一种冻干保护剂、PCR扩增试剂及其冻干方法和应用技术

本发明专利技术适用于生物技术诊断检测领域，提供了一种冻干保护剂、PCR扩增试剂及其冻干方法和应用，该PCR扩增试剂包括扩增反应体系和冻干保护剂；其中，冻干保护剂包括如下组分：甘油、海藻糖、蔗糖、吐温‑80、右旋糖酐‑40、甘氨酸、组氨酸、谷氨酸钠、抑菌剂、叔丁醇。本发明专利技术提供的冻干保护剂，可与荧光PCR需要用到的组分制备在一起，也可搭配任意PCR检测所需引物和探针，并进行冻干以制得PCR扩增试剂；该PCR扩增试剂不仅能够实现常温运输及保存，且在使用时只需用ddH

【技术实现步骤摘要】
一种冻干保护剂、PCR扩增试剂及其冻干方法和应用
本专利技术属于生物技术诊断检测领域，尤其涉及一种冻干保护剂、PCR扩增试剂及其冻干方法和应用。
技术介绍
实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质检测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。荧光定量PCR技术是目前诊断检测领域最常使用的检测方法，因为此方法灵敏性高，特异性强，简单快速，可在几小时内出检测结果。其反应的必要条件包括：荧光PCR反应体系、引物和探针。其中，荧光PCR反应缓冲系统组成成分通常为化学试剂、水，这一类试剂在储存过程中较为稳定；引物、探针、dNTP为通过化学方法合成的试剂，需要低温保存以避免其性状发生变化从而影响使用效果；Taq酶为通过基因表达方法得到的一种活性蛋白，需要低温保存以保持其活性；若将酶、dNTP、引物探针混合在一起保存，在液体状态下引物探针会结合形成二聚体结构，从而影响扩增效果。目前市场上荧光定量PCR类产品的组份通常为：PCR反应液，酶，阳性对照和阴性对照。其中，P本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种冻干保护剂，其特征在于，包括如下浓度的组分：甘油3~7wt%、海藻糖80~120mg/mL、蔗糖80~120mg/mL、吐温-80 0.3~0.7wt%、右旋糖酐-40 3~7mmol/L、甘氨酸5~15mg/mL、组氨酸5~15mg/mL、谷氨酸钠0.5~1.5wt%、抑菌剂0.1~0.5wt%、叔丁醇0.5~1.5wt%。/n

【技术特征摘要】
1.一种冻干保护剂，其特征在于，包括如下浓度的组分：甘油3~7wt%、海藻糖80~120mg/mL、蔗糖80~120mg/mL、吐温-800.3~0.7wt%、右旋糖酐-403~7mmol/L、甘氨酸5~15mg/mL、组氨酸5~15mg/mL、谷氨酸钠0.5~1.5wt%、抑菌剂0.1~0.5wt%、叔丁醇0.5~1.5wt%。


2.根据权利要求1所述的一种冻干保护剂，其特征在于，所述冻干保护剂包括如下浓度的组分：甘油4~6wt%、海藻糖90~110mg/mL、蔗糖90~110mg/mL、吐温-800.4~0.6wt%、右旋糖酐-404~6mmol/L、甘氨酸8~12mg/mL、组氨酸8~12mg/mL、谷氨酸钠0.8~1.2wt%、抑菌剂0.1~0.3wt%、叔丁醇0.8~1.2wt%。


3.根据权利要求1或2所述的一种冻干保护剂，其特征在于，所述抑菌剂包括甲基氯异噻唑啉酮和甲基异噻唑啉酮；所述甲基氯异噻唑啉酮和甲基异噻唑啉酮的质量比为(2~4):1。


4.一种PCR扩增试剂，包括扩增反应体系，其特征在于，还包括如权利要求1~3中任一项所述的冻干保护剂。


5.根据权利要求4所述的一种PCR扩增试剂，其特征在于，所述扩增反应体系包括热启动酶、UNG酶和dNTP。


6.根据权利要求5所述的一种PCR扩增试剂，其特征在于，所述PCR扩增试剂包括如下浓度的组分：热启动酶0.02~0.06U/μL、UNG酶0.0001~0.0005U/μL、dNTP150~250μmol/L、甘油3~7wt%、海藻糖80~120mg/mL、蔗糖80~120mg/mL、吐温-800.3~0....

【专利技术属性】
技术研发人员：马晶晶，张江，韩相敏，徐添悦，吴碧清，赖志，高俊锋，蒋洁，徐莉，代书玲，
申请(专利权)人：上海创宏生物科技有限公司，上海农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：上海;31