一种青蒿素紫外可见光快速检测方法技术

本申请涉及青蒿素含量检测技术领域，尤其涉及一种青蒿素可见光快速检测方法，包括步骤：S1：超声提取；S2：减压浓缩；S3：溶解定容；S4：取样；S5：加碱；S6：热处理；S7：对照品溶液制备：S8：制备空白溶液；S9：测定青蒿素含量。本申请提供的青蒿素可见光快速检测方法，与传统的重量法相比，本方法只需消耗极小量的原材料样品，且能够更加简便、快速、准确地检测出原材料中青蒿素的含量，有利于筛选出高含量青蒿进行青蒿种子育种以及生产厂家现场收购青蒿原料时的质量监控。

【技术实现步骤摘要】
一种青蒿素紫外可见光快速检测方法
本申请涉及青蒿素含量检测
，尤其涉及一种青蒿素紫外可见光快速检测方法。
技术介绍
在青蒿素系列药物是当前治疗疟疾最安全有效的药物，因全球青蒿使用量巨大，市场供不应求，一些不法商贩趁机利用劣质青蒿或伪品冒充正品出售，给青蒿素提取厂商造成了很大的损失。其次，在培育高含量青蒿种子方面，每年要从基地几千株青蒿草中每株一一筛选，且要赶上农时，青蒿开花、生长旺盛时筛选出来，另外筛选时既要保持原株草不伤，又要保证检测的准确性。因此，有必要研究一种简单、快速、准确的分析方法对青蒿原料的现场收购进行质量监控以及筛选高含量青蒿进行育种。常规的青蒿药材检测主要是重量法(有机溶液如石油醚回流提取，结晶称重)、高效液相色谱法。，但重量法检测需要样品量大、繁琐、费时、挥发污染环境，而HPLC色谱法前处理麻烦且成本昂贵，不适用于现场快速检测。
技术实现思路
本申请的目的在于提供一种青蒿素紫外可见光快速检测方法，本方法只需消耗极小量的原材料样品，且能够更加简便、快速、准确地检测出原材料中青蒿素的含量，有利于筛选出高含量青蒿进行青蒿种子育种以及生产厂家现场收购青蒿原料时的质量监控。本申请是通过以下技术方案实现的：一种青蒿素紫外可见光快速检测方法，包括步骤：S1：超声提取：取0.5～2g干叶粉，放入超声设备中加入石油醚，石油醚毫升用量为干叶粉质量的30～40倍，完全超声提取三次，提取时间依次为30min、20min、20min，定量滤纸过滤后，合并得第一滤液；S2：减压浓缩：取所述第一滤液液，在蒸发器中-0.3Pa条件下减压浓缩至析出青蒿素膏状物；S3：溶解定容：加入醇制剂将所述青蒿素膏状物溶解，并转移到25mL、50mL、100mL或150mL容量瓶中；S4：取样：取0.5～2mL经步骤S3的溶液至25～100mL量瓶中作为样本；S5：加碱：将样本以1:4的比例置于0.2％氢氧化钠溶液中，摇匀后用0.22μm微孔滤膜过滤于10mL量瓶中；S6：热处理：将加碱滤后的样本置50±1℃恒温水浴箱中加热反应25～40min，取出后冷却至室温作为样品溶液；S7：对照品溶液制备：1)精密称定经80℃减压干燥恒重的青蒿素对照品20～25mg，置25mL量瓶中，加无水乙醇；2)超声5min使步骤1)中的青蒿素对照品溶解，冷至室温，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；3)精密量取1～2mL经步骤2)的溶液置25mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；4)精密量取1～2mL经步骤3)的溶液置10mL量瓶中；5)用0.2％氢氧化钠溶液稀释经步骤4)的溶液至刻度，摇匀，置50±1℃恒温水浴箱中加热反应20～40min，作为对照品溶液；S8：制备空白溶液；S9：测定：以空白溶液校正基线，用可见光紫外分光光度法在190-400nm波长范围进行扫描测取青蒿素含量，代入公式：M＝(A样×W对×n样)/(A对×W样×n对)其中，M为青蒿素含量，A样为样品溶液的吸光度，A对为对照品溶液的吸光度，W对为对照品溶液的青蒿素测得量，W样为样品溶液的青蒿素测得量，n样为样品溶液的稀释度倍数，n对为对照品溶液的稀释度倍数。如上所述的青蒿素紫外可见光快速检测方法，所述空白溶液的制备包括：精密量取1～5mL乙醇或甲醇溶液置25mL量瓶中，用0.2％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，置50±1℃恒温水浴箱中加热反应20～40min，作为空白溶液。如上所述的青蒿素紫外可见光快速检测方法，用分光光度法测定青蒿素含量时，取292nm波长处的吸光度作为计算值。如上所述的青蒿素紫外可见光快速检测方法，步骤S1中所述石油醚为6号汽油。如上所述的青蒿素紫外可见光快速检测方法，步骤S1中筛的规格为20目。如上所述的青蒿素紫外可见光快速检测方法，步骤S1中超声设备的功率为40w/cm2。如上所述的青蒿素紫外可见光快速检测方法，步骤S3中所述醇制剂为甲醇或乙醇。如上所述的青蒿素紫外可见光快速检测方法，所述干叶粉的制备包括：取青蒿鲜叶，晒至含水量≤12％后去除杂质，粉碎过筛后得到干叶粉。与现有技术相比，本申请有如下优点：与传统的重量法、高效液相色谱法相比，本方法只需消耗极小量的原材料样品，且能够更加简便、快速、准确地检测出原材料中青蒿素的含量，有利于筛选出高含量青蒿进行青蒿种子育种以及生产厂家现场收购青蒿原料时的质量监控。【附图说明】为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本申请实施例所述可见光紫外分光光度法进行扫描测取青蒿素含量的曲线图。图2为本申请实施例所述青蒿中所含青蒿素线性试验的线性图。【具体实施方式】为了使本申请所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。本申请实施例提出一种青蒿素紫外可见光快速检测方法，包括步骤：S1：超声提取：取青蒿鲜叶，晒至含水量为12％后去除杂质，粉碎过筛后得到干叶粉，筛的规格为20目，取0.5～2g干叶粉，放入超声设备中加入石油醚，石油醚为沸点为60～90℃的6号汽油，其中超声设备的功率为40w/cm2，石油醚毫升用量为干叶粉质量的30～40倍，完全超声提取三次，提取时间依次为30min、20min、20min，定量滤纸过滤，合并得第一滤液；S2：减压浓缩：取所述第一滤液，在蒸发器中-0.3Pa条件下减压浓缩至析出青蒿素膏状物，一般5min析出100mL膏状物，常规方法则需要2天；S3：溶解定容：加入甲醇或乙醇等醇制剂将所述青蒿素膏状物溶解，并转移到25mL、50mL、100mL或150mL容量瓶中；S4：取样：取0.5～2mL经步骤S3的溶液至25～100mL量瓶中作为样本，优选地，取1mL经步骤S3的溶液至25mL量瓶中；S5：加碱：将样本以1:4的比例置于0.2％氢氧化钠溶液中，摇匀后用0.22μm微孔滤膜过滤于10mL量瓶中，氢氧化钠溶液可起到解环和去杂的作用，过滤去杂提高了溶液的透光率，为下一步的分光光度法检测做准备；S6：热处理：将加碱滤后的样本置50±1℃恒温水浴箱中加热反应25～40min，取出后冷却至室温(本文所述室温为25℃)作为样品溶液；S7：对照品溶液制备：1)精密称定经80℃减压干燥恒重的青蒿素对照品20～25mg，置25mL量瓶中，加无水乙醇；2)超声5min使步骤1)中的青蒿素对照品溶解，冷至室温，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；3)精密量取本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种青蒿素紫外可见光快速检测方法，其特征在于，包括步骤：/nS1：超声提取：取0.5～2g干叶粉，放入超声设备中加入石油醚，石油醚毫升用量为干叶粉质量的30～40倍，完全超声提取三次，提取时间依次为30min、20min、20min，定量滤纸过滤后，合并得第一滤液；/nS2：减压浓缩：取所述第一滤液液，在蒸发器中-0.3Pa条件下减压浓缩至析出青蒿素膏状物；/nS3：溶解定容：加入醇制剂将所述青蒿素膏状物溶解，并转移到25mL、50mL、100mL或150mL容量瓶中；/nS4：取样：取0.5～2mL经步骤S3的溶液至25～100mL量瓶中作为样本；/nS5：加碱：将样本以1:4的比例置于0.2％氢氧化钠溶液中，摇匀后用0.22μm微孔滤膜过滤于10mL量瓶中；/nS6：热处理：将加碱滤后的样本置50±1℃恒温水浴箱中加热反应25～40min，取出后冷却至室温作为样品溶液；/nS7：对照品溶液制备：/n1)精密称定经80℃减压干燥恒重的青蒿素对照品20～25mg，置25mL量瓶中，加无水乙醇；/n2)超声5min使步骤1)中的青蒿素对照品溶解，冷至室温，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；/n3)精密量取1～2mL经步骤2)的溶液置25mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；/n4)精密量取1～2mL经步骤3)的溶液置10mL量瓶中；/n5)用0.2％氢氧化钠溶液稀释经步骤4)的溶液至刻度，摇匀，置50±1℃恒温水浴箱中加热反应20～40min，作为对照品溶液；/nS8：制备空白溶液；/nS9：测定：以空白溶液校正基线，用可见光紫外分光光度法在190-400nm波长范围进行扫描测取青蒿素含量，代入公式：/nM＝(A...

【技术特征摘要】
1.一种青蒿素紫外可见光快速检测方法，其特征在于，包括步骤：
S1：超声提取：取0.5～2g干叶粉，放入超声设备中加入石油醚，石油醚毫升用量为干叶粉质量的30～40倍，完全超声提取三次，提取时间依次为30min、20min、20min，定量滤纸过滤后，合并得第一滤液；
S2：减压浓缩：取所述第一滤液液，在蒸发器中-0.3Pa条件下减压浓缩至析出青蒿素膏状物；
S3：溶解定容：加入醇制剂将所述青蒿素膏状物溶解，并转移到25mL、50mL、100mL或150mL容量瓶中；
S4：取样：取0.5～2mL经步骤S3的溶液至25～100mL量瓶中作为样本；
S5：加碱：将样本以1:4的比例置于0.2％氢氧化钠溶液中，摇匀后用0.22μm微孔滤膜过滤于10mL量瓶中；
S6：热处理：将加碱滤后的样本置50±1℃恒温水浴箱中加热反应25～40min，取出后冷却至室温作为样品溶液；
S7：对照品溶液制备：
1)精密称定经80℃减压干燥恒重的青蒿素对照品20～25mg，置25mL量瓶中，加无水乙醇；
2)超声5min使步骤1)中的青蒿素对照品溶解，冷至室温，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；
3)精密量取1～2mL经步骤2)的溶液置25mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；
4)精密量取1～2mL经步骤3)的溶液置10mL量瓶中；
5)用0.2％氢氧化钠溶液稀释经步骤4)的溶液至刻度，摇匀，置50±1℃恒温水浴箱中加热反应20～40min，作为对照品溶液；
S8：制备空白溶液；
S9：测定：以空白溶液校正基线，用可见光紫外分光光度...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹利之，蒋群峰，
申请(专利权)人：湖南星辰生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43