SPINK7蛋白在制备促进过度炎症创面愈合的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种SPINK7蛋白在制备促进过度炎症创面愈合的药物中的应用，所述应用能有效抑制皮肤创面过度炎症反应，促进创面特别是糖尿病创面愈合，为促进慢性炎症创面特别是糖尿病创面愈合，提供一种途径，有着良好的应用前景。前景。前景。

【技术实现步骤摘要】
SPINK7蛋白在制备促进过度炎症创面愈合的药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体涉及SPINK7蛋白在制备促进过度炎症创面愈合的药物中的应用。

技术介绍

[0002]炎症是机体对于损伤的一种防御反应，通常是有益的，但过度的炎症反应会导致皮肤创面愈合障碍。皮肤创面愈合是一个复杂而有序的动态修复过程，主要由特征鲜明而又互有重叠的三个阶段构成，即炎症反应期、增殖期和重塑期。炎症反应是皮肤创面顺利愈合的启动因素，但是过度的、持续的炎症反应则会导致创面难以愈合，形成慢性难愈创面。慢性炎症创面特别是糖尿病创面愈合困难是棘手的世界性医学难题，目前尚无很好的治疗方法；过度炎症反应导致皮肤角质形成细胞增殖受限，无法完成再上皮化；成纤维细胞增殖与迁移能力下降，肉芽组织形成障碍，进而抑制伤口的正常愈合。由于过度炎症反应导致的慢性难愈创面主要包括糖尿病创面、静脉性溃疡和压力性溃疡等，尤以糖尿病足为代表的糖尿病难愈创面为典型。在糖尿病病人中，15％的糖尿病病人具有创面难愈的症状，其中高达84％的病人会因伤口不能愈合而面临截肢的危险。因此，抑制以糖尿病创面为代表的慢性难愈创面的炎症反应对糖尿病难愈创面的治疗具有重要意义。
[0003]Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子7(Serine protease inhibitor kazal type7,SPINK7)又名食管癌相关基因2(Esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)，是最初由我国学者从食管组织克隆并鉴定出来的一个食管癌候选抑癌基因。SPINK7由258个碱基编码，翻译成含85个氨基酸的9.23KD大小的蛋白产物，可分泌到胞外，其氨基酸序列在任、小鼠、大鼠等哺乳动物高度保守。SPINK7蛋白在食管上皮、口腔黏膜等呈组成性表达，也表达于银屑病、湿疹等免疫性疾病的皮损区域。研究发现，SPINK7在调节细胞增殖与凋亡，迁移与侵袭等事件中有重要作用，但其发挥作用的机制尚不完全清楚。
[0004]然而，目前尚未见报道SPINK7蛋白在皮肤创面愈合和以糖尿病创面为代表的慢性难愈创面这类疾病中的作用和机制，SPINK7是否可以作为促进过度炎症创面愈合的干预靶点尚不清楚。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提出SPINK7蛋白在制备促进过度炎症创面愈合的药物中的应用，所述应用能有效抑制皮肤创面过度炎症反应，促进创面特别是糖尿病创面愈合，为促进慢性炎症创面特别是糖尿病创面愈合，提供一种途径，有着良好的应用前景。
[0006]本专利技术的技术方案是：
[0007]SPINK7蛋白在制备促进过度炎症创面愈合的药物中的应用。
[0008]SPINK7蛋白在制备促进糖尿病创面愈合的药物中的应用
[0009]SPINK7蛋白也可以作为创面愈合促进剂或伤口炎症抑制剂应用于化妆品、护肤用品中。
[0010]所述药物是利用所述SPINK7蛋白抑制皮肤创面过度炎症反应，促进创面愈合。
[0011]所述创面为慢性炎症创面、压力性溃疡、静脉性溃疡、褥疮伤口、烧伤伤口、手术伤口任一种，所述慢性炎症创面包括糖尿病伤口、糖尿病足部溃疡。
[0012]所述SPINK7蛋白抑制炎症因子TNF-α及IL-6的表达。
[0013]本专利技术所述过度炎症是指机体在炎症反应中，致炎症因子持续存在不能消退，常表现为炎症因子如IL-6、TNF-a等持续高表达，不断损伤组织，造成炎症过程迁延不愈。
[0014]一种组合物或试剂盒，其含有SPINK7蛋白。
[0015]上述SPINK7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示：MKITGGLLLLCTVVYFCSSSEAASLSPKKVDCSIYKKYPVVAIPCPITYLPVCGSDYITYGNECHLCT ESLKSNGRVQFLHDGSC。
[0016]编码SPINK7蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示：atgaagatcactgggggtctccttctgctctgtacagtggtctatttctgtagcagctcagaagctgctagtctgtctccaaaaaaagtggactgcagcatttacaagaagtatccagtggtggccatcccctgccccatcacatacctaccagtttgtggttctgactacatcacctatgggaatgaatgtcacttgtgtaccgagagcttgaaaagtaatggaagagttcagtttcttcacgatggaagttgctaa。
[0017]含有编码所述SPINK7蛋白的核酸分子的重组载体、重组微生物和/或转基因细胞系同样可以用于上述应用。
[0018]上述的组合物或试剂盒，其用于促进过度炎症创面愈合；用于降低糖尿病创面炎症反应、促进创面愈合；用于作为创面愈合促进剂或创面炎症抑制剂；用于抑制伤口周围炎症因子TNF-α及IL-6的表达。
[0019]本专利技术中，所述SPINK7蛋白可以是来源于天然的、合成的、基因重组的，还可以由合成的或是基因重组获得。
[0020]本专利技术所述组合物包括有效剂量的SPINK7蛋白、以及一种或多种药学上可接受的任何载体、赋形剂及辅剂等，包括但不限于稀释剂、粘合剂、湿润剂等。其可制成适用于人或动物的任何剂型，包括但不限于注射剂、涂抹剂、缓蚀剂等。其可根据公知方法制备得到。所述组合物或试剂盒中的SPINK7蛋白的含量为0.1％-99％重量比。
[0021]有益效果：
[0022]本专利技术首次提出了SPINK7蛋白在抑制皮肤创面炎症的用途。本专利技术首次提出了SPINK7蛋白能降低糖尿病创面的炎症反应，有效抑制皮肤创面过度炎症反应，从而促进糖尿病创面的愈合。研究发现，以慢病毒感染人角质细胞株HaCaT细胞过表达SPINK7蛋白，能够显著抑制IL-6和TNF-a等促炎细胞因子在炎症反应中的表达水平；采用SPINK7敲除小鼠及相应的对照野生型小鼠制备皮肤创面发现敲除小鼠愈合延缓，并伴有显著上调表达的IL-6和TNF-a水平；进一步以SPINK7的真核表达质粒在糖尿病小鼠创面注射上调SPINK7的水平能够显著促进创面愈合并抑制IL-6和TNF-a等促炎因子的表达水平。本专利技术所述的SPINK7能够抑制创面炎症，促进糖尿病创面愈合，具有很好的应用前景。
附图说明
[0023]图1是SPINK7慢病毒感染HaCaT人角质细胞的稳定克隆经Western blot检测显示该细胞能够高表达SPINK7蛋白。
[0024]图2A是SPINK7在HaCaT人角质细胞高表达能够显著抑制TNF-a和IFN-γ联合刺激
No.5),TNF-a R:GGATCCGGTGGTTTGCTACGACGT(SEQ ID No.6)；TBP F：AAGGGAGAATCATGGACCAG(SEQ ID No.7)，TBP R：CCGTAAGGCATCATTGGACT(SEQ ID No.8)。以TBP基因为内本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SPINK7蛋白在制备促进过度炎症创面愈合的药物中的应用，所述SPINK7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。2.SPINK7蛋白在制备促进糖尿病创面愈合的药物中的应用，所述SPINK7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述药物是利用所述SPINK7蛋白抑制皮肤创面过度炎症反应，促进创面愈合。4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述创面为慢性炎症创面、压力性溃疡、静脉性溃疡、褥疮伤口、烧伤伤口、手术伤口任一种；优选地，所述慢性炎症创面包括糖尿病伤口、糖尿病足部溃疡。5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述SPINK7蛋白抑制炎症因子TNF-α及IL-6的表...

【专利技术属性】
技术研发人员：王涛，粟永萍，王军平，赵娜，龙爽，汪国建，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：