一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法技术

本发明专利技术本发明专利技术涉及一种针对紫外线吸收剂的安全性生物学评价技术领域，且公开了一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，包括以下步骤：步骤一：受试物处理；步骤二：受试菌的培养；步骤三：受试菌浓度的确定；步骤四：S9混合液的配制；步骤五：受试物检测剂量的确定；步骤六：受试物的分组；步骤七：受试物的培养；步骤八：结果判定。本发明专利技术综合考察了乙基己基三嗪酮和二乙基己基乙酰胺基三嗪酮两种紫外线吸收剂建立了一种全新的检测紫外线吸收剂的细菌回复突变检验方法并确定了样品的检测剂量，形成了适合紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，样品的有效处理、检测剂量的优化设定，使得本发明专利技术能够准确的检测紫外线吸收剂的遗传毒性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种针对紫外线吸收剂的安全性生物学评价，具体为一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法。

技术介绍

1、紫外线吸收剂是一种具有能够吸收波长290～400nm的紫外线能量，使自身变为激发态，并把额外能量以热或光的形式释放出来的物质。三嗪类紫外线吸收剂是近几年新发展的一类紫外线吸收剂。乙基己基三嗪酮(ethylhexyl triazone，eht)和二乙基己基丁酰胺基三嗪酮(diethylhexyl butamido triazone，heb)作为三嗪类紫外线吸收剂的代表性物质，具有高效的紫外线吸收性能、相对分子质量大且光稳定性好的特性。外线吸收剂广泛用于化妆品、防紫外织物、高分子材料光稳定剂等，不仅可以保护人体皮肤免受过多紫外线的伤害，也可以避免染料、涂料和高分子材料等因紫外线催化反应而破坏高分子结构。因此其毒理学安全性评价尤为重要。

2、b.n.ames等于1975年建立并不断发展完善的沙门氏菌回复突变试验(ames试验)被世界各国及组织广为采用，是目前国际公认的检测新药、食品添加剂，食品包装材料及化妆品等的致突变性、致癌性的首本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，步骤一中的受试物处理的具体方式为：将三嗪类紫外线吸收剂EHT和HEB用DMSO溶解配制成高浓度10mg/mL的母液，再用DMSO溶液溶解至指定浓度，考虑后续实验体系是水溶液，后续加入实验体系中是按1：100稀释。

3.根据权利要求1所述的一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，步骤二中的受试菌的培养的具体方式为：取LB液体培养基，加入无菌试管中，将已在LB固体培养基中扩大培养的菌株鼠伤寒沙门氏工...

【技术特征摘要】

1.一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，步骤一中的受试物处理的具体方式为：将三嗪类紫外线吸收剂eht和heb用dmso溶解配制成高浓度10mg/ml的母液，再用dmso溶液溶解至指定浓度，考虑后续实验体系是水溶液，后续加入实验体系中是按1：100稀释。

3.根据权利要求1所述的一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，步骤二中的受试菌的培养的具体方式为：取lb液体培养基，加入无菌试管中，将已在lb固体培养基中扩大培养的菌株鼠伤寒沙门氏工程菌ta97、ta98、ta100、ta1535和大肠杆菌wp2uvrapkm101分别挑取一个菌落接种于相应的lb液体培养基内，37℃振荡，200r/min，振荡培养16-20小时。

4.根据权利要求1所述的一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，步骤三中的受试菌浓度的确定的具体方式为：用紫外分光光度计测定步骤一中的受试菌在600nm下od值，用适量lb液体培养基将菌液稀释至od600值为0.3-0.4。

5.根据权利要求1所述的一种针对紫外线吸收剂的细菌回复突变试验方法，其特征在于，步骤四中的s9混合液的配制的具体方式为：首先用75％酒精消毒动物皮毛，剖开腹部，在无菌条件下，取出肝脏，去除肝脏的结缔组织，用冰浴的0.15mol/l氯化钾溶液淋洗肝脏，放入盛有0.15mol/l氯化钾溶液的烧杯里，按每克肝脏加入0.15mol/l氯化钾溶液3ml，用电动匀浆器制成肝匀浆，再在低温高速离心机上，在4℃条件下，以9000g离心10min，取...

【专利技术属性】
技术研发人员：王志刚，詹亦贝，董金宇，魏伊莲，向梦，刘康哲，赖易斌，
申请(专利权)人：湖北理工学院，
类型：发明
国别省市：