特征肽段、检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了特征肽段，至少包括氨基酸序列分别为QGLLPVLESFK、LSPLGEEMR、LGPLVEQGR、AATVGSLAGQPLQER、LQAEAFQAR、VTTVASHTSDSDVPSGVTEVVVK以及TLLSNLEEAK的肽段。本发明专利技术还提供了检测方法和试剂盒。本发明专利技术利用特征肽段对应的同位素标记肽段作为内标物，实现同时、定量检测血浆或血清中载脂蛋白A、载脂蛋白E、载脂蛋白J的浓度。

【技术实现步骤摘要】
特征肽段、检测方法及试剂盒
本专利技术涉及蛋白质检测
更具体地说，本专利技术涉及载脂蛋白A、载脂蛋白E、载脂蛋白J定量检测相关的特征肽段、检测方法及试剂盒。
技术介绍
脂蛋白中蛋白部分称为载脂蛋白(Apolipoprotein,Apo)，载脂蛋白在脂蛋白代谢中具有重要生理功能。载脂蛋白的主要功能有：①维持脂蛋白的结构与脂类运输；②调控脂代谢有关酶的活性；③作为细胞表面脂蛋白受体的配体而参与脂蛋白的代谢。载脂蛋白一般分为载脂蛋白A、载脂蛋白B、载脂蛋白C、载脂蛋白D、载脂蛋白E和载脂蛋白J等，每种又分为若干亚型。载脂蛋白A(ApolipoproteinA，ApoA)是构成血浆高密度脂蛋白的重要组分，具有清除组织脂质和抗动脉粥样硬化的作用。载脂蛋白A-Ⅱ(ApoAⅡ)是载脂蛋白A家族中最重要的组分之一。ApoAⅡ可以水解乳糜微粒(CM)和极低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三酯，其血清浓度与发生冠心病的危险性呈负相关。载脂蛋白E(ApolipoproteinE，ApoE)是一种多态性蛋白，参与脂蛋白的转化与代谢过程，其基因可以调节许多生物学功本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.特征肽段，其特征在于，至少包括氨基酸序列分别为QGLLPVLESFK、LSPLGEEMR、LGPLVEQGR、AATVGSLAGQPLQER、LQAEAFQAR、VTTVASHTSDSDVPSGVTEVVVK以及TLLSNLEEAK的肽段。/n

【技术特征摘要】
1.特征肽段，其特征在于，至少包括氨基酸序列分别为QGLLPVLESFK、LSPLGEEMR、LGPLVEQGR、AATVGSLAGQPLQER、LQAEAFQAR、VTTVASHTSDSDVPSGVTEVVVK以及TLLSNLEEAK的肽段。


2.检测方法，其特征在于，包括在同时检测载脂蛋白A、载脂蛋白E以及载脂蛋白J时，将与权利要求1中所述特征肽段对应的同位素标记肽段作为内标物。


3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，包括：
配制同位素标记肽段内标液；
利用替代基质配制所述特征肽段的校正标样；
取待测样品，依次用二硫苏糖醇溶液、碘乙酰胺溶液、胰蛋白酶进行处理，加入同位素标记肽段内标液，上柱，洗脱，氮气吹干或冷冻干噪，复溶，得待测样品溶液；
取所述校正标样，加入同位素标记肽段内标液，用液相色谱质谱联用仪器进行分析，记录所述特征肽段的峰面积以及对应的同位素标记肽段的峰面积，建立以峰面积之比和浓度为坐标的标准曲线；
将所述待测样品溶液用液相色谱质谱联用仪器进行分析，记录所述特征肽段的峰面积以及对应的同位素标记肽段的峰面积，将峰面积之比代入标准曲线，计算载脂蛋白A、载脂蛋白E、载脂蛋白J的浓度。


4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，还包括：
利用替代基质配制所述特征肽段的质控样品，向质控样品中加入同位素标记肽段内标液，用液相色谱质谱联用仪器进行分析，记录所述特征肽段的峰面积以及对应的同位素标记肽段的峰面积，将峰面积之比代入标准曲线，计算质控样品回收率值。


5.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述替代基质的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘丽宏，李鹏飞，丛宇婷，张文，李国庆，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京朝阳医院，
类型：发明
国别省市：北京;11