表达膜结合IL-10的遗传重编程的Treg制造技术

提供了核酸分子，其包含编码任选地通过柔性铰链连接至跨膜‑胞内区段的同型二聚体IL‑10的核苷酸序列，以及包含和表达该核酸分子的哺乳动物调节性T细胞(Treg)及其用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】表达膜结合IL-10的遗传重编程的Treg专利
本专利技术通常涉及表达膜结合IL10的遗传重编程的调节性T细胞以及它们在增加全身性免疫抑制和治疗表现为免疫系统过度活性的疾病中的用途。专利技术背景利用CD4调节性T细胞(Treg)抑制局部炎症并恢复免疫平衡在治疗多种不同病理学情况中具有广阔的前景，包括自身免疫疾病、炎性肠疾病、过敏、动脉粥样硬化、移植排斥，移植物抗宿主病等。然而，天然(nTreg)或诱导(iTreg)Treg在整个人CD4T细胞群体中均仅形成很小的部分。因此，迫切需要开发基于Treg的疗法以募集、诱导或工程化足够数量和稳定表型的自体或同种异体Treg，这对临床疗效和治疗安全性是至关重要的。
技术实现思路
在一个方面，本专利技术提供分离的核酸分子，其包含编码任选地通过柔性铰链连接至跨膜-胞内区段的同型二聚体IL-10(本文中称为mem-IL10)的核苷酸序列。在不同的方面，本专利技术提供包含核酸分子的组合物，核酸分子包含编码如本文所定义的连接至跨膜-胞内区段的同型二聚体IL-10的核苷酸序列。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含编码含有连接至跨膜-胞内区段的同型二聚体IL-10的膜结合的同型二聚体IL-10(mem-IL10)的核苷酸序列的核酸分子。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180323 US 62/647,0841.一种包含编码含有连接至跨膜-胞内区段的同型二聚体IL-10的膜结合的同型二聚体IL-10(mem-IL10)的核苷酸序列的核酸分子。


2.如权利要求1所述的核酸分子，其中所述同型二聚体IL-10通过柔性铰链连接至所述跨膜-胞内区段。


3.如权利要求1或2所述的核酸分子，其中所述同型二聚体IL-10包含以单链构型连接的第一和第二IL-10单体，使得第一IL-10单体的C-末端经由第一柔性接头连接至第二IL-10单体的N-末端。


4.如权利要求3所述的核酸分子，其中所述第一柔性接头具有氨基酸序列GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQIDNO:1)。


5.如权利要求2至4任一项所述的核酸分子，其中所述柔性铰链包含多肽，该多肽选自CD8α的铰链区、IgG重链的铰链区、IgD重链的铰链区；IL-10Rβ链的胞外区段；和第二柔性接头，该第二柔性接头包含含有至少一个Gly4Ser(Gly3Ser)2序列的多达28个氨基酸的氨基酸序列。


6.如权利要求5所述的核酸分子，其中所述第二柔性铰链包含含有氨基酸序列Gly4Ser(Gly3Ser)2的21个氨基酸的序列(本文中称为“短接头”；SEQIDNO:13)。


7.如权利要求5所述的核酸分子，其中所述第二柔性接头包含含有氨基酸序列Gly4Ser(Gly3Ser)2Ser2(Gly3Ser)3的28个氨基酸的序列(本文中称为“长接头”；SEQIDNO:15)。


8.如权利要求5至7任一项所述的核酸分子，其中所述多肽进一步包含具有序列SSQPTIPI(SEQIDNO:17；)的氨基酸桥。


9.如权利要求1至8任一项所述的核酸分子，其中所述跨膜-胞内区段衍生自人I类MHC分子的重链，该人I类MHC分子选自HLA-A、HLA-B或HLA-C分子，优选为HLA-A2；人CD28；或人IL-10Rβ链。


10.如权利要求1至9任一项所述的核酸分子，其中完整mem-IL10的氨基酸序列包含经由短的第二柔性接头和连接肽连接至HLA-A2的跨膜-胞内区段的同型二聚体IL-10或基本上由其组成，如SEQIDNO:25所示。


11.如权利要求1至9任一项所述的核酸分子，其中完整mem-IL10的氨基酸序列包含经由长的第二柔性接头和连接肽连接至HLA-A2的跨膜-胞内区段的同型二聚体IL-10或基本上由其组成，如SEQIDNO:27所示。


12.如权利要求1至9任一项所述的核酸分子，其中该同型二聚体IL-10经由...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·格罗斯，H·温斯坦马罗姆，A·克罗纳，
申请(专利权)人：加维什加利里生物应用有限公司，
类型：发明
国别省市：以色列;IL