一种利用小牛胸腺联合制备DNA和胸腺肽的方法技术

技术编号:26885724 阅读:39 留言:0更新日期:2020-12-29 15:43
本发明专利技术涉及DNA和胸腺肽制备技术领域,具体涉及一种利用小牛胸腺联合制备DNA和胸腺肽的方法。本发明专利技术提供的联合制备方法包括:将小牛胸腺经蛋白酶K酶解得到酶解液,将酶解液的上清液经超滤分离后,将超滤的透过液用于分离胸腺肽,将超滤的截留液用于分离DNA。该制备方法可以小牛胸腺为原料同时制备DNA和胸腺肽,胸腺肽的提取效率高,分子量小且均一,便于人体吸收,且没有化学试剂残留,同时DNA的纯度和收率也较高,且DNA提取过程不使用有机试剂,减少了环境污染。

【技术实现步骤摘要】
一种利用小牛胸腺联合制备DNA和胸腺肽的方法
本专利技术涉及DNA和胸腺肽制备
,具体涉及一种利用小牛胸腺联合制备DNA和胸腺肽的方法。
技术介绍
胸腺是机体重要的免疫器官,其功能与免疫密切相关,是T细胞分化、发育、成熟的场所。成人胸腺有助于T细胞的重建,研究表明,在获得性免疫缺陷疾病患者抗逆转录病毒治疗过程中,增加的幼稚淋巴细胞大部分是从胸腺释放的。胸腺也是内分泌器官,可以分泌胸腺激素和激素类物质,如胸腺肽。胸腺肽是胸腺组织上皮细胞分泌的分子量在10000道尔顿以下的多肽类激素,是一种重要的生物反应调节剂,可以促进淋巴细胞成熟及调节人体免疫功能,适用于原发性和继发性免疫缺陷病,对肿瘤也有很好的辅助治疗效果。目前,胸腺肽的制备方法主要采用生物提取法,从小牛、猪等胸腺组织或肝脏中提取小分子胸腺肽。常用的生物提取法为采用反复冻融工艺使活性多肽溶出,或将pH调至酸性状态下反复冻融再加热提取胸腺肽。然而,常规冻融工艺不能充分破坏组织细胞,释放小分子肽,导致小分子肽提取率较低;酸性环境会破坏原料的有效活性成分(如引起核酸分子变性等),不利于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种联合制备DNA和胸腺肽的方法,其特征在于,包括:将小牛胸腺经酶解得到酶解液,将酶解液的上清液经超滤分离后,将超滤的透过液用于分离胸腺肽,将超滤的截留液用于分离DNA;/n所述酶解使用的酶包括蛋白酶K。/n

【技术特征摘要】
1.一种联合制备DNA和胸腺肽的方法,其特征在于,包括:将小牛胸腺经酶解得到酶解液,将酶解液的上清液经超滤分离后,将超滤的透过液用于分离胸腺肽,将超滤的截留液用于分离DNA;
所述酶解使用的酶包括蛋白酶K。


2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶解为采用蛋白酶K在30~60℃、pH6~9条件下进行。


3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,蛋白酶K的用量为与小牛胸腺的匀浆液的质量比为0.2~0.4%,酶解时间为4~8小时。


4.根据权利要求1~3任一项所述的方法,其特征在于,所述超滤的截留分子量为≤10KD;优选为5~10KD。


5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在所述截留液中先加入5~10倍截留液体积的0.1~0.2M氯化钠溶液,搅拌8~24小时,再加入固体氯化钠,使...

【专利技术属性】
技术研发人员:王永珍冯恩承孔双泉马胜楠梁东娜
申请(专利权)人:北京赛升药业股份有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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