抗PD-L1抗体及其用途制造技术

本公开文本提供了结合T细胞共抑制剂配体程序性死亡配体l(PD

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗PD-L1抗体及其用途


[0001]本申请涉及抗PD-L1抗体或其抗原结合片段、编码其的核酸、其治疗组合物、及其用于增强T细胞功能以上调细胞介导的免疫应答以及治疗T细胞功能异常障碍(诸如肿瘤免疫)和治疗癌症的用途。

技术介绍

[0002]T细胞介导针对抗原的免疫应答的能力需要两种不同的信号传导相互作用(Viglietta,V.等人(2007)Neurotherapeutics 4:666-675；Korman,A.J.等人(2007)Adv.Immunol.90:297-339)。首先，将已排列在抗原呈递细胞(APC)表面上的抗原呈递到抗原特异性天然CD4
+ T细胞。这种呈递经由T细胞受体(TCR)递送信号，所述T细胞受体指导T细胞启动对所呈递抗原特异的免疫应答。其次，通过APC与不同T细胞表面分子之间的相互作用介导的各种共刺激和抑制性信号触发T细胞的激活和增殖以及最终它们的抑制。
[0003]免疫系统受到共刺激和共抑制性配体和受体的网络的严格控制。这些分子为T细胞激活提供第二信号，并且提供正信号和负信号的平衡网络，以最大化针对感染的免疫应答，同时限制对自身的免疫(Wang,L.等人(Epub 2011年3月7日)J.Exp.Med.208(3):577-92；Lepenies,B.等人(2008)Endocrine,Metabolic&Immune Disorders-Drug Targets 8:279-288)。共刺激信号的例子包括APC的B7.1(CD80)和B7.2(CD86)配体与CD4 T淋巴细胞的CD28和CTLA-4受体之间的结合(Sharpe,A.H.等人(2002)Nature Rev.Immunol.2:116-126；Lindley,P.S.等人(2009)Immunol.Rev.229:307-321)。B7.1或B7.2与CD28的结合刺激T细胞活化，而B7.1或B7.2与CTLA-4的结合抑制这种激活(Dong,C.等人(2003)Immunolog.Res.28(l):39-48；Greenwald,R.J.等人(2005)Ann.Rev.Immunol.23:515-548)。CD28在T细胞表面上组成性表达(Gross,J.等人(1992)J.Immunol.149:380-388)，而CTLA-4表达在T细胞激活后快速上调(Linsley,P.等人(1996)Immunity 4:535-543)。
[0004]CD28受体的其他配体包括一组相关B7分子，也称为“B7超家族”(Coyle,A.J.等人(2001)Nature Immunol.2(3):203-209；Sharpe,A.H.等人(2002)Nature Rev.Immunol.2:116-126；Collins,M.等人(2005)Genome Biol.6:223.1-223.7；Korman,A.J.等人(2007)Adv.Immunol.90:297-339)。B7超家族的若干成员是已知的，包括B7.1(CD80)、B7.2(CD86)、诱导型共刺激配体(ICOS-L)、程序性死亡-1配体(PD-Ll；B7-H1)、程序性死亡-2配体(PD-L2；B7-DC)、B7-H3、B7-H4和B7-H6(Collins,M.等人(2005)Genome Biol.6:223.1-223.7)。
[0005]程序性死亡1(PD-1)蛋白是T细胞调节物的CD28/CTLA-4扩展家族的抑制性成员(Okazaki等人(2002)Curr Opin Immunol 14:391779-82；Bennett等人(2003)J.Immunol.170:711-8)。CD28家族的其他成员包括CD28、CTLA-4、ICOS和BTLA。已经鉴定了PD-1的两种细胞表面糖蛋白配体，即程序性死亡配体1(PD-Ll)和程序性死亡配体2(PD-L2)。已经显示PD-Ll和PD-L2在与PD-1结合后下调T细胞激活和细胞因子分泌(Freeman等人(2000)J Exp Med 192:1027-34；Latchman等人(2001)Nat Immunol 2:261-8；Carter等人(2002)Eur J Immunol 32:634-43；Ohigashi等人(2005)Clin Cancer Res 11:2947-53)。
[0006]PD-Ll(也称为分化簇274(CD274)或B7同源物1(B7-H1))是40kDa的1型跨膜蛋白。PD-Ll与在激活的T细胞、B细胞和髓系细胞上存在的其受体PD-1结合，以调控激活或抑制。PD-Ll和PD-L2两者都是与PD-1结合但不与CD28或CTLA-4结合的B7同源物(Blank等人(2005)Cancer Immunol Immunother.54:307-14)。PD-Ll与在T细胞上的其受体PD-1的结合递送抑制IL-2产生和T细胞增殖的TCR介导的激活的信号。所述机制涉及抑制ZAP70磷酸化及其与CD3C的缔合(Sheppard等人(2004)FEB S Lett.574:37-41)。PD-1信号传导会减弱由TCR信号传导产生的PKC-Θ激活环磷酸化，这是转录因子NF-κΒ和AP-1的激活以及IL-2产生所必需的。PD-Ll还结合共刺激分子CD80(B7-1)，但不结合CD86(B7-2)(Butte等人(2008)Mol Immunol.45:3567-72)。
[0007]已经显示PD-Ll在细胞表面上的表达通过IFN-γ刺激上调。已经在许多癌症(包括人肺癌、卵巢癌和结肠癌以及各种骨髓瘤)中发现了PD-Ll表达，并且通常与不良预后相关联(Iwai等人(2002)PNAS 99:12293-7；Ohigashi等人(2005)Clin Cancer Res 11:2947-53；Okazaki等人(2007)Intern.Immun.19:813-24；Thompson等人(2006)Cancer Res.66:3381-5)。已经表明PD-Ll通过增加抗原特异性T细胞克隆的细胞凋亡而在肿瘤免疫中发挥作用(Dong等人(2002)Nat Med 8:793-800)。还已经表明PD-Ll可能与肠粘膜炎症有关，并且PD-Ll的抑制会抑制与结肠炎相关联的消耗性疾病(Kanai等人(2003)J Immunol 171:4156-63)。
[0008]鉴于免疫检查点途径在调节免疫应答中的重要性，需要开发新型试剂来调控免疫抑制蛋白(诸如PD-Ll)的激活，从而导致免疫系统的激活。此类药剂可以用于例如癌症免疫疗法和其他病症(诸如慢性感染)的治疗。

技术实现思路

[0009]本公开文本提供了抗PD-L1抗体，包括编码此类抗体的核酸和含有此类抗体的组合物，及其用于增强T细胞功能以上调细胞介导的免疫应答以及治疗T细胞功能异常障碍(包括感染(例如，急性和慢性)和肿瘤免疫)的用途。
[0010]在一方面，本文提供了一种分离的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，其包含HVR_L1、HVR_L2和HRV_L3：(1)其中所述HVR_L1具有选自以下的氨基酸序列：(a)RASQX1X2X3X4X5LA(SEQ ID NO:1)，其中：X1：G SX2：I VX3：E G SX4：K P SX5：F W Y(b)RASX1SVDFX2GX3SFLX4(SEQ ID NO:2)，其中：X1：E QX2：F H YX3：I KX4：A D(c)X1ASQX2IPX3FLX4(SEQ ID NO:3)，其中：X1：Q RX2：D S TX3：K S TX4：A N(d)RASQGX1SX2X3LA(SEQ ID NO:4)，其中：X1：I VX2：P SX3：W Y以及(e)RASQX1IPSFLN(SEQ ID NO:5)，其中：X1：S T(2)其中所述HVR_L2具有选自以下的氨基酸序列：(a)DASX1X2X3X4GX5(SEQ ID NO:6)，其中：X1：N SX2：L RX3：A EX4：S TX5：I V(b)AASX1LQSGV(SEQ ID NO:7)，其中：X1：S T以及(c)DASNX1X2TGX3(SEQ ID NO:8)，其中：X1：L RX2：A EX3：I V
(3)其中所述HVR_L3具有选自以下的氨基酸序列：(i)YCQQYDX1WPYT(SEQ ID NO:9)，其中：X1：A H S Y(j)YCQX1YX2SWPRX3FT(SEQ ID NO:10)，其中：X1：H QX2：G I S T VX3：G L Q R V(k)YCQQYDX1WPYT(SEQ ID NO:11)，其中：X1：A S以及(l)YCQHYX1SWPRQFT(SEQ ID NO:12)，其中：X1：I T。2.根据权利要求1所述的抗体或其片段，其包含具有选自SEQ ID NO:13-39和94-102的氨基酸序列的HVR_L1、具有选自SEQ ID NO:40-66和103-111的氨基酸序列的HVR_L2、和/或具有选自SEQ ID NO:67-93和112-120的氨基酸序列的HVR_L3。3.根据权利要求2所述的抗体或其片段，其中包含具有选自SEQ ID NO:13-39的氨基酸序列的所述HVR_L1、具有选自SEQ ID NO:40-66的氨基酸序列的所述HVR_L2和/或具有选自SEQ ID NO:67-93的氨基酸序列的所述HVR_L3的所述抗体或其片段与人和猴PD-L1具有交叉反应性。4.根据权利要求2所述的抗体或其片段，其中包含具有选自SEQ ID NO:94-102的氨基酸序列的所述HVR_L1、具有选自SEQ ID NO:103-111的氨基酸序列的所述HVR_L2和/或具有选自SEQ ID NO:112-120的氨基酸序列的所述HVR_L3的所述抗体或其片段与人、猴和小鼠PD-L1具有交叉反应性。5.根据权利要求1-2中任一项所述的抗体或其片段，其包含具有选自SEQ ID NO:121-125的氨基酸序列的VL：DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQX1X2X3X4X5LAWYQQKPGKAPKLLIYDASX6X7X8X9GX10PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYDX11WPYTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:121)，其中：X1：G SX2：I VX3：E G SX4：K P SX5：F W YX6：N SX7：L RX8：A EX9：S TX10：I VX11：A S YDIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASX1SVDFX2GX3SFLX4WYQQKPGKAPKLLIYDASX5X6X7X8GX9P
SRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYDX10WPYTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:122)，其中：X1：E QX2：F H YX3：I KX4：A DX5：N SX6：L RX7：AEX8：S TX9：I VX10：A H S YDIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCX1ASQX2IPX3FLX4WYQQKPGKAPKLLIYAASX5LQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQX6YX7SWPRX8FTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:123)，其中：X1：Q RX2：D S TX3：K S TX4：A NX5：S TX6：H QX7：G I S T VX8：G L Q R VDIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGX1SX2X3LAWYQQKPGKAPKLLIYDASNX4X5TGX6PSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYDX7WPYTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:124)，其中：X1：I VX2：P SX3：W YX4：L RX5：A EX6：I VX7：A SDIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQX1IPSFLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQHYX2SWPRQFTFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:125)，其中：X1：S TX2：I T。6.根据权利要求5所述的抗体或其片段，其中包含具有选自SEQ ID NO:121-122和124的氨基酸序列的所述VL的所述抗体或其片段与人和猴PD-L1具有交叉反应性。7.根据权利要求5所述的抗体或其片段，其中包含具有选自SEQ ID NO:123和125的氨基酸序列的所述VL的所述抗体或其片段与人、猴和小鼠PD-L1具有交叉反应性。8.根据权利要求1-7中任一项所述的抗体或其片段，其还包含具有选自SEQ ID NO:164
和167的氨基酸序列的HVR_H1、具有选自SEQ ID NO:165和168的氨基酸序列的HVR_H2、和/或具有选自SEQ ID NO:166和169的氨基酸序列的HVR_H3。9.根据权利要求8所述的抗体或其片段，其还包含具有选自SEQ ID NO:126-127的氨基酸序列的VH。10.根据权利要求9所述的抗体或其片段，其包含具有选自SEQ ID NO:128-163的氨基酸序列的VL。11.根据权利要求1-7中任一项所述的抗体或其片段，其中所述抗体或其片段以如通过表面等离子体共振测量的100nM或更小、优选50nM或更小、更优选10nM或更小的K
D
结合人PD-L1。12.根据权利要求1-11中任一项所述的抗体或其片段，其还包含人IgG1或IgG4重链恒定区Fc或其变体。13.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-12中任一项所述的抗体或其片段和药学上可接受...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗培志，杜方勇，刘桂中，李艳，
申请(专利权)人：桂林三金药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：