一种用于诊断泡型棘球蚴病的串联蛋白及其克隆表达方法技术

本发明专利技术公开了一种用于诊断泡型棘球蚴病的串联蛋白及其克隆表达方法，该串联蛋白由EmAgB3基因和Em18基因通过GGGS串联后，转化E.coli并诱导表达的，串联后的蛋白，其分子量比原有蛋白增大了许多，随之抗原性也得到了增强。这为建立更加敏感和特异的血清学诊断方法、疫苗的研制和免疫预防奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种用于诊断泡型棘球蚴病的串联蛋白及其克隆表达方法
本专利技术涉及基因工程领域及蛋白质组学领域，具体为一种用于诊断泡型棘球蚴病的串联蛋白及其克隆表达方法。
技术介绍
泡型棘球蚴病（Alveolarechinococcosis,AE）是由多房棘球绦虫（Echinococcusmultilocularis,Em）的续绦期幼虫感染引起的一种人畜共患寄生性蠕虫疾病。该病在中国、日本、俄罗斯、中亚和北美部分地区流行严重。根治性肝切除手术是目前唯一比较可靠的治疗方法。因此，AE早期免疫诊断是降低本病死亡率的关键要求。对AE进行早期诊断并采取及时措施，可显著降低因AE造成的低死亡率。目前，对于该病的诊断，尤其是确诊该病，还主要依赖于病原学及影像学诊断。但影像学诊断需要影像学背景知识，操作复杂，却又不易识别较小和非典型的病灶，尤其又不易与脓肿或肿瘤进行区别当前，基于纯化的天然抗原Em2的酶联免疫吸附试验（Em2-ELISA）的诊断方法已被世界卫生组织推荐用于AE的血清诊断。
技术实现思路
本专利技术的目的一在于提供一种用于诊断泡型棘球蚴病的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种串联蛋白EmAgB3-GGGS-Em18，其特征在于所述串联蛋白保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO: M 2019622。/n

【技术特征摘要】
1.一种串联蛋白EmAgB3-GGGS-Em18，其特征在于所述串联蛋白保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNO:M2019622。


2.根据权利要求1所述的一种串联蛋白EmAgB3-GGGS-Em18，其特征在于所述串联蛋白用于诊断泡型棘球蚴病。


3.一种权利要求1或2所述的串联蛋白EmAgB3-GGGS-Em18的克隆表达方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：
（1）扩增EmAgB3和Em18基因：
扩增EmAgB3基因，其中上游引物引入BamHI酶切位点，下游引物引入HindIII酶切位点，引物序列如下：
EmAgB3F：5´-CGGATCCGATGATGATGAAGTGACC-3´；
EmAgB3R：5´-CAAGCTTCTACTCATCCTCTTTAAT-3´；
扩增Em18基因，其中上下游引物引入BamHI酶切位点，引物序列如下：
Em18F：5´-GGATCCGAAGGAGTCTGACTTAGCGGAT-3´；
Em18R：5´-GGATCCTATTTGAGGTTGGCCAGCTTCGT-3´；
（2）EmAgB3-GGGS-Em18的基因合成：
根据EmAgB3和Em18的基因序列，在其上游加上NdeI酶切位点，在其下游加上XhoI酶切位点的序列进行生物合成，并在EmAgB3和E...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡其刚，韩秀敏，
申请(专利权)人：青海省畜牧兽医科学院，青海省人民医院，
类型：发明
国别省市：青海;63