一种具有抗衰老功效的植物源多肽、含有其的面霜及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种具有抗衰老功效的植物源多肽、含有其的面霜及制备方法，该植物源多肽为一种鼠尾草种子多肽。皮肤衰老是机体衰老的一部分，表现为皮肤的松弛、变薄；皱纹形成，并逐渐增多和加深，是机体衰老最直观的外在表现之一。研究表明，皮肤衰老与皮肤成纤维细胞增殖能力及真皮胶原蛋白含量下降有关。因此，促进人皮肤成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成是保持皮肤年轻、抵抗衰老的重要方面。上述试验结果说明，鼠尾草种子多肽既可以促进人皮肤成纤维细胞增殖，又可以促进人皮肤成纤维细胞合成胶原蛋白，具有抗皮肤衰老的作用，可以用于制备抗皮肤衰老的化妆品。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗衰老功效的植物源多肽、含有其的面霜及制备方法
本专利技术属于化妆品领域，涉及抗衰老成分的发现和应用，具体涉及一种具有抗衰老功效的植物源多肽、含有其的面霜及制备方法。
技术介绍
皮肤衰老是机体衰老的一部分，表现为皮肤的松弛、变薄；皱纹形成，并逐渐增多和加深，是机体衰老最直观的外在表现之一。研究表明，皮肤衰老与皮肤成纤维细胞增殖能力及真皮胶原蛋白含量下降有关(胡孝辉等，中波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞衰老及机制研究，上海交通大学学报，2010)。因此，促进人皮肤成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成是保持皮肤年轻、抵抗衰老的重要方面。多肽是肽类中的一部分，是构成生命的重要物质。科学研究表明，活性生物多肽的形成，实际上是由20余种天然氨基酸通过肽链以不同的排列方式和形态构成。由于一些多肽具有美白、美容、抗衰老、祛疤痕、祛痘等功能，在化妆品方面上越来越受到重视，在化妆品中添加生物活性多肽，以达到美白、抗衰老的目的，在化妆品中应用越来越广泛，如抗衰老的面部原乳和抗衰老的面膜等。刘廷强等制备了人工饲养的赤子爱胜蚓制作的体外细胞模型，通过细胞复苏培养、传代培养，考察了蚯蚓小分子多肽提取物LMWPEE活性，并将其应用在正常成人表皮角质形成细胞HEK中探究了其对正常成人皮肤纤维细胞HSF、HSF分泌I型前胶原蛋白的影响。通过研究得出，质量浓度为25mg/L的蚯蚓小分子多肽提取物，对正常成人皮肤纤维细胞活性促进作用呈现剂量-效应联系(刘廷强等，蚯蚓小分子多肽提取物对人皮肤细胞活性及胶原分泌的影响，日用化学工业，2016)。除源自动物的小分子多肽以外，源自植物的小分子多肽在化妆品行业具有广泛的应用。有关研究人员利用蛋白质水解法及葡聚糖凝胶渗透色谱法，直接从大米、甘薯、枸杞、黑豆、绿豆、麦胚、茶籽等天然植物中提取分离的活性生物多肽。如通过酶解法提取绿豆中的小分子多肽，并将其应用于皮肤表面。可得出绿豆小分子多肽不仅具有较强的抗皮肤氧化活性，而且具有良好的皮肤美白作用。此外，微生物多肽在化妆品行业也具有较为突出的优势。微生物多肽主要指源自部分真菌，或者水生藻类的酶解产物，如螺旋藻小分子多肽等(何平，小分子多肽在化妆品中的应用综述，广州化工，2019)。鼠尾草(学名：SalviajaponicaThunb.)是唇形科、鼠尾草属一年生草本植物。鼠尾草在日化用品中广泛应用：鼠尾草挥发油具强烈清新香气，可用于调配食品和化妆品香精，也可作为熏香剂及药物使用，其作用有镇静与舒缓双重功能；该精油能显著抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌引起的感染，用于口腔卫生用品防治牙龈炎、口腔炎等；鼠尾草提取物对荧光素酶有活化作用，药理研究认为，荧光素酶活性低，说明皮肤易发特异性皮肤炎，鼠尾草提取物对炎光素酶活性的活化作用明显，具有抗炎性；鼠尾草提取物尚可用作抗氧剂、皮肤美白剂、生发剂、防晒剂、保湿剂和收敛剂。目前已经有较多的以鼠尾草提取物作为化妆品添加剂的报道，但是还没有发现鼠尾草种子多肽的制备和在化妆品中的应用。
技术实现思路
本专利技术是为了克服现有技术不足，提供一种具有抗衰老功效的植物源多肽、含有其的面霜及制备方法。本专利技术技术方案为：一种植物源多肽，通过如下方法制备：将干燥的鼠尾草种子粉碎，过筛，加入二氯甲烷热回流提取以脱脂；挥干溶剂后，将粉末与蒸馏水混合，调节pH值至8.0，于50℃水浴条件搅拌提取；过滤收集提取液，离心，收集上清液并调节pH值至等电点4.7，再次离心，收集沉淀，即得鼠尾草种子总蛋白；称取适量鼠尾草种子总蛋白溶于PBS缓冲液中，调节pH值至8.5，并于55℃水浴条件下加入碱性蛋白酶水解3h；将酶解液置于沸水中灭酶，冷却至常温，离心，取上清液，真空冷冻干燥得到鼠尾草种子酶解蛋白；称取适量鼠尾草种子酶解蛋白溶于蒸馏水中，使用截留分子量为1kDa、3kDa的UF超滤膜进行超滤，超滤条件为：25℃、离心转速4500r/min、30min，收集分子量介于1kDa和3kDa之间的滤过液，冷冻干燥，冻存备用。优选地，所述碱性蛋白酶的使用量以鼠尾草种子总蛋白计10000U/g。上述植物源多肽用于抗皮肤衰老的用途。进一步地，所述抗皮肤衰老指促进皮肤细胞增殖更新。进一步地，所述抗皮肤衰老指提高皮肤胶原蛋白含量。一种抗皮肤衰老的面霜，配方如下。有益效果：皮肤衰老是机体衰老的一部分，表现为皮肤的松弛、变薄；皱纹形成，并逐渐增多和加深，是机体衰老最直观的外在表现之一。研究表明，皮肤衰老与皮肤成纤维细胞增殖能力及真皮胶原蛋白含量下降有关。因此，促进人皮肤成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成是保持皮肤年轻、抵抗衰老的重要方面。上述试验结果说明，鼠尾草种子多肽既可以促进人皮肤成纤维细胞增殖，又可以促进人皮肤成纤维细胞合成胶原蛋白，具有抗皮肤衰老的作用，可以用于制备抗皮肤衰老的化妆品。附图说明图1为各组细胞吸光度值；图2为各组细胞相对增殖活性；图3为各组Ⅰ型胶原蛋白mRNA的RT-PCR检测结果。具体实施方式实施例1：鼠尾草种子多肽的制备将干燥的鼠尾草种子粉碎，过60目筛，按料液比1:10(g/mL)加入二氯甲烷热回流提取以脱脂，共提取2次，每次2h；挥干溶剂后，将粉末与蒸馏水按料液比1:25(g/mL)混合，调节pH值至8.0，于50℃水浴条件搅拌提取1h；过滤收集提取液，以9000r/min转速离心15min，收集上清液并调节pH值至等电点4.7，再次以9000r/min转速离心10min，收集沉淀，即得鼠尾草种子总蛋白。称取适量鼠尾草种子总蛋白按料液比1:25(g/mL)溶于PBS缓冲液中，调节pH值至8.5，并于55℃水浴条件下加入碱性蛋白酶(使用量以鼠尾草种子总蛋白计10000U/g)水解3h；将酶解液置于沸水中灭酶10min，冷却至常温，以6000r/min转速离心15min，取上清液，真空冷冻干燥得到鼠尾草种子酶解蛋白。称取适量鼠尾草种子酶解蛋白按料液比1:100(g/mL)溶于蒸馏水中，使用不同截留分子量的UF超滤膜(1kDa、3kDa)进行超滤，超滤条件为：25℃、离心转速4500r/min、30min，收集分子量介于1kDa和3kDa之间的滤过液，冷冻干燥，冻存备用。实施例2：鼠尾草种子多肽的抗衰老功效1、试验材料人皮肤成纤维细胞(HFBs)购自深圳市豪地华拓生物科技有限公司，三代内。测试多肽为鼠尾草种子多肽，按照实施例1方法制备。DMEM培养基购自ThermoFisherScientific，胎牛血清购自Gibco。RT-PCR引物由上海生工设计合成。2、试验方法2.1细胞培养将HFBs细胞复苏后，用含有10％胎牛血清和1％双抗的DMEM培养基于37℃、5％CO2条件下培养，2～3d传代。2.2衰老皮肤细胞模型的制备在本领域，10代以内的H本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物源多肽，其特征在于，通过如下方法制备：/n将干燥的鼠尾草种子粉碎，过筛，加入二氯甲烷热回流提取以脱脂；挥干溶剂后，将粉末与蒸馏水混合，调节pH值至8.0，于50℃水浴条件搅拌提取；过滤收集提取液，离心，收集上清液并调节pH值至等电点4.7，再次离心，收集沉淀，即得鼠尾草种子总蛋白；/n称取适量鼠尾草种子总蛋白溶于PBS缓冲液中，调节pH值至8.5，并于55℃水浴条件下加入碱性蛋白酶水解3h；将酶解液置于沸水中灭酶，冷却至常温，离心，取上清液，真空冷冻干燥得到鼠尾草种子酶解蛋白；/n称取适量鼠尾草种子酶解蛋白溶于蒸馏水中，使用截留分子量为1kDa、3kDa的UF超滤膜进行超滤，超滤条件为：25℃、离心转速4500r/min、30min，收集分子量介于1kDa和3kDa之间的滤过液，冷冻干燥，冻存备用。/n

【技术特征摘要】
1.一种植物源多肽，其特征在于，通过如下方法制备：
将干燥的鼠尾草种子粉碎，过筛，加入二氯甲烷热回流提取以脱脂；挥干溶剂后，将粉末与蒸馏水混合，调节pH值至8.0，于50℃水浴条件搅拌提取；过滤收集提取液，离心，收集上清液并调节pH值至等电点4.7，再次离心，收集沉淀，即得鼠尾草种子总蛋白；
称取适量鼠尾草种子总蛋白溶于PBS缓冲液中，调节pH值至8.5，并于55℃水浴条件下加入碱性蛋白酶水解3h；将酶解液置于沸水中灭酶，冷却至常温，离心，取上清液，真空冷冻干燥得到鼠尾草种子酶解蛋白；
称取适量鼠尾草种子酶解蛋白溶于蒸馏水中，使用截留分子量为1kDa、3kDa的UF超滤膜进...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：张超科，
类型：发明
国别省市：江苏;32