一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药及制备方法和应用技术

一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药及制备方法和应用，向含有羧基的多糖聚合物水溶液中加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐以活化羧基，反应后加入二元酰肼，再继续反应12～72小时，得到酰肼化多糖聚合物；将白蛋白、酰肼化多糖聚合物和1,4‑丁二醇二缩水甘油醚制成水溶液，滴加乙醇，滴毕后经过1～24小时，得到白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒；将白蛋白/多糖聚合物悬液与铂类抗肿瘤药物溶液混合，得到白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药。本发明专利技术的纳米载体在装载铂类抗肿瘤药物时无需对铂类药物进行任何化学修饰即可直接装载，具有工艺条件温和、装载时间短、装载效率高等优势。

【技术实现步骤摘要】
一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药及制备方法和应用
本专利技术属于生物医药材料领域，具体涉及一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药及制备方法和应用。
技术介绍
铂类药物是临床上常用的抗肿瘤化疗药物，具有广谱抗肿瘤效果。然而，其治疗效果严重受制于肿瘤处积累效果差、对正常组织的毒副作用大、血液循环半衰期短、易发生耐药等问题。近年来研究表明，利用纳米载体递送药物可克服或缓解上述问题。然而，铂类抗肿瘤药物大多溶于水且缺乏能直接连接于载体上的化学基团，对其进行纳米化具有很强的技术挑战性。目前，研究主要集中于将顺铂进行羧基化改性或疏水化改性，以通过化学键或疏水作用装载于纳米载体上，也可通过顺铂和含羧基载体间的配位作用将顺铂载于纳米载体上。但是，这些方法存在效率低、工艺复杂、降低顺铂疗效等问题。其他种类的铂类抗肿瘤药物大多不易装载于纳米载体上，研究较少。多糖聚合物和白蛋白是制备纳米药物载体的常用材料，具有优异的生物相容性、生物可降解性和极低的免疫原性等特点，已被用于制备纳米颗粒、纳米胶束和纳米凝胶等形式的纳米药物载体。然而，它们在铂类抗肿瘤药物的纳米化中应用很少，主要原因是难以解决铂类药物与它们之间的连接以及到达肿瘤微环境后的释放问题。因此，开发能将铂类药物装载于纳米载体中并能在肿瘤微环境中有效释放的技术，是提高铂类抗肿瘤药疗效和降低毒副作用的关键。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药及制备方法，无需对铂类抗肿瘤药物做任何修饰或改性，即可将其有效装载于白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒中，并能响应肿瘤微环境得以释放，这种方法适用于多种铂类抗肿瘤药物、载药时间短和工艺条件温和等优势，为铂类抗肿瘤药物纳米化提供了临床转化潜力的有效方法。本专利技术的一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，包括以下步骤：一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，包括如下步骤：(1)向含有羧基的多糖聚合物水溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐以活化羧基，反应0.5～6小时后加入二元酰肼，再继续反应12～72小时，透析和冷冻干燥，得到酰肼化多糖聚合物；(2)将白蛋白、酰肼化多糖聚合物和1,4-丁二醇二缩水甘油醚制成pH为6～11的水溶液，在搅拌条件下滴加乙醇，滴毕经过1～24小时后进行离心分离和冷冻干燥，得到白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒；(3)将白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒制成悬液，然后与铂类抗肿瘤药物溶液混合0.5～12小时，离心分离和冷冻干燥，得到白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药。本专利技术进一步的改进在于：所述步骤(1)中含有羧基的多糖聚合物水溶液的质量浓度为0.5％～10％，多糖聚合物为透明质酸、海藻酸钠、肝素、羧甲基壳聚糖或羧甲基纤维素。本专利技术进一步的改进在于：所述步骤(1)中多糖聚合物的分子量为3000Da～1000kDa；所述步骤(1)中的二元酰肼为3,3'-二硫代二丙酰肼、乙二酰肼或己二酸二酰肼。本专利技术进一步的改进在于：所述步骤(1)中的酰肼化多糖聚合物的酰肼化度为10％～80％；透析是利用截留分子量为1000Da的透析袋对水透析12～24小时。本专利技术进一步的改进在于：所述步骤(2)中的白蛋白为人血清白蛋白或牛血清白蛋白；乙醇的体积为水溶液体积的2-15倍。本专利技术进一步的改进在于：所述步骤(2)中的白蛋白、酰肼化多糖聚合物和1,4-丁二醇二缩水甘油醚的质量比为100:10:(0.05～2)～10:100:(0.05～2)。本专利技术进一步的改进在于：所述步骤(3)中的悬液浓度为0.2mg/mL～15mg/mL，铂类抗肿瘤药物溶液的浓度为0.2～26mg/mL，悬液与铂类药物溶液的体积比为(1～15):1。本专利技术进一步的改进在于：所述步骤(3)中的铂类抗肿瘤药物为顺铂、卡铂、奈达铂、奥沙利铂或洛铂。一种根据上述的方法制备的白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药，粒径为100～150nm，载药率可达15％。一种如上述的白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药在制备用于治疗乳腺癌、肺癌与肝癌的药物中的应用。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：(1)本专利技术的纳米前药的载体材料主要是白蛋白和多糖聚合物，它们广泛应用于临床治疗中，已被证明具有优异的生物相容性和生物可降解性，本专利技术获得的纳米载体兼具白蛋白和多糖聚合物的优点；(2)该纳米载体利用非溶剂法驱动白蛋白自组装成纳米粒，同时将多糖聚合物包埋其中，经双环氧交联剂交联反应，获得稳定的半互穿网络结构纳米粒，其粒径分布集中于100-150nm，有利于肿瘤被动靶向作用的发挥；(3)该纳米载体通过多糖聚合物衍生物中酰肼基团与铂元素之间的配位作用实现铂类药物的装载，而酰肼-铂配位键可响应酸性环境而解离，因而该纳米载体可实现不同铂类抗肿瘤药物的有效装载及响应肿瘤酸性微环境而释放；(4)酰肼基团与不同化合物中铂元素的配位作用具有非特异性，并且在常温水相中即可迅速完成，本专利技术的纳米载体在装载铂类抗肿瘤药物时无需对铂类药物进行任何化学修饰即可直接装载，具有工艺条件温和、装载时间短、装载效率高等优势。附图说明图1是实施例1制备的牛血清白蛋白/透明质酸纳米颗粒的红外光谱图。图2是实施例1合成的牛血清白蛋白/透明质酸纳米颗粒的透射电子显微镜照片。图3是实施例1制备的牛血清白蛋白/透明质酸纳米颗粒装载顺铂后透射电子显微镜照片。图4是实施例1制备的纳米颗粒与肝癌HepG2细胞共培养48小时后的细胞存活率。图5是实施例1制备的载顺铂的纳米颗粒与肝癌HepG2细胞共培养24小时后的细胞存活率。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术做进一步描述，但本专利技术并不限于此。本专利技术的一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，包括如下步骤：(1)酰肼化多糖聚合物的制备：将含有羧基的多糖聚合物制成质量浓度为0.5％～10％的水溶液，然后加入羧基摩尔数12％～85％的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐以活化羧基，反应0.5～6小时后加入羧基摩尔数50％～500％的二元酰肼，再继续反应12～72小时，经透析和冷冻干燥过程，得到酰肼化多糖聚合物。(2)白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒的制备：将白蛋白、酰肼化多糖聚合物和1,4-丁二醇二缩水甘油醚制成pH为6～11的水溶液，接着在搅拌条件下以0.5-20mL/min的速度滴加水溶液体积2-15倍的乙醇，经过1～24小时后进行离心分离和冷冻干燥，得到白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒。(3)铂类纳米前药的制备：将白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒制成悬液，然后与浓度为0.2～26mg/mL的铂类抗肿瘤药物溶液混合0.5～12小时，经离心分离和冷冻干燥后得到所述的铂类纳米前药。所述步骤(1)中多糖聚合物为透明质酸、海藻酸钠、肝素、羧甲基壳聚糖或羧甲基纤维素等。所述步骤(1)中多糖聚合物的分子量为3000Da～1000kDa。所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)向含有羧基的多糖聚合物水溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐以活化羧基，反应0.5～6小时后加入二元酰肼，再继续反应12～72小时，透析和冷冻干燥，得到酰肼化多糖聚合物；/n(2)将白蛋白、酰肼化多糖聚合物和1,4-丁二醇二缩水甘油醚制成pH为6～11的水溶液，在搅拌条件下滴加乙醇，滴毕经过1～24小时后进行离心分离和冷冻干燥，得到白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒；/n(3)将白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒制成悬液，然后与铂类抗肿瘤药物溶液混合0.5～12小时，离心分离和冷冻干燥，得到白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药。/n

【技术特征摘要】
1.一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)向含有羧基的多糖聚合物水溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐以活化羧基，反应0.5～6小时后加入二元酰肼，再继续反应12～72小时，透析和冷冻干燥，得到酰肼化多糖聚合物；
(2)将白蛋白、酰肼化多糖聚合物和1,4-丁二醇二缩水甘油醚制成pH为6～11的水溶液，在搅拌条件下滴加乙醇，滴毕经过1～24小时后进行离心分离和冷冻干燥，得到白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒；
(3)将白蛋白/多糖聚合物纳米颗粒制成悬液，然后与铂类抗肿瘤药物溶液混合0.5～12小时，离心分离和冷冻干燥，得到白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药。


2.根据权利要求1所述的一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中含有羧基的多糖聚合物水溶液的质量浓度为0.5％～10％，多糖聚合物为透明质酸、海藻酸钠、肝素、羧甲基壳聚糖或羧甲基纤维素。


3.根据权利要求1所述的一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中多糖聚合物的分子量为3000Da～1000kDa；
所述步骤(1)中的二元酰肼为3,3'-二硫代二丙酰肼、乙二酰肼或己二酸二酰肼。


4.根据权利要求1所述的一种白蛋白/多糖聚合物基铂类纳米前药的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的酰肼化多糖聚合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱军民，李颖，胥伟军，王亚萍，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61