【技术实现步骤摘要】
一种生物酶催化制备布瓦西坦中间体化合物的方法(一)
本专利技术涉及一种生物酶催化制备布瓦西坦中间体化合物的方法，具体是采用N-乙基马来酰亚胺还原酶对布瓦西坦中间体进行不对称加氢的。(二)
技术介绍
布瓦西坦(Brivaracetam)(化学名称为(2S)-2-[(4R)-2-氧代-4-丙基-1-吡咯烷基]丁酰胺，化学结构式如下所示)是左乙拉西坦的结构衍生物，为比利时优时比(UCB)最新开发的第三代抗癫痫药物(商品名为)。能与突触囊泡糖蛋白2a结合，亲和力较左乙拉西坦强15～30倍，更有效地降低部分性癫痫发作的频率。分别于2016年1月和2月被欧洲EMEA和美国FDA批准上市，用于治疗成人和16岁以上青少年癫痫患者的部分发作、伴有或不伴有继发全身发作的辅助治疗。据统计，2011-2015年间左乙拉西坦的平均年销售额超过10亿美元，预计布瓦西坦产品的应用前景较好。对布瓦西坦的合成方法已有较多研究，涉及化学法不对称合成、化学法手性拆分、酶法不对称合成和酶法手性拆分。原研药公司UCB的专利CN1882535B和发表的论文(O...
【技术保护点】
1.一种生物酶催化制备布瓦西坦中间体化合物的方法，所述布瓦西坦中间体化合物结构如式(I)所示，其特征在于，所述方法以化合物(II)为底物，以N-乙基马来酰亚胺还原酶为催化剂，经不对称加氢反应制得到化合物(I)；所述N-乙基马来酰亚胺还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6所示；/n
【技术特征摘要】
1.一种生物酶催化制备布瓦西坦中间体化合物的方法，所述布瓦西坦中间体化合物结构如式(I)所示，其特征在于，所述方法以化合物(II)为底物，以N-乙基马来酰亚胺还原酶为催化剂，经不对称加氢反应制得到化合物(I)；所述N-乙基马来酰亚胺还原酶的氨基酸序列如SEQIDNO.2、SEQIDNO.4或SEQIDNO.6所示；
式(I)、(II)中，所述R为C1～C8烷基，C2～C8烯基，C2～C8炔基，C3～C8环烷基，芳香基或芳杂基。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述不对称加氢反应以NAD+或NADP+为辅酶底物，以NAD(P)依赖的脱氢酶及其底物为辅酶循环系统，在25～45℃、pH7.0～9.0的条件下进行。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述NAD(P)依赖的脱氢酶为醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶或甲酸脱氢酶，对应的底物分别为异丙醇、葡萄糖或甲酸。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：构建表达所述N-乙基马来酰亚胺还原酶的重组大肠杆菌，以重组大肠杆菌经发酵培养获得的发酵液或粗酶液为催化剂，以化合物(II)为底物，在25～40℃、pH7.0～9.0条件下反应10～24h，反应液经分离纯化获得所述化合物(I)。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于：构建分别表达所述N-乙基马来酰亚胺还原酶和所述NAD(P)依赖的脱氢酶的重组大肠杆菌，以重组大肠杆菌经发酵培养获得的含有N-乙基马来酰亚胺还原酶的发酵液或粗酶液为催化剂，以NAD+或NADP+为辅酶底物，以重组大肠杆菌经发酵培养获得的含有NAD(P)依赖的脱氢酶的发酵液或菌悬液及NAD(P)依赖的脱氢酶底物为辅酶循环系统，在25～45℃、pH7.0～9.0的条件下反应10～24h，反应液经分离纯化获得所述化合物(I)。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于：构建同时表达所述N-乙基马来酰亚胺还原酶和所述NAD(P)依赖的脱氢酶的重组大肠杆菌，以重组大肠杆菌经发酵培养获得的发酵液或粗酶液为催化剂，以NAD+或NADP+为辅酶底物，并添加NAD(P)依赖的脱氢酶底物组成辅酶循环系统，在25～45℃、pH7.0～9.0的条件下反...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈小龙，熊志刚，朱林江，褚定军，陆跃乐，冯佳程，马爽，
申请(专利权)人：奥锐特药业股份有限公司，浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。