一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒，包括ASFV p72基因特异引物探针、内参猪β

【技术实现步骤摘要】
一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物
领域，具体涉及一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)引起的急性、烈性、高度接触性的传染病，给全球养猪业带来了威胁。2020年，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家非洲猪瘟专业实验室在开展非洲猪瘟流行病学监测及病原学研究中发现，低致死率的非洲猪瘟2型自然变异流行株，如CD2v基因缺失株，这些基因缺失株与典型强毒致病力降低，但仍具有明显的残留毒力，较高剂量接种猪可引起亚急性、慢性病程和部分死亡，较低剂量感染则主要引起持续感染和慢性病程，具有很强的水平传播能力。
[0003]目前商品化的试剂盒大部分为P72单一基因的PCR扩增，并不能同时满足于P72、I177L和CD2v三种基因的鉴别诊断，无法快速而又准确的监测非洲猪瘟疫情的发生。

技术实现思路

[0004]针对现有技术存在的不足，本专利技术实施例的目的在于提供一种非洲猪瘟三重荧光定量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，包括ASFV p72基因特异引物探针、内参猪β
‑
actin的引物探针、ASFVI177L基因特异引物探针和ASFV CD2v基因特异引物探针中的至少一种。2.如权利要求1所述的一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，其中针对ASFV p72基因的如下引物探针：P72基因正向引物：5
’‑
TCTGCAGCTCTTACATAC
‑3’
(SEQ ID NO:1)P72基因反向引物：5
’‑
CTTGCTCTGGATACGTTA
‑3’
(SEQ ID NO:2)P72基因探针：5
’‑
CCACTACGGAGGCAATGCGA
‑3’
(SEQ ID NO:3)p72探针的5
’
端标记报告荧光基团为FAM，3
’
端标记荧光猝灭基团为BHQ1。3.如权利要求1所述的一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，针对内参猪β
‑
actin的引物和探针：内参基因正向引物：5
’‑
CGGCTGAGAGAACATGGA
‑3’
(SEQ ID NO:4)内参基因反向引物：5
’‑
GGCATAAACCCCACTCCT
‑3’
(SEQ ID NO:5)内参基因探针：5
’‑
CGACTGCACTGCACTTGGTCGATCTG
‑3’
(SEQ ID NO:6)；内参探针的5
’
端标记报告荧光基团为HEX，3
’
端标记荧光猝灭基团为BHQ1。4.如权利要求1所述的一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，针对ASFVI177L基因的如下引物探针：I177L基因正向引物：CCACTAACAACCAAATCA(SEQ ID NO:7)I177L基因反向引物：CCACATTAAAAGATTATTATATTCG(SEQ ID NO:8)I177L基因探针：ACAACTTTGTCACCAGATGTTACAT(SEQ ID NO:9)；I177L探针的5
’
端记报告荧光报告基团为ROX，3
...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩相敏，马晶晶，赖志，吴汉宇，贾济宇，奉中花，孔维苏，高俊锋，盘金华，
申请(专利权)人：上海创宏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：