一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法技术

本申请涉及红瑞木种苗繁育领域，具体公开了一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法。繁育方法包括以下步骤：选择外植体；外植体消毒；启动培养：将外植体接入启动培养基中，启动培养基包括MS培养基、BA、IBA、蔗糖和琼脂；增殖培养：将萌芽植株接入增殖培养基，增殖培养包括MS培养基、BA、KT、IBA、蔗糖和琼脂；生根培养：将生芽植株接入生根培养基中，生根培养基包括1/2WPM培养基、IBA、蔗糖和琼脂。本申请通过选用特定的组分和特定的掺量进行配制启动培养基、增殖培养基和生根培养基，能够有效降低植株产生愈伤组织的可能性，降低植株因愈伤组织再生植株而发生性状分离的可能性，使得繁育后的种苗能够保持母本优良的性状，以达到商业种苗繁育的产品要求。

【技术实现步骤摘要】
一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法
本申请涉及红瑞木繁育领域，更具体地说，它涉及一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法。
技术介绍
在园林中，红瑞木是一种冬季观赏红色树干的灌木，多植于草坪、林缘、河岸和湖畔，其秋叶鲜红，小果洁白，落叶后枝干红艳入如珊瑚，是少有的观茎植物，也是良好的切枝材料。由于红瑞木的观赏价值极高，近年来，园林建设中对于红瑞木的需求也逐渐增加。目前，红瑞木常用的繁殖方法主要集中在播种、扦插和压条繁殖上，扦插的繁殖方式一般是剪取红瑞木的嫩枝，截成特定长度的插条，去除剩余枝叶，在秋冬季节进行沙藏后于翌年3-4月份进行扦插，等插条生根后进行移植，压条可在5月份将枝条环割后埋入土中，生根后在翌春与母株割离后进行分载。针对上述中的相关技术，专利技术人发现，虽然扦插方式能够获取种苗，但在扦插繁育过程中，插条的断面容易产生愈伤组织，而愈伤组织容易再生植株，从而导致繁育出的种苗的性状与母本的性状发生了偏离，未继承母本的优良性状，导致培育成的种苗观赏价值不高。
技术实现思路
为了降低种苗在繁殖过程中产生性状分离或变异的可能性，本申请提供一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法。本申请提供的一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法采用如下的技术方案：一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法，包括以下步骤：S1、选择外植体；S2、外植体消毒；S3、启动培养：将S2中的外植体接入启动培养基中，所述启动培养基包括MS培养基、0.3-0.7mg/LBA、0.08-0.12mg/LIBA、27-33g/L蔗糖和6.5-7.0g/L琼脂，启动培养基的pH为5.75-5.90，培养3-4周，得萌芽植株；S4、增殖培养：将S3中的萌芽植株接入增殖培养基中，所述增殖培养包括MS培养基、0.1-0.5mg/LBA、0.1-0.4mg/LKT、0.08-0.12mg/LIBA、28-33g/L蔗糖和6.6-7.0g/L琼脂，增殖培养基的pH为5.75-5.90，培养4-6周，得生芽植株；S5、生根培养：将S4中的生芽植株接入生根培养基中，所述生根培养基包括1/2WPM培养基、1.2-1.8mg/LIBA、13-17g/L蔗糖和6.5-7.0g/L琼脂，生根培养基的pH为5.75-5.90，培养3-4周，得生根植株。通过采用上述技术方案，MS培养基具有较高的无机盐浓度，能够提供组织生长所需的矿质营养，并且无机养分的数量和比例合理，能够满足植物细胞在营养上和生理上的需要；BA能够促进外植体生芽；KT能够诱导腋芽的分化，同时抑制根的分化，从而有利于萌芽植株产生丛生芽；IBA能够促进不定芽的发生，有利于萌芽植株产生丛生芽；WPM培养基可为植物组织培养提供微量元素、大量元素和维生素，蔗糖可为组织生长提供必要的碳源物质，同时还可以调节培养基内的渗透压，能够维持植物细胞内部的稳态；琼脂可以凝固培养基，操作简便，便于工作人员观察研究外植体的状态。本技术方案通过选用特定的组分和特定的掺量进行配制启动培养基、增殖培养基和生根培养基，能够有效降低植株产生愈伤组织的可能性，降低植株因愈伤组织再生植株而发生性状分离的可能性，使得繁育后的种苗能够保持母本优良的性状，同时一定程度上可确保种苗的性状一致性。优选的，所述步骤S3中，启动培养基包括MS培养基、0.5mg/LBA、0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖和6.8g/L琼脂。通过采用上述技术方案，通过选用特定的组分和特定的掺量进行配制启动培养基，使得启动培养基能够更好的促进外植体萌芽，更好的降低外植体产生愈伤组织的可能性。优选的，所述步骤S4中，增殖培养基包括MS培养基、0.3mg/LBA、0.2mg/LKT、0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖和6.8g/L琼脂。通过采用上述技术方案，通过选用特定的组分和特定的掺量进行配制增殖培养基，使得增殖培养基能够更好的促进植株的腋芽产生丛生芽，且芽体健壮，重复性好。优选的，所述步骤S5中，所述生根培养基包括1/2WPM培养基、1.5mg/LIBA、15g/L蔗糖和6.8g/L琼脂。通过采用上述技术方案，通过选用特定的组分和特定的掺量进行配制生根培养基，使得生根培养基能够更好的促进植株生根，促进植株产生的根与植物体结构相连，提高移栽成活率，且生出的根短而粗壮，能够在移栽时降低损伤，同时也可以降低植株产生愈伤组织的可能性。优选的，所述步骤S3、步骤S4和步骤S5的培养条件均为：接种后先暗室培养48-72小时，然后每天光照15-17小时，黑暗7-9小时。通过采用上述技术方案，利用光照可诱导植株生芽，利用暗培养能够诱导植株的脱分化，每天特定时间的光照条件和黑暗条件的配合，有利于诱导外植体生芽、诱导萌芽植株产生丛生芽以及诱导生芽植株生根。优选的，所述步骤S3、步骤S4和步骤S5的培养条件均为：光照强度为1800-2000lux，培养温度为23-26℃。通过采用上述技术方案，特定的温度有利于植株萌芽生根，特定的光照强度能够降低各培养阶段植株出现应激反应的可能性，有效降低褐变强度，有利于植株快速适应新的营养液，促使植株快速生长。优选的，所述步骤S2中，选用72-78%浓度的酒精擦拭外植体，然后将外植体浸入漂白水与水的体积比为1：（3-5）的混合液中35-40分钟，浸泡期间不停震荡；然后用无菌水洗涤3-4次，每次洗涤2-5分钟。通过采用上述技术方案，对外植体进行消毒可降低外植体表面的病菌对外植体的萌芽产生影响，并且此种消毒方式简单易操作，便于工作人员对外植体进行消毒。综上所述，本申请具有以下有益效果：1、本申请利用启动培养基促进外植体的腋芽萌发、利用增值培养基促进腋芽产生丛生芽、利用生根培养基促进植株生根，能够有效降低植株产生愈伤组织的可能性，降低植株因愈伤组织再生植株而发生性状分离的可能性，使得繁育后的种苗能够保持母本优良的性状，同时一定程度上可确保种苗的性状一致性。2、本申请选用特定的培养条件进行繁育红瑞木，能够有效降低各培养阶段植株出现应激反应和褐变现象的可能性，有利于植株能够快速适应新的营养液，促使植株快速生长、芽体健壮。3、本申请只需要少量外植体材料，不需要按照扦插方式采集大量枝条，降低了对成品苗木的取枝伤害，也不用依赖于植物种子，能够根据订单需要按批周年生产。具体实施方式以下实施例对本申请作进一步详细说明。本申请中各原料组分的来源如表1所示：表1各原料组分的来源实施例1-实施例5中启动培养基、增殖培养基和生根培养基的组成如表2和表3所示：表2实施例1-实施例5中启动培养基、增殖培养基和生根培养基的组成实施例1-实施例5中的红瑞木均采用以下方法进行繁育，具体包括以下步骤：S1、选择外植体：春季4月份，剪取红瑞木的嫩梢，从顶芽向下截取带3个腋芽茎段的枝条，去除叶片，切取单节带腋芽茎段作为外植体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、选择外植体；/nS2、外植体消毒；/nS3、启动培养：将S2中的外植体接入启动培养基中，所述启动培养基包括MS培养基、0.3-0.7mg/L BA、0.08-0.12mg/L IBA、27-33g/L蔗糖和6.5-7.0g/L琼脂，启动培养基的pH为5.75-5.90，培养3-4周，得萌芽植株；/nS4、增殖培养：将S3中的萌芽植株接入增殖培养基中，所述增殖培养包括MS培养基、0.1-0.5mg/L BA、0.1-0.4mg/L KT、0.08-0.12mg/L IBA、28-33g/L蔗糖和6.6-7.0g/L琼脂，增殖培养基的pH为5.75-5.90，培养4-6周，得生芽植株；/nS5、生根培养：将S4中的生芽植株接入生根培养基中，所述生根培养基包括1/2WPM培养基、1.2-1.8mg/L IBA、13-17g/L蔗糖和6.5-7.0g/L琼脂，生根培养基的pH为5.75-5.90，培养3-4周，得生根植株。/n

【技术特征摘要】
1.一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选择外植体；
S2、外植体消毒；
S3、启动培养：将S2中的外植体接入启动培养基中，所述启动培养基包括MS培养基、0.3-0.7mg/LBA、0.08-0.12mg/LIBA、27-33g/L蔗糖和6.5-7.0g/L琼脂，启动培养基的pH为5.75-5.90，培养3-4周，得萌芽植株；
S4、增殖培养：将S3中的萌芽植株接入增殖培养基中，所述增殖培养包括MS培养基、0.1-0.5mg/LBA、0.1-0.4mg/LKT、0.08-0.12mg/LIBA、28-33g/L蔗糖和6.6-7.0g/L琼脂，增殖培养基的pH为5.75-5.90，培养4-6周，得生芽植株；
S5、生根培养：将S4中的生芽植株接入生根培养基中，所述生根培养基包括1/2WPM培养基、1.2-1.8mg/LIBA、13-17g/L蔗糖和6.5-7.0g/L琼脂，生根培养基的pH为5.75-5.90，培养3-4周，得生根植株。


2.根据权利要求1所述的一种商业化生产红瑞木组织培养种苗繁育方法，其特征在于：所述步骤S3中，启动培养基包括MS培养基、0.5mg/LBA、0.1mg/LIBA、30g/L蔗糖和6.8g/L琼脂。


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【专利技术属性】
技术研发人员：王婷婷，胡春宏，常苹，季翔，
申请(专利权)人：江苏东郁植物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32