一种青龙白虎汤及其质量检测方法技术

本发明专利技术属于中药质量控制技术领域，具体涉及一种青龙白虎汤及其质量检测方法。针对目前缺少对于组方青龙白虎汤的水煎液、饮片、中间体和物质基准进行质量检测的方法的问题，本发明专利技术的技术方案提供一种具有标准化的高效液相色谱指纹图谱的青龙白虎汤,并且提供一种更加准确的青龙白虎汤的质量检测方法。本发明专利技术能够获得青龙白虎汤的标准指纹图谱，能够准确稳定地对青龙白虎汤供试品是否为合格品进行判断，且能够准确测定青龙白虎汤中有效成分的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种青龙白虎汤及其质量检测方法
本专利技术属于中药质量控制
，具体涉及一种青龙白虎汤及其质量检测方法。
技术介绍
青龙白虎汤(QinglongBaihuDecoction)出自清代著名医家王孟英《王氏医案》卷二，青龙白虎汤历史悠久，组方严谨，用药精当，亘古常新，凝聚了我国先民智慧的结晶。此方为药食两用方，高度契合了中医药学自古以来就有的“药食同源”理论精髓。集中体现了中医药的传统特色，并以其“药极简易，性最平和，味不恶劣，易粉易服”的优势应用广泛。方中“青果色青，莱菔色白，合而为剂，可消经络留滞之痰，解膏粱鱼面之毒，喉病之可免”。本方所主之证，为热毒内盛，上灼咽喉，津液损伤所致咽喉肿痛，是治疗呼吸道疾病良好的药方。此外，雾霾引起的咳嗽、咽部不适可用润肺化浊、清热解毒之法，宜服青龙白虎汤。中药指纹图谱是国际公认的控制中药质量的一种研究模式和技术平台，它通过分析中药有效成分和无效成分的种类和含量分布信息，使中药的研究方法和质量分析手段由针对一个或者少数几个活性成分的分析，发展为对整个中药化学指纹图谱的综合分析，具有普适性和经济性。中药指纹图谱反映了中药多成分协同作用、多层次复杂性及整体性。目前，《中国药典》2020年版一部青果项下收载了采用薄层色谱法对其中没食子酸定性的方法，但尚未建立青果的指纹图谱检测方法及定量标准。针对组方青龙白虎汤，方中酚类化合物是此方发挥临床疗效和保健功效的基础，因此，要确保青龙白虎汤的功效，需要对饮片、中间体、物质基准进行整体质量控制，并对没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、表儿茶素、东莨菪内酯、鞣花酸等药效成分进行检测。目前还没有对其水煎液、饮片、中间体和物质基准等进行高效液相色谱指纹图谱及多成分含量测定的相关研究。因而，青龙白虎汤的质量检测尚缺少标准的方法。
技术实现思路
针对目前缺少对于组方青龙白虎汤的水煎液、饮片、中间体和物质基准进行质量检测的方法的问题，本专利技术的目的在于：提供一种具有标准化的高效液相色谱指纹图谱的青龙白虎汤，并且提供一种更加准确的青龙白虎汤的质量检测方法。一种青龙白虎汤，采用高效液相色谱检测，至少具有6个特征峰，相对保留时间为：峰1：0.221±5％；峰4：0.412±5％；峰7：0.739±5％；峰9：1.000±5％；峰12：1.329±5％；峰16：1.643±5％；其色谱条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相采用乙腈为流动相A，0.1～0.5wt.％磷酸溶液为流动相B，洗脱梯度为：0～25min，流动相A体积分数5～12％，流动相B体积分数95～88％；25～50min，流动相A体积分数12～15.4％，流动相B体积分数88～84.6％；50～75min，流动相A体积分数15.4～22.5％，流动相B体积分数84.6～77.5％；检测波长：204nm～314nm，柱温25℃～35℃，流速0.8mL/min～1.0mL/min。优选的，采用高效液相色谱检测，还具有11个特征峰，相对保留时间为：峰2：0.298±5％；峰3：0.382±5％；峰5：0.492±5％；峰6：0.506±5％；峰8：0.931±5％；峰10：1.032±5％；峰11：1.170±5％；峰13：1.470±5％；峰14：1.528±5％；峰15：1.608±5％；峰17：2.003±5％。本专利技术还提供一种检测青龙白虎汤的质量的方法，包括如下步骤：(1)供试品溶液制备：将青龙白虎汤供试品制成水溶液，得到供试品溶液；(2)对照品溶液制备：将青龙白虎汤的有效成分的对照品制成对照品溶液；(3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，检测。优选的，步骤(1)中，所述青龙白虎汤供试品选自青果饮片和莱菔的组合物、青龙白虎汤煎煮液、青龙白虎汤浓缩液或青龙白虎汤的物质基准。优选的，步骤(1)中，青果饮片和莱菔的组合物制成水溶液的方法为将青果饮片和莱菔水煎分别水煎后合并、定容、过滤，既得；青龙白虎汤煎煮液、青龙白虎汤浓缩液或青龙白虎汤的物质基准制成水溶液的方法为定容、过滤，既得。优选的，所述对照品包含没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、表儿茶素、东莨菪内酯和鞣花酸。优选的，所述述色谱柱的理论板数按没食子酸的特征峰计算不低于5000。优选的，用于溶解对照品的溶剂选自水、体积分数50％～100％的甲醇，优选为无水甲醇。优选的，步骤(3)中，所述色谱条件为，检测波长：204nm～314nm，优选为，237nm，柱温25℃～35℃，优选为，30℃，流速0.8mL/min～1.0mL/min，优选为，1.0mL/min，流动相采用乙腈为流动相A，0.1～0.5wt.％磷酸溶液为流动相B，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，优选的，色谱柱为AcclaimTMRSLC120C18色谱柱。优选的，步骤(3)中，洗脱梯度为：0～25min，流动相A体积分数5～12％，流动相B体积分数95～88％；25～50min，流动相A体积分数12～15.4％，流动相B体积分数88～84.6％；50～75min，流动相A体积分数15.4～22.5％，流动相B体积分数84.6～77.5％。优选的，步骤(3)中计算供试品溶液和对照品溶液的指纹图谱之间的相似度，相似度大于等于0.8判断供试品为合格产品，优选的，相似度大于等于0.9判断供试品为合格产品；和/或，步骤(3)中还获得对照品的峰面积与进样量的标准曲线，并通过标准曲线法以峰面积计算青龙白虎汤供试品的有效成分的含量，优选的，所述通过标准曲线法计算含量的有效成分为没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、表儿茶素和鞣花酸。“物质基准”是指古代医籍中记载的古代经典名方制备方法为依据制备而得的中药药用物质的标准，除成型工艺外，其余制备方法应当与古代医籍记载基本一致。通过本专利技术的技术方案，优选的色谱条件下，各有效成分的峰分离度和峰形良好，且各有效成分在标准曲线线性范围内呈良好的线性(R2＞0.9990)；有效成分48h内稳定性RSD％均小于1.5％，精密度的RSD％均小于1.50％，重复性的RSD％均小于1.50％；本专利技术没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、表儿茶素、鞣花酸有效成分的回收率在95.0％～105.0％范围内。可见本专利技术提供的方法能够有效测试青龙白虎汤样品中有效成分的含量，具有准确、快速、灵敏度高，各项方法学指标均可满足实际检测的需要，和节约时间与成本的优点。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为实施例1得到的15批青果饮片的HPLC指纹图谱；图2为实施例1得到的15批青龙白虎汤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种青龙白虎汤，其特征在于，采用高效液相色谱检测，至少具有6个特征峰，相对保留时间为：峰1：0.221±5％；峰4：0.412±5％；峰7：0.739±5％；峰9：1.000±5％；峰12：1.329±5％；峰16：1.643±5％；/n其色谱条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相采用乙腈为流动相A，0.1～0.5wt.％磷酸溶液为流动相B，洗脱梯度为：0～25min，流动相A体积分数5～12％，流动相B体积分数95～88％；25～50min，流动相A体积分数12～15.4％，流动相B体积分数88～84.6％；50～75min，流动相A体积分数15.4～22.5％，流动相B体积分数84.6～77.5％；检测波长：204nm～314nm，柱温25℃～35℃，流速0.8mL/min～1.0mL/min。/n

【技术特征摘要】
1.一种青龙白虎汤，其特征在于，采用高效液相色谱检测，至少具有6个特征峰，相对保留时间为：峰1：0.221±5％；峰4：0.412±5％；峰7：0.739±5％；峰9：1.000±5％；峰12：1.329±5％；峰16：1.643±5％；
其色谱条件为：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相采用乙腈为流动相A，0.1～0.5wt.％磷酸溶液为流动相B，洗脱梯度为：0～25min，流动相A体积分数5～12％，流动相B体积分数95～88％；25～50min，流动相A体积分数12～15.4％，流动相B体积分数88～84.6％；50～75min，流动相A体积分数15.4～22.5％，流动相B体积分数84.6～77.5％；检测波长：204nm～314nm，柱温25℃～35℃，流速0.8mL/min～1.0mL/min。


2.按照权利要求1所述青龙白虎汤，其特征在于，采用高效液相色谱检测，还具有11个特征峰，相对保留时间为：峰2：0.298±5％；峰3：0.382±5％；峰5：0.492±5％；峰6：0.506±5％；峰8：0.931±5％；峰10：1.032±5％；峰11：1.170±5％；峰13：1.470±5％；峰14：1.528±5％；峰15：1.608±5％；峰17：2.003±5％。


3.一种检测权利要求1所述的青龙白虎汤的质量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)供试品溶液制备：将青龙白虎汤供试品制成水溶液，得到供试品溶液；
(2)对照品溶液制备：将青龙白虎汤的有效成分的对照品制成对照品溶液；
(3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，检测。


4.按照权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述青龙白虎汤供试品选自青果饮片和莱菔的组合物、青龙白虎汤煎煮液、青龙白虎汤浓缩液或青龙白虎汤的物质基准。


5.按照权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，青果饮片和莱菔的组合...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖婉，傅超美，郑勇凤，李锐，游宇，陈姣，朱宗萍，谭瑾，傅舒，董芹，杨青松，王继森，王准，
申请(专利权)人：成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：四川;51