青，
申请(专利权)人：山东宏济堂制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37