一种同时检测五种内分泌干扰物的方法、试剂盒及应用技术

本发明专利技术涉及生物检测领域，具体讲，涉及一种同时检测自来水和牛奶中五种内分泌干扰物的方法、试剂盒及应用。本发明专利技术提出一种同步检测五种内分泌干扰物的悬浮芯片技术，具有高通量、重复性好、灵敏度高和准确性好的优点，在食品与环境的检测领域具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测五种内分泌干扰物的方法、试剂盒及应用
本专利技术涉及生物检测领域，具体讲，涉及一种同时检测五种内分泌干扰物的方法、试剂盒及应用。
技术介绍
内分泌干扰物(EndocrineDisruptingChemicals，即EDCs)广泛存在于生物圈，在食物和饮水中都能检测到。内分泌干扰物也称为环境激素，能够干扰人类或动物内分泌系统并导致异常效应的物质。痕量物质的积累也会导致动物体和人体生殖器障碍、行为异常、生殖能力下降、幼体死亡甚至灭绝。因此，对食品和水体中内分泌干扰物的灵敏度检测十分重要。EDCs多为有机污染物及重金属物质。农药大部分属于EDCs，EDCs大多是人工合成，例如工业中使用的多氯联苯是持久性有机污染物之一，属于一个被称为氯化氢化合物的人造有机化学品大家族。工业中使用的大部分稳定剂和增塑剂也属于内分泌干扰物，而这些不能分解的化合物很可能作为污染物流入河流、饮用水，最终通过食物进入人们的口中。随着生活水平的提高和全世界范围内食品的流通，人们越来越重视食品安全。内分泌干扰物的研究就显得日益重要。至今为止，研究人员对食品安全的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时检测五种内分泌干扰物的方法，其特征在于，所述五种内分泌干扰物包括雌二醇、雌三醇、双酚A、己烯雌酚和壬基酚；所述方法至少包括以下步骤：/nS1、将所述五种内分泌干扰物的完全抗原分别与羧基化磁性微球进行偶联；/nS2、绘制所述五种内分泌干扰物的多通道标准曲线；/nS3、对待测标本进行检测，通过所述多通道标准曲线，获得所述待测标本中所述五种内分泌干扰物的浓度。/n

【技术特征摘要】
1.一种同时检测五种内分泌干扰物的方法，其特征在于，所述五种内分泌干扰物包括雌二醇、雌三醇、双酚A、己烯雌酚和壬基酚；所述方法至少包括以下步骤：
S1、将所述五种内分泌干扰物的完全抗原分别与羧基化磁性微球进行偶联；
S2、绘制所述五种内分泌干扰物的多通道标准曲线；
S3、对待测标本进行检测，通过所述多通道标准曲线，获得所述待测标本中所述五种内分泌干扰物的浓度。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述偶联至少包括以下步骤：
S11、活化所述羧基化磁性微球；
S12、将活化后的羧基化磁性微球与所述五种内分泌干扰物的完全抗原偶联。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述活化至少包括以下步骤：
S111、将所述羧基化磁性微球恢复至室温，分离，清洗；
S112、加入EDC溶液和NHS溶液进行活化，分离，清洗即得活化后的羧基化磁性微球；
优选的，每1.25×106个羧基化磁性微球中添加浓度为40～60mg/mL的EDC溶液10μL、浓度为40～60mg/mL的NHS溶液10μL。


4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述偶联至少包括以下步骤：
S121、向所述活化后的羧基化磁性微球加入所述五种内分泌干扰物的完全抗原进行交联，得到交联微球；
S122、分离、清洗；
S123、用封闭液进行封闭；
S124、分离，清洗。


5.根据权利要求1、2和4中任一项所述的方法，其特征在于，所述五种内分泌干扰物的完全抗原的浓度分别为：雌二醇完全抗原4～8μg/mL、雌三醇完全抗原8～12μg/mL、双酚A完全抗原12～16μg/mL、己烯雌酚完全抗原8～12μg/mL、壬基酚完全抗原12～16μg/mL；
优选为：雌二醇完全抗原6μg/mL、雌三醇完全抗原10μg/mL、双酚A完全抗原14μg/mL、己烯雌酚完全抗原10μg/mL、壬基酚完全抗原14μg/mL。


6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述绘制所述五种内分泌干扰物的...

【专利技术属性】
技术研发人员：高志贤，贾雪霞，姚子仪，刘厦，王瑜，
申请(专利权)人：军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12