一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法技术

本申请公开了一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法，属于检测方法的技术领域，解决了现有检测方法的样品浑浊而导致样品的检测结果不准确、检测方法的检出限过高的问题。检测方法包括以下步骤：S1、于待检测样品中加去离子水和乙腈，得到萃取液；S2、于萃取液中加入氯化钠，混匀后振荡，离心后得到上清液1；S3、将上清液1氮吹，获得残渣；S4、于残渣中加入磷酸缓冲液‑甲醇的混合溶液后混匀，得到复溶溶液；S5、将复溶溶液离心后过微滤膜，得到上清液2，将上清液2过滤后进行液相色谱‑串联质谱仪检测。本申请的检测方法具有检出限低、检测准确的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法
本申请涉及药品检测的
，更具体地说，它涉及一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法。
技术介绍
磺胺类药物为人工合成的抗菌药，具有抗菌谱较广、性质稳定、使用简便等优点。但是磺胺类药易产生耐药性，在肝内的代谢产物乙酰化磺胺，乙酰化磺胺的溶解度低，易在尿中析出结晶，给肾部带来损伤，因此要严格控制人体内的磺胺类药物的摄入量。除了主动的药物服用外，通过食品摄入也是磺胺类药物进入人体的一种方式，因此需要对摄入食品中的磺胺类药物的含量进行严格控制。磺胺类药物通过食品摄入进入人体的途径之一是：兽药中的残留进入牲畜、禽类体内，人食用这类牲畜、禽类后磺胺类药物进入人体内。其中，作为兽药之一的双黄连口服液，若是有不法商贩在兽药双黄连口服液中加入磺胺二甲嘧啶(一种磺胺类药物)以提高药效，当牲畜、禽类等吃了该种兽药后，兽药中的磺胺二甲嘧啶在牲畜、禽类的体内残留，由这些牲畜、禽类所制成的肉类食品中就也会有磺胺二甲嘧啶残留。以单位质量的牲畜、禽类的重量计，当牲畜、禽类体内的磺胺二甲嘧啶的残留超过了100μg/kg，就会有一定的食品安全问题。随着人类对食品安全问题的重视程度日益提高，国家也颁布了食品中兽药残留检测的相关国家标准，如在国家标准GB/T21316-2007中规定了采用液相色谱质谱法对动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定，其采用乙腈-水混合溶液并以微波辅助的方法自待检测物中提取磺胺二甲嘧啶，随后进行色谱检测。虽然目前在食品安全检测领域有各种国家标准来检测并监督食品(即牲畜、禽类所制成的肉类食品)中磺胺二甲嘧啶的残留量，但是却没有针对磺胺类药物残留的源头(即牲畜、禽类等所吃的兽药)进行检测的方法或者相关检测标准的颁发。而采用相关的国家标准或者检测方法进行兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测时，在对待检测的兽药双黄连口服液样品进行预处理时，往往会出现预处理后得到的样品浑浊，从而导致样品的检测结果不准确，且检测方法的检出限过高的问题。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本申请的目的在于提供一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法，其具有检测方法的检出限低、检测准确的优点。为实现上述目的，本申请提供了如下技术方案：一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法，包括以下步骤：S1、于待检测的兽药双黄连口服液中加去离子水溶解后，加入乙腈萃取，得到萃取液；S2、随后于所述萃取液中加入氯化钠，混匀后振荡，随后离心，得到上清液1；S3、脱除所述上清液1中的乙腈，获得残渣；S4、于所述残渣中加入磷酸缓冲液-甲醇的混合溶液后混匀，得到复溶溶液；S5、将所述复溶溶液在8000-15000r/min的转速下离心5-10min，随后过微滤膜，得到上清液2，将所述上清液2过滤后进行液相色谱-串联质谱仪检测。通过采用上述技术方案，兽药双黄连口服液中含有金银花、银翘和黄岑的提取物以及糖类、色素等，溶液呈黄褐色。本申请利用乙腈和水的混合溶液将兽药双黄连口服液溶解后，得到的萃取液分层为有机相(即乙腈所在的相层，位于上层)和水相(即去离子水所在的相层，位于下层)。此时，兽药双黄连口服液中的极性的、易溶于水或者只溶于水的物质(包括糖类等)易于分配至水相中，同时还有部分极性较弱的有机物分配在水相中；而能够溶于乙腈的物质(包括大部分的磺胺二甲嘧啶等)分配至有机相，同时有少量的无机物也分配于有机相中。然而在进行了步骤S1之后，有机相和水相的分层并不明确，常出现溶液浑浊或者溶液为乳浊液的情况，而得到的有机相中磺胺二甲嘧啶的含量较少且杂质(糖类、色素等)多，即：兽药双黄连口服液中的糖类、色素、以及磺胺二甲嘧啶并没有彼此分离。这样的萃取结果无法有效分离纯化磺胺二甲嘧啶，使得后期磺胺二甲嘧啶的检测无法进行。在步骤S2中，于萃取液内加入氯化钠后，使得水相和有机相的分层更加清晰明确：有更多的糖类分配于水相，同时，大部分色素也分配于水相，使得水相呈现为褐色；而有机相为清澈透明溶液，且大部分的磺胺二甲嘧啶已分配于有机相。出现上述情况的原因在于，氯化钠的加入使得该分相体系内的物质分配会有所变化，具体为：氯化钠溶解于水相，增加了水相中的离子浓度，使得水相中的溶液的极性更强，从而促使更多的有机物分配在有机相，更多的无机物(包括糖类和色素等)分配至水相，进而保证磺胺二甲嘧啶能够完全被提取出来；此外，氯化钠的加入，也进一步促进了初始时溶解在有机相中的无机物进入水相，实现了对乙腈中磺胺二甲嘧啶的初步纯化；同时，氯化钠的加入还减小了萃取体系的乳化程度，使得有机相和水相的分层更加明确。步骤S2中将添加氯化钠和离心配合操作后，使得萃取液有更加明晰的水相-有机相的分界线，上清液1呈现为淡黄色的透明溶液，此时大部分磺胺二甲嘧啶已分配至乙腈内；下层呈现为褐色溶液，分配在水相的主要是多糖、色素等物质。至此，实现了对磺胺二甲嘧啶的有效提取。由于能够溶于乙腈中的物质种类较为繁杂，所以步骤S2之后，得到的上清液1中还含有较多的杂质(其中包括和磺胺二甲嘧啶一样也能够溶解于乙腈中的其它有机物)，因此通过步骤S3脱除乙腈之后，在步骤S4中采用磷酸缓冲液-甲醇的混合溶液对自步骤S3中得到的残渣进行复溶，以除去其它的有机物杂质，进一步提纯磺胺二甲嘧啶，最终得到淡黄色的含有磺胺二甲嘧啶的磷酸缓冲液-甲醇的混合溶液。本申请通过一个整体的提取方案，方案中的每一个前序步骤都和后序步骤相互配合，逐步将磺胺二甲嘧啶自兽药双黄连口服液中提取出来，并最终能够实现对兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶含量的准确测定。除此以外，本申请的检测方法具有检出限低的优势，能够对较低浓度的磺胺二甲嘧啶进行检测，检出限低至50μg/L。进一步地，步骤S1中，所述去离子水和所述乙腈的体积比为1：(3-8)；以单位体积的所述萃取液计，所述兽药双黄连口服液的量为0.03-0.11g/mL。通过采用上述技术方案，将去离子水、乙腈和兽药双黄连口服液的用量限定在上述的比例范围之后，能够更好地实现兽药双黄连口服液中的磺胺二甲嘧啶在有机相中的分配，并促使兽药双黄连口服液中的无机物(包括糖类和色素等)分配至水相。进一步地，步骤S2中，以单位体积的所述萃取液计，所述氯化钠的添加量不低于0.4g/mL。通过采用上述技术方案，上述的氯化钠添加浓度能最大程度上促进有机相和水相的分层，利于后期的上清液1的获得。进一步地，步骤S2中，振荡时间不低于8min。通过采用上述技术方案，充分的振荡，以保证兽药双黄连口服液中的不同组分能够充分地分别和去离子水、乙腈接触，进而使得相应的组分分配在不同相层。即，有效促进多糖、色素分配在水相，而磺胺二甲嘧啶等分配在有机相。进一步地，步骤S2中，振荡后在3000-5000r/min的转速下离心5-8min。通过采用上述技术方案，使得分层后的有机相中的物质分配更加稳定，得到透明的上清液1。进一步地，步骤S4中，所述磷酸缓冲液-甲醇的混合溶液中磷酸缓冲液和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、于待检测的兽药双黄连口服液中加去离子水溶解后，加入乙腈萃取，得到萃取液；/nS2、随后于所述萃取液中加入氯化钠，混匀后振荡，随后离心，得到上清液1；/nS3、脱除所述上清液1中的乙腈，获得残渣；/nS4、于所述残渣中加入磷酸缓冲液-甲醇的混合溶液后混匀，得到复溶溶液；/nS5、将所述复溶溶液在8000-15000 r/min的转速下离心5-10 min，随后过微滤膜，得到上清液2，将所述上清液2过滤后进行液相色谱-串联质谱仪检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、于待检测的兽药双黄连口服液中加去离子水溶解后，加入乙腈萃取，得到萃取液；
S2、随后于所述萃取液中加入氯化钠，混匀后振荡，随后离心，得到上清液1；
S3、脱除所述上清液1中的乙腈，获得残渣；
S4、于所述残渣中加入磷酸缓冲液-甲醇的混合溶液后混匀，得到复溶溶液；
S5、将所述复溶溶液在8000-15000r/min的转速下离心5-10min，随后过微滤膜，得到上清液2，将所述上清液2过滤后进行液相色谱-串联质谱仪检测。


2.根据权利要求1所述的一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法，其特征在于，步骤S1中，所述去离子水和所述乙腈的体积比为1：（3-8）；以单位体积的所述萃取液计，所述兽药双黄连口服液的量为0.03-0.11g/mL。


3.根据权利要求1所述的一种兽药双黄连口服液中磺胺二甲嘧啶的检测方法，其特征在于，步骤S2中，以单位体积的所述去离子水计，所述氯化钠的添加量不低于0.4-g/mL。

【专利技术属性】
技术研发人员：张萌萌，李宗进，姬桂花，郭超晖，李震，杜志毅，王璐，
申请(专利权)人：北京精益捷检测科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11