一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基及其制备方法技术

本发明专利技术属于农业生物技术领域，尤其涉及一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基及其制备方法。包括如下组分：基础培养基、苦瓜、6‑BA、NAA、蔗糖、琼脂和水。该专门培养基用于藜蒿不定芽的继代培养，以实现简化藜蒿不定芽继代培养的操作工序和降低藜蒿组培苗生产成本的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基及其制备方法
本专利技术涉及农业生物
，尤其涉及一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基及其制备方法。
技术介绍
藜蒿(Artemisiaselengensissp.)为菊科蒿属多年生宿根性草本植物，因其营养丰富、口感爽脆、兼具药用价值而广受消费者青睐。根茎扦插繁殖是藜蒿的传统种植方式，长期的连续扦插繁殖，导致藜蒿生产上存在产量下降、品相退化、品质良莠不齐等问题，亟需进行种苗的提纯复壮。借助现代植物离体快繁技术，不仅可以获得基因型一致的优良种苗，还能够实现在较短时间内大规模培育藜蒿种苗，以满足藜蒿产业发展的种苗需求。阳新湖蒿是湖北省阳新县的地方藜蒿良种，2018年被列入国家地理标志保护产品。申请人前期研究中，以阳新湖蒿茎顶端嫩芽为外植体，建立了基于愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽继代和生根育苗等环节的离体再生培养体系，所培育的组培苗大田种植示范结果表明，在苗相和产量方面都表现出明显的优势，具有重要的推广应用价值。但是，由于藜蒿组培苗大规模繁殖需要通过不定芽连续大量继代培养实现，所采用的不定芽继代培养基的组成为：MS培养基、6-BA0.02mg/L、NAA0.02mg/L、蔗糖25g/L、琼脂6.5g/L(pH5.8，培养条件：温度25±2℃、湿度75％、光照时数14小时/昼夜、光照强度3000lux)，加上配制培养基用的纯净水、专用的培养基灭菌及设备、外植体消毒等，组培苗生产成本较高且操作工序复杂，影响了蒿农种植组培苗的积极性。因此，特别需要一种有效降低藜蒿不定芽继代培养成本和简化操作程序的方法，以解决上述存在的技术问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基及其制备方法，能够有效地应用于生产上大规模繁殖藜蒿组培苗，具有成本低、缩短操作工序的有益效果。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基，包括如下组分：基础培养基、苦瓜、6-BA、NAA、蔗糖、琼脂和水。作为优选，所述基础培养基为按照配制1升基本培养基所需添加的1/3培养基。作为优选，所述苦瓜选自老熟的苦瓜。作为优选，所述苦瓜的添加量为200～250g/L；所述6-BA的添加量为0.01～0.03mg/L；所述NAA的添加量为0.01～0.03mg/L；所述蔗糖的添加量为20～30g/L；所述琼脂的添加量为6～7g/L。作为优选，所述专用培养基的pH值为5.6～6.0。本专利技术还提供了一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基的制备方法，包括如下步骤：(1)将苦瓜进行处理，得到苦瓜汁；(2)将6-BA、NAA加入到基础培养基中，得到具有生长调解功能的基础培养基；(3)将苦瓜汁、具有生长调节功能的基础培养基、蔗糖和琼脂混合后，定容，加热直至琼脂融化，得到藜蒿不定芽继代培养的专用培养基。作为优选，所述苦瓜汁的制备方法为：用自来水将苦瓜洗净、去籽、切碎后放入带水的锅中煮，直至苦瓜烂熟后，用纱布过滤得到苦瓜汁。作为优选，所述将切碎的苦瓜放入带水的锅中煮的时间为：煮沸到100℃后，再连续煮13～17min。作为优选，所述加热直至琼脂融化的加热时间为：煮沸到100℃后，再连续煮3～7min。本专利技术提供了一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基及其制备方法。本专利技术的专用培养基以及制备方法与现有技术相比具有以下优点：(1)培养基免灭菌，利用本专利技术制备藜蒿不定芽继代的专用培养基，不经过灭菌也能达到培养基灭菌后同样的灭菌效果，培养20天后培养基染菌率均为0。(2)生产成本降低，本专利技术制备藜蒿不定芽继代的专用培养基中，基础培养基用1/3MS培养基中加入苦瓜代替现有技术使用的MS培养基，用自来水代替纯水制备培养基，以及减少培养基灭菌设施和能源的投入，组培苗生产成本降低54.8％。(3)简化操作程序，本专利技术培养基制备过程中省去了灭菌环节，组培苗生产工序明显简化。(4)促进不定芽生长。利用本专利技术制备藜蒿不定芽继代的专用培养基，不定芽生长量比对照灭菌、不加苦瓜的MS培养基增加了1cm，增加18.9％。具体实施方式本专利技术提供了本专利技术提供了一种藜蒿不定芽继代的专用培养基，包括如下组分：基础培养基、苦瓜、6-BA、NAA、蔗糖、琼脂和水。在本专利技术中，所述基础培养基为按照配制1升基本培养基所需加量的1/3的MS培养基，优选为按照配制1升基本培养基所需加量的1/3MS培养基。所述MS培养基的组成及配制方法参照李浚明编译《植物组织培养教程》P.33(中国农业大学出版社，2002年6月第2版)。在本专利技术中，所述1升基本培养基的制备方法为：在本专利技术中，所述苦瓜选自老熟的苦瓜。在本专利技术中，所述水为自来水。在本专利技术中，所述苦瓜的添加量为200～250g/L，优选为225g/L。在本专利技术中，所述6-BA的添加量为0.01～0.03mg/L，优选为0.02mg/L。在本专利技术中，所述NAA的添加量为0.01～0.03mg/L，优选为0.02mg/L。在本专利技术中，所述蔗糖的添加量为20～30g/L，优选为25g/L。在本专利技术中，所述琼脂的添加量为6～7g/L，优选为6.5g/L。在本专利技术中，所述专用培养基的pH值为5.6～6.0，优选为pH值为5.8。本专利技术还提供了一种藜蒿不定芽继代的专用培养基的制备方法，包括如下步骤：(1)将苦瓜进行处理，得到苦瓜汁；(2)将6-BA、NAA加入到基础培养基中，得到具有生长调解功能的基础培养基；(3)将苦瓜汁、具有生长调节功能的基础培养基、蔗糖和琼脂混合后，定容，加热直至琼脂融化，得到藜蒿不定芽继代的专用培养基。在本专利技术中，所述苦瓜汁的制备方法为：用自来水将苦瓜洗净、去籽、切碎后放入带水的锅中煮，直至苦瓜烂熟后，用纱布过滤得到苦瓜汁。在本专利技术中，所述煮苦瓜的锅优选为钢精锅。在本专利技术中，所述煮苦瓜时优选为在电磁炉上煮。在本专利技术中，所述带水的锅中的水量按每升专用培养基放入600～800mL自来水，优选为700mL。在本专利技术中，所述将切碎的苦瓜放入带水的锅中煮的时间为：煮沸到100℃后，再连续煮13～17min，优选为再连续煮15min。在本专利技术中，所述过滤苦瓜汁的时机为待煮沸苦瓜汁冷却至40～50℃时过滤，优选为45℃。在本专利技术中，所述加热直至琼脂融化的加热时间为：煮沸到100℃后，再连续煮3～7min，优选为再连续煮5min。在本专利技术中，所述将融化后的专用培养基冷却至40～50℃时，分装至组培瓶中，优选为冷却至45℃时分装。在本专利技术中，所述藜蒿不定芽继代培养的培养条件优选为温度25±2℃、湿度75％、光照时数14小时/昼夜、光照强度3000lux。下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基，其特征在于，包括如下组分：基础培养基、苦瓜、6-BA、NAA、蔗糖、琼脂和水。/n

【技术特征摘要】
1.一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基，其特征在于，包括如下组分：基础培养基、苦瓜、6-BA、NAA、蔗糖、琼脂和水。


2.根据权利要求1所述的一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基，其特征在于，所述基础培养基为按照配制1升基本培养基所需添加的1/3MS培养基。


3.根据根据权利要求2所述的一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基，其特征在于，所述苦瓜选自老熟的苦瓜。


4.根据权利要求3所述的一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基，其特征在于，所述苦瓜的添加量为200～250g/L；所述6-BA的添加量为0.01～0.03mg/L；所述NAA的添加量为0.01～0.03mg/L；所述蔗糖的添加量为20～30g/L；所述琼脂的添加量为6～7g/L。


5.根据权利要求1～4任意一项所述的一种藜蒿不定芽继代培养的专用培养基，其特征在于，所述专用培养基的pH值为5.6～6.0。


6.权利要求1～5任意一项所述藜蒿...

【专利技术属性】
技术研发人员：康薇，徐顺文，明安淮，严荣兴，申蜜，郑进，
申请(专利权)人：湖北理工学院，阳新县蔬菜办公室，
类型：发明
国别省市：湖北;42