粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法技术

本发明专利技术属于农产品检测技术领域，公开了一种粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法，所述粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法包括将粮谷浸泡后粗磨，将粗磨得到的颗粒采用半干法进行二次研磨；将二次研磨的颗粒加水搅拌均匀得到混合液；使用乙腈进行混合液萃取，得到萃取液；将固相萃取小柱接上固相萃取装置，进行萃取液的净化；进行色谱柱、流动相、质谱条件的预设，采用液相色谱‑串联质谱法进行多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁的测定；得到回归曲线，进行定量判断。本发明专利技术使用液相色谱‑串联质谱法进行苯并咪唑类的测定，能够实现对多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁含量的分别测定，测定操作更方便。

【技术实现步骤摘要】
粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法
本专利技术属于农产品检测
，尤其涉及一种粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法。
技术介绍
目前：农业生产中使用有杀菌活性的苯并咪唑环为母体的一类有机杀菌剂进行杀菌，这类化合物均显示内吸杀菌活性，其中代表性化合物有多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁五种，其在植物体内或在植物近旁经代谢活化，变成甲基苯并咪唑-2-氨基甲酸酯，从而表现出杀菌活性。粮谷是为人体提供能量的主要来源，摄入量巨大。但是苯并咪唑类杀菌剂进行谷类作物的喷施，会在粮谷中产生残留，残留累积可通过食物链危害人体健康。为实现食品安全，对粮谷中苯并咪唑类化合物进行检测，但是目前进行粮谷中苯并咪唑类检测的方法无法实现多种化合物的同时检出，需要进行多次检测，操作复杂。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前进行粮谷中苯并咪唑类检测的方法无法实现多种化合物的同时检出，需要进行多次检测，操作复杂。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法。本专利技术是这样实现的，一种粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法，所述粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法包括以下步骤：步骤一，将粮谷样品室温下浸泡15-20h，使用滤纸将表面水分擦干，进行粗磨并将粗磨得到的颗粒采用半干法进行二次研磨；步骤二，将二次研磨的颗粒置于烧杯中，加水搅拌均匀，得到混合液；使用乙腈进行混合液萃取，得到萃取液；步骤三，将固相萃取小柱接上固相萃取装置，进行萃取液的净化；步骤四，进行色谱柱、流动相、质谱条件的预设，采用液相色谱-串联质谱法进行多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁的测定；质谱参数如下：表15种苯并咪唑类杀菌剂的质谱参数步骤五，取五种苯并咪唑类农药适量，用石油醚分别配制成1.0mL～1.5mL含有机氯对照品40μg～48μg的标准对照液；步骤六，精密量取混合标准对照液，用石油醚制成每1L分别含5μg、10μg、50μg、100μg、250μg、500μg的溶液，按色谱柱、流动相、质谱条件进样，重复3次；步骤七，取3次平均值绘制标准曲线，以试样浓度为纵坐标，以峰面积为横坐标，进行回归计算，确定线性范围，得到浓度范围内线性关系良好的对应系数；步骤八，基于步骤四测定的出峰时间和定性定量粒子对确定农药的具体类别，并将峰面积分别代入步骤七的标准曲线中，即可得样品中五种苯并咪唑类农药残留量；步骤九，基于样品中五种苯并咪唑类农药残留量，即可计算得到粮谷中样品中五种苯并咪唑类农药残留量。进一步，步骤一中，所述粮谷样品室温下浸泡采用的具体过程为：将粮谷样品进行搅拌，将粮谷上杂物进行清除；清除完成后，对粮谷样品进行振动筛选；振动筛选完成后，在浸泡器具内部放入相应的酶、水合粮谷；将浸泡器具放置在室内温度下，粮谷浸泡15-20h，在浸泡过程中，对粮谷浸泡情况进行观察；进一步，步骤一中，所述半干法进行二次研磨的步骤为：(1)将粗磨得到的颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水后进行充分搅拌；(2)搅拌后室温下放置2h，使水充分浸入颗粒中；(3)使用粉碎机进行颗粒研磨，利用设置于粉碎机上的粒度检测装置进行颗粒大小检测，并将检测到的颗粒大小数据传输至粉碎机控制器；(4)粉碎机控制器即时分析颗粒大小数据，判断是否已达到精细要求，当未达到要求时，则控制粉碎机缩小粉碎间隙，继续进行研磨；(5)当相关颗粒大小达到精细要求时，收集研磨粉末。进一步，步骤二中，所述二次研磨的颗粒在烧杯中搅拌的过程为：将二次研磨的颗粒放置在烧杯中，按照一定的比例加入适量的水；将烧杯放置在搅拌机下方，缓慢启动搅拌机，搅拌25min～40min；观察颗粒搅拌的状态，进行加速搅拌，直至搅拌至颗粒混合的状态。进一步，步骤二中，所述进行混合液萃取的步骤为：1)向混合液中加入乙腈，并将加入乙腈的混合液放入恒温振荡器中，进行匀速振荡；2)向振荡后的混合液中加入氯化钠溶液，振摇10min，混合均匀，进行盐析，静置分层；3)过滤上清液，利用离心机对上清液进行离心；4)得到上层乙腈提取液，使用过滤膜进行过滤。进一步，步骤1)中，所述振荡包括：振荡温度为35℃；振荡速度为150r/min。进一步，步骤2)中，所述盐析温度为30℃～38℃。进一步，步骤3)中，所述离心包括：离心速度为3000r/min，离心时间为15min。进一步，步骤三中，所述萃取液的净化具体包括：(1)固相萃取小柱预先依次用甲醇、水进行活化；(2)将萃取液倒入漏斗，经滤纸滤过后，滤液流经小柱；(3)待萃取液自然流尽后，用乙腈水溶液清洗小柱；(4)待清洗液自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液；(5)在柱出口处接离心管，用甲醇淋洗小柱，待甲醇自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液。进一步，步骤四中，所述采用液相色谱-串联质谱法进行多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁的测定包括：测定升温方法为：初温65℃保持1min，以每分钟20℃的速度升至200℃，然后以每分钟2℃的速度升至220℃，再以每分钟5℃的速度升至260℃，最后以10℃/min的速度升至280℃，保持15min。进一步，所述色谱柱、流动相、质谱条件的预设包括：(1)选择ZORBAXEclopseXDS-C18柱；(2)使用10mmol/L乙酸铵水溶液(0.1％甲酸)-甲醇溶液作为多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁的流动相；(3)选择电离方式为电喷雾电离；离子喷雾电压为4kV；雾化气体为氮气，干燥气体为氮气，碰撞气体为氩气。(4)进行多反应监测。进一步，步骤六中，所述石油醚温度为60℃～90℃。进一步，步骤七中，所述标准曲线浓度线性范围为1μg/kg～5000μg/kg。结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：本专利技术使用乙腈进行粮谷中苯并咪唑类农药的萃取，分离方便，能够保持较高的萃取效率；使用液相色谱-串联质谱法进行苯并咪唑类的测定，能够实现对多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁含量的分别测定，测定操作更方便。本专利技术能有效检测出花生和大豆中5种苯并咪唑类杀菌剂的残留量，方法具有灵敏、稳定、可靠的特点，为监控我国花生和大豆的质量安全提供了—个行之有效的途径。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例提供的粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法的流程图。图2是本专利技术实施例提本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法，其特征在于，所述粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法包括以下步骤：/n步骤一，将粮谷样品室温下浸泡15-20h，使用滤纸将表面水分擦干，进行粗磨并将粗磨得到的颗粒采用半干法进行二次研磨；/n所述半干法进行二次研磨的步骤为：/n(1)将粗磨得到的颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水后进行充分搅拌；/n(2)搅拌后室温下放置2h，使水充分浸入颗粒中；/n(3)使用粉碎机进行颗粒研磨，利用设置于粉碎机上的粒度检测装置进行颗粒大小检测，并将检测到的颗粒大小数据传输至粉碎机控制器；/n(4)粉碎机控制器即时分析颗粒大小数据，判断是否已达到精细要求，当未达到要求时，则控制粉碎机缩小粉碎间隙，继续进行研磨；/n(5)当相关颗粒大小达到精细要求时，收集研磨粉末；/n步骤二，将二次研磨的颗粒置于烧杯中，加水搅拌均匀，得到混合液；使用乙腈进行混合液萃取，得到萃取液；/n步骤三，将固相萃取小柱接上固相萃取装置，进行萃取液的净化；/n步骤四，进行色谱柱、流动相、质谱条件的预设，采用液相色谱-串联质谱法进行多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁的测定；/n步骤五，取五种苯并咪唑类农药适量，用石油醚分别配制成1.0mL～1.5mL含有机氯对照品40μg～48μg的标准对照液；/n步骤六，精密量取混合标准对照液，用石油醚制成多种不同浓度的溶液，按色谱柱、流动相、质谱条件进样；/n步骤七，取3次平均值绘制标准曲线，以试样浓度为纵坐标，以峰面积为横坐标，进行回归计算，确定线性范围，得到浓度范围内线性关系良好的对应系数；/n步骤八，基于步骤四测定的出峰时间和定性定量离子对确定农药的具体类别，并将峰面积分别代入步骤七的标准曲线中，即可得样品中五种苯并咪唑类农药残留量；/n步骤九，基于样品中五种苯并咪唑类农药残留量，即可计算得到粮谷中样品中五种苯并咪唑类农药残留量。/n...

【技术特征摘要】
1.一种粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法，其特征在于，所述粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法包括以下步骤：
步骤一，将粮谷样品室温下浸泡15-20h，使用滤纸将表面水分擦干，进行粗磨并将粗磨得到的颗粒采用半干法进行二次研磨；
所述半干法进行二次研磨的步骤为：
(1)将粗磨得到的颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水后进行充分搅拌；
(2)搅拌后室温下放置2h，使水充分浸入颗粒中；
(3)使用粉碎机进行颗粒研磨，利用设置于粉碎机上的粒度检测装置进行颗粒大小检测，并将检测到的颗粒大小数据传输至粉碎机控制器；
(4)粉碎机控制器即时分析颗粒大小数据，判断是否已达到精细要求，当未达到要求时，则控制粉碎机缩小粉碎间隙，继续进行研磨；
(5)当相关颗粒大小达到精细要求时，收集研磨粉末；
步骤二，将二次研磨的颗粒置于烧杯中，加水搅拌均匀，得到混合液；使用乙腈进行混合液萃取，得到萃取液；
步骤三，将固相萃取小柱接上固相萃取装置，进行萃取液的净化；
步骤四，进行色谱柱、流动相、质谱条件的预设，采用液相色谱-串联质谱法进行多菌灵、丙硫多菌灵、苯菌灵、噻菌灵、麦穗宁的测定；
步骤五，取五种苯并咪唑类农药适量，用石油醚分别配制成1.0mL～1.5mL含有机氯对照品40μg～48μg的标准对照液；
步骤六，精密量取混合标准对照液，用石油醚制成多种不同浓度的溶液，按色谱柱、流动相、质谱条件进样；
步骤七，取3次平均值绘制标准曲线，以试样浓度为纵坐标，以峰面积为横坐标，进行回归计算，确定线性范围，得到浓度范围内线性关系良好的对应系数；
步骤八，基于步骤四测定的出峰时间和定性定量离子对确定农药的具体类别，并将峰面积分别代入步骤七的标准曲线中，即可得样品中五种苯并咪唑类农药残留量；
步骤九，基于样品中五种苯并咪唑类农药残留量，即可计算得到粮谷中样品中五种苯并咪唑类农药残留量。


2.如权利要求1所述粮谷中五种苯并咪唑类农药残留量的测定方法，其特征在于，步骤二中，所述进行混合液萃取的步骤为：
1)向混合液中加入乙腈，并将加入乙腈的混合液放入恒温振荡器中，进行匀速振荡；
2)向振荡后的混合液中加入氯化钠溶液，振摇10min，混合均匀，进行盐析，静置分层；
3)过滤上清液，利用离心机对上清液进行离心；
4)得到上层乙腈提取液，使用过滤膜进行过滤。


...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕斐，王志宏，鞠茵，崔常勇，
申请(专利权)人：龙口海关综合技术服务中心，
类型：发明
国别省市：山东;37