一种原人参二醇人体内代谢产物检测方法及系统技术方案

本发明专利技术属于代谢产物检测技术领域，公开了一种原人参二醇人体内代谢产物检测方法及系统；通过取样设备抽取并分离提取含原人参二醇的待测血浆样品；通过浓度检测设备利用外标法检测待测血浆样品中原人参二醇浓度数据；利用超高效液相色谱仪串联AB 5600+Q TOF高分辨质谱仪，采用的流动相为水、乙腈，在0‑40min内梯度洗脱；利用对照样品与待测样品产物进行对比检测原人参二醇人体内代谢产物及识别未知代谢产物；通过硅胶柱层析的方式提取原人参二醇人体内代谢产物；利用分析程序对原人参二醇人体内代谢产物进行分析；本发明专利技术通过提供的乙腈制备方法可以制备更高纯度的乙腈，从而大大提高原人参二醇人体内代谢产物检测的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种原人参二醇人体内代谢产物检测方法及系统
本专利技术属于代谢产物检测
，尤其涉及一种原人参二醇人体内代谢产物检测方法及系统方法。
技术介绍
目前，原人参二醇(aPPD)是人参皂苷经过胃肠道菌群的去糖代谢活化后产生的具有药物疗效的活性成分，具有广谱的抗肿瘤作用。人参皂苷(Ginsenoside)是一种固醇类化合物，三萜皂苷。主要存在于人参属药材中。人参皂苷都具有相似的基本结构，都含有由30个碳原子排列成四个环的甾烷类固醇核。他们依糖苷基架构的不同而被分为两组：达玛烷型和齐墩果烷型。达玛烷类型包括两类：人参二醇型-A型，苷元为20(S)-原人参二醇。包含了最多的人参皂苷，如人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg3、Rh2及糖苷基PD；人参三醇型-B型，苷元为20(S)-原人参三醇。包含了人参皂苷Re、Rg1、Rg2、Rh1及糖苷基PT。然而，现有原人参二醇人体内代谢产物检测方法及系统检测过程中采用的乙腈原料纯度低导致检测不准确；同时，提取的原人参二醇人体内代谢产物复杂繁琐。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：(1)现有原人参二醇人体内代谢产物检测方法及系统检测过程中采用的乙腈原料纯度低导致检测不准确；(2)提取的原人参二醇人体内代谢产物复杂繁琐。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种原人参二醇人体内代谢产物检测方法及系统。本专利技术是这样实现的，一种原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法，包括：步骤一，通过取样设备抽取并分离提取含原人参二醇的待测血浆样品；通过浓度检测设备利用外标法检测待测血浆样品中原人参二醇浓度数据；采用ZorbaxExtentC18柱，流动相为甲醇和水，比例为85:15，流速为1.2ml/min，检测波长203nm，柱温30℃，进样量12μL，对照品溶液浓度为0.5mg/ml，以外标法测定原人参二醇的含量及浓度；步骤二，利用超高效液相色谱仪串联AB5600+QTOF高分辨质谱仪，采用的流动相为水、乙腈，在0-40min内梯度洗脱；通过超高效液相色谱仪串联AB5600+QTOF高分辨质谱仪，采用的流动相为水、乙腈，在0-40min内梯度洗脱；在梯度洗脱过程中，所述流动相中水所占体积百分比从66％降至9％再升至66％，所述流动相中乙腈所占体积百分比从32％升至89％再降至32％；步骤三，废旧有机塑料在催化剂和载气存在下加热进行反应，然后经过冷却分离得到含有乙腈的液体产物；步骤四，气相反应工序，使乙酸与氨在固体酸催化剂的存在下进行气相反应，加入含有乙腈的液体产物进行混合得到含水粗乙腈；WHSV为0.5～20h-1，WHSV表示每1小时原料供给量/催化剂填充量；步骤五，纯化工序，对所述含水粗乙腈进行纯化，得到产品乙腈，所述产品乙腈中的甲苯含量相对于乙腈100质量％为小于1.0质量ppm；所述含水粗乙腈中，水的含量相对于所述含水粗乙腈100质量％为47质量％以上、并且甲苯的含量相对于乙腈100质量％为1质量ppm以上，所述固体酸催化剂为介孔沸石；纯化中，具体包括：浓缩工序，将氨从所述含水粗乙腈中分离，得到粗乙腈；脱水工序，将水从所述粗乙腈中分离，得到脱水乙腈；步骤六，利用对照样品与待测样品产物进行对比检测原人参二醇人体内代谢产物及识别未知代谢产物；步骤七，通过硅胶柱层析的方式提取原人参二醇人体内代谢产物；利用分析程序对原人参二醇人体内代谢产物进行分析；步骤八，利用显示器显示检测的原人参二醇浓度数据、对比结果、分析结果。进一步，所述步骤六代谢产物分离提取系统中C8烷基修饰磁性介孔材料为磁性材料。所述步骤七代谢产物分离提取系统中生物样品为血浆。所述步骤七代谢产物分离提取系统中C8烷基修饰磁性介孔材料加入量为1mg/100μL生物样品。所述步骤七代谢产物分离提取系统中提取时长为9min；洗脱溶剂为甲醇；洗脱溶剂量为51μL；洗脱时长为4min。本专利技术的另一目的在于提供一种原人参二醇人体内代谢产物检测系统，包括：取样系统，与主控系统连接，用于通过取样设备抽取含原人参二醇的待测血浆样品；将取血针通过导管连接血液成分分离装置，通过抗凝剂管线将抗凝剂引入至所抽取的全血中，并通过血液成分分离装置将抽取的全血分离成血浆成分和第二血液成分，血浆成分从分离的血液中收集至血浆取样设备中；浓度检测系统，与主控系统连接，用于通过浓度检测设备检测待测血浆样品中原人参二醇浓度数据；洗脱系统，与主控系统连接，用于通过超高效液相色谱仪串联AB5600+QTOF高分辨质谱仪，采用的流动相为水、乙腈，在0-40min内梯度洗脱；对比系统，与主控系统连接，用于通过对照样品与待测样品产物进行对比检测原人参二醇人体内代谢产物及识别未知代谢产物；代谢产物分离提取系统，与主控系统连接，用于提取原人参二醇人体内代谢产物；通过抽取设备抽取生物样品，使用C8烷基修饰磁性介孔材料为载体,从生物样品中提取原人参二醇及其体内代谢产物，提取物兼容后续液质联用检测；取生物样品置于离心管，加入C8烷基修饰磁性介孔材料进行提取，震荡后，弃上清，加入甲醇洗脱，震荡后，取上清进样；色谱分离，色谱柱：AgilentEclipseplusC18RRHD1.8μm，2.1x50mm；流动相：0.5％甲酸水溶液(A)、乙腈(B)梯度洗脱，流速0.3mL/min，柱温30℃。分析系统，与主控系统连接，用于通过分析程序对原人参二醇人体内代谢产物进行分析。显示系统，与主控系统连接，用于通过显示器显示检测的原人参二醇浓度数据、对比结果、分析结果。供电系统，与各系统连接，用于通过蓄电池或外接电源对各个系统的正常运行提供电力支持；主控系统，与取样系统、浓度检测系统、洗脱系统、对比系统、代谢产物提取系统、分析系统、显示系统连接，用于通过主机控制各个系统正常工作。本专利技术的另一目的在于提供一种信息终端搭载控制器，用于运行如下程序：步骤1，通过浓度检测设备利用外标法检测待测血浆样品中原人参二醇浓度数据；步骤2，分析超高效液相色谱仪串联AB5600+QTOF高分辨质谱仪、超高效液相色谱仪串联AB5600+QTOF高分辨质谱仪获取的数据；步骤3，对废旧有机塑料在催化剂和载气存在下加热进行反应，然后经过冷却分离得到含有乙腈的液体产物数据进行分析；步骤4，分析气相反应工序的数据；步骤5，分析纯化工序的数据；步骤6，分析利用对照样品与待测样品产物进行对比检测原人参二醇人体内代谢产物及识别未知代谢产物数据；步骤7，通过硅胶柱层析的方式提取原人参二醇人体内代谢产物；利用分析程序对原人参二醇人体内代谢产物进行分析；步骤8，利用显示器显示检测的原人参二醇浓度数据、对比结果、分析结果结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：(1)本专利技术通过提供的乙腈制备方法可以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法，其特征在于，所述原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法包括：/n步骤一，通过取样设备抽取并分离提取含原人参二醇的待测血浆样品；通过浓度检测设备利用外标法检测待测血浆样品中原人参二醇浓度数据；/n采用Zorbax Extent C

【技术特征摘要】
1.一种原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法，其特征在于，所述原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法包括：
步骤一，通过取样设备抽取并分离提取含原人参二醇的待测血浆样品；通过浓度检测设备利用外标法检测待测血浆样品中原人参二醇浓度数据；
采用ZorbaxExtentC18柱，流动相为甲醇和水，比例为85:15，流速为1.2ml/min，检测波长203nm，柱温30℃，进样量12μL，对照品溶液浓度为0.5mg/ml，以外标法测定原人参二醇的含量及浓度；
步骤二，利用超高效液相色谱仪串联AB5600+QTOF高分辨质谱仪，采用的流动相为水、乙腈，在0-40min内梯度洗脱；通过超高效液相色谱仪串联AB5600+QTOF高分辨质谱仪，采用的流动相为水、乙腈，在0-40min内梯度洗脱；在梯度洗脱过程中，所述流动相中水所占体积百分比从66％降至9％再升至66％，所述流动相中乙腈所占体积百分比从32％升至89％再降至32％；
步骤三，废旧有机塑料在催化剂和载气存在下加热进行反应，然后经过冷却分离得到含有乙腈的液体产物；
步骤四，气相反应工序，使乙酸与氨在固体酸催化剂的存在下进行气相反应，加入含有乙腈的液体产物进行混合得到含水粗乙腈；WHSV为0.5～20h-1，WHSV表示每1小时原料供给量/催化剂填充量；
步骤五，纯化工序，对所述含水粗乙腈进行纯化，得到产品乙腈，所述产品乙腈中的甲苯含量相对于乙腈100质量％为小于1.0质量ppm；所述含水粗乙腈中，水的含量相对于所述含水粗乙腈100质量％为47质量％以上、并且甲苯的含量相对于乙腈100质量％为1质量ppm以上，所述固体酸催化剂为介孔沸石；纯化中，具体包括：
浓缩工序，将氨从所述含水粗乙腈中分离，得到粗乙腈；
脱水工序，将水从所述粗乙腈中分离，得到脱水乙腈；
步骤六，利用对照样品与待测样品产物进行对比检测原人参二醇人体内代谢产物及识别未知代谢产物；
步骤七，通过硅胶柱层析的方式提取原人参二醇人体内代谢产物；利用分析程序对原人参二醇人体内代谢产物进行分析；
步骤八，利用显示器显示检测的原人参二醇浓度数据、对比结果、分析结果。


2.如权利要求1所述原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法，其特征在于，所述步骤六代谢产物分离提取系统中C8烷基修饰磁性介孔材料为磁性材料。


3.如权利要求1所述原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法，其特征在于，所述步骤七代谢产物分离提取系统中生物样品为血浆。


4.如权利要求1所述原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法，其特征在于，所述步骤七代谢产物分离提取系统中C8烷基修饰磁性介孔材料加入量为1mg/100μL生物样品。


5.如权利要求1所述原人参二醇人体内代谢产物检测系统的检测方法，其特征在于，所述步骤七代谢产物分离提取系统中提取时长为9min；洗脱溶剂为甲醇；洗脱溶剂量为51μL；洗脱时长为4min。


6.一种原人参二醇人体内代谢产物检测系统，其特征在于，所述原人参二醇人体内代谢产物检测系统包括：
取样系统，与主控系统连接，用于通过取样设备抽取含原人参二醇的待测血浆样品；

【专利技术属性】
技术研发人员：王延桂，
申请(专利权)人：王延桂，
类型：发明
国别省市：山东;37