一种检测硫酸羟氯喹中羟氯喹氮氧化物杂质含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种检测硫酸羟氯喹中羟氯喹氮氧化物杂质含量的方法，包括使用液相色谱法检测，所述液相色谱法的检测条件包括：色谱柱为苯基色谱柱；流动相由0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和甲醇构成，0.05mol/L磷酸二氢钾溶液作为流动相A，甲醇作为流动相B；流动相A和流动相B的体积比为80∶20。该方法对羟氯喹氮氧化物有较高的分离度。较高的分离度。

【技术实现步骤摘要】
一种检测硫酸羟氯喹中羟氯喹氮氧化物杂质含量的方法


[0001]本专利技术属于医药化工领域，具体涉及一种检测硫酸羟氯喹中羟氯喹氮氧化物杂质含量的方法。

技术介绍

[0002]硫酸羟氯喹为白色或类白色结晶性粉末；无臭，味苦。在水中易溶，在乙醇、氯仿或乙醚中几乎不溶。其分子结构式如下：
[0003][0004]硫酸羟氯喹常作为抗疟药，用于控制疟疾症状、疟疾症状抑制性预防。亦可用于风湿性关节炎和红斑狼疮。目前硫酸羟氯喹原料现行质量标准中有关物质的检查方法仍为薄层色谱法，无法对其杂质进行一定的控制。
[0005]参考US2546658、WO2010027150公开专利，硫酸羟氯喹合成工艺路线如下所示。
[0006]
技术实现思路

[0007]专利技术人发现，目前《中华人民共和国药典》(2015年版)未收录硫酸羟氯喹质量标准，仅卫生部标准(二部)第一册有收录。该公开标准中对有关物质的检查仅采用薄层色谱法进行检查，尚未有很好的检测方法能够定量和定性检查硫酸羟氯喹中杂质羟氯喹氮氧化物的含量。
[0008]本专利技术专利技术人惊奇地发现，使用本申请公开实施方案的方法能够快速有效地检测出硫酸羟氯喹原料和制剂中的杂质羟氯喹氮氧化物。
[0009]进一步，本申请公开实施方案的方法能够对硫酸羟氯喹原料和制剂中的杂质羟氯喹氮氧化物进行定量测定，能够弥补《中华人民共和国药典》(2015年版)和硫酸羟氯喹研发单位质量标准的空白，可为日后有关硫酸羟氯喹有关物质的科学研究提供可靠的检测方法，同时对进一步制定硫酸羟氯喹制剂的安全限量标准提供依据及方法支撑。
[0010]本专利技术的一个目的是提供一种检测硫酸羟氯喹中杂质羟氯喹氮氧化物含量方法。
[0011]本专利技术第一方面提供一种检测硫酸羟氯喹中杂质羟氯喹氮氧化物含量的方法，包括使用液相色谱法检测，所述液相色谱法的检测条件包括：
[0012]色谱柱为苯基色谱柱；
[0013]流动相由0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和甲醇构成，0.05mol/L磷酸二氢钾溶液作为流动相A，甲醇作为流动相B；流动相A和流动相B 的体积比为80∶20。
[0014]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：检测波长为340～350nm，例如343nm。
[0015]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：流动相流速为0.9～1.1mL/min，例如1mL/min。
[0016]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：色谱柱的柱温为23～27℃，例如25℃。
[0017]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：
[0018]优选地，色谱柱长度200～300mm，例如250mm；
[0019]优选地，色谱柱的直径3～6mm，例如4.6mm；
[0020]优选地，色谱柱的填料粒径为3～10μm，例如5μm。
[0021]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：色谱柱为Vensil MP C18(2)色谱柱。
[0022]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：采用内标法定量。
[0023]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，所述液相色谱法的液相色谱法为高效液相色谱法。
[0024]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，羟氯喹氮氧化物的色谱峰分离度大于或等于1.0。
[0025]在一个实施方案中，本专利技术任一项的方法，根据硫酸羟氯喹色谱峰计算的理论塔板数大于或等于3000。
[0026]在一个实施方案中，“分离度”定义为相邻两组分色谱峰的保留时间之差与两峰底宽度之和一半的比值，即
[0027](式中tR1、tR2分别为组分1、2的保留时间；W1、W2分别为组分1、2色谱峰的峰宽。
[0028]在一个实施方案中，，术语“理论塔板数”是指色谱的柱效参数之一，用于定量表示色谱柱的分离效率。
[0029]在一个实施方案中，“理论塔板数”以n来表示，即 (式中tR为组分的保留时间；W为色谱峰的峰宽。)
[0030]在一个实施方案中，理论塔板数根据羟氯喹氮氧化物的色谱峰计算获得。
[0031]在一个实施方案中，苯基色谱住为苯基官能团由来的π电子色谱柱。
[0032]本申请公开实施方案的有益效果
[0033]1)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法，能够较好地分离羟氯喹氮氧化物杂质，分离度较高；
[0034]2)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法，平衡时间短，测定速度快；
[0035]3)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法准确度高；
[0036]4)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法精密度高；
[0037]5)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法重现性好；
[0038]6)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法灵敏度高；
[0039]7)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法，线性方程的线性较好；
[0040]8)本申请公开实施方案的液相色谱检测方法，能够为日后有关硫酸羟氯喹科学研究提供可靠的检测方法，同时对进一步制定硫酸羟氯喹制剂的限量标准提供依据及方法支撑；
具体实施方式
[0041]下面通过实施例，对本专利技术的技术方案做进一步的详细描述。
[0042]实施例
[0043]在一个具体实施方案中，检测硫酸羟氯喹中羟氯喹氮氧化物杂质含量的方法包括以下步骤：
[0044]1.制备供试品溶液
[0045]取硫酸羟氯喹10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相A[乙腈∶水(10∶90)(含0.2％磷酸)]制成每1ml中约含0.1mg硫酸羟氯喹的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，加流动相A制成每1ml中约含硫酸羟氯喹0.5μg的溶液，作为对照溶液 (0.5％)；精密量取对照溶液适量，加流动相A制成每1ml中约含硫酸羟氯喹0.05μg的溶液，作为报告限溶液(0.05％)，供试品溶液色谱图中小于报告限溶液主峰面积的峰忽略不计。
[0046]2.制备对照品溶液
[0047]取硫酸羟氯喹对照品适量，加流动相A溶解并制成每1ml中含硫酸羟氯喹0.1mg的溶液，作为硫酸羟氯喹贮备液；取羟氯喹氮氧化物对照品适量，加乙腈∶水(50∶50)溶解并制成每1ml中含羟氯喹氮氧化物0.05mg 的溶液，作为羟氯喹氮氧化物贮备液；精密量取各贮备液适量，用流动相 A(乙腈∶水(10∶90)(含0.2％磷酸))定量稀释制成每1ml中约含硫酸羟氯喹1μg、羟氯喹氮氧化物0.5μg，作为杂质定位溶液。精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。各杂质按相对保留时间定位见下表。再精密量取对照溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，硫酸羟氯喹峰与相邻杂质峰间的分离度应大于1.0，拖本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测硫酸羟氯喹中有关杂质含量的方法，包括使用液相色谱法检测，所述液相色谱法的检测条件包括：色谱柱为苯基色谱柱；流动相由0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和甲醇构成，0.05mol/L磷酸二氢钾溶液作为流动相A，甲醇作为流动相B；流动相A和流动相B的体积比为80∶20。2.根据权利要求1所述的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：检测波长为340～350nm，例如343nm。3.根据权利要求1所述的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：流动相流速为0.9～1.1mL/min，例如1mL/min。4.根据权利要求1所述的方法，所述液相色谱法的检测条件包括：色谱柱的柱温为23～2...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋健平，张志坚，杨兆丽，王振华，
申请(专利权)人：广州中医药大学科技产业园有限公司，
类型：发明
国别省市：